细胞培养中的马血清说起细胞培养用的血清,大多数人都会想到胎牛血清、新生牛血清,对于马血清却知之甚少。现在就给大家介绍一下血清中“低调的高手”——马血清。马血清作用细胞培养级的马血清,经过多次过滤,去除了许多大分子蛋白,但保留了血清中促细胞生长的活性因子,表现出与胎牛血清和牛血清的类似的特性,因而能用于细胞培养。马血清可以刺激成纤维细胞分化,以及细胞外基质(ECM)、细胞因子的合成。另外培养神经细胞和心肌细胞、诱导生成树突状细胞等实验均可用马血清替代胎牛血清。因此,马血清通常适用于那些研究有丝分裂后,细胞关于生长因子和激丨素等问题的实验。或许,我们可以这样说,从现有研究来看,马血清更适合用来研究特定种类细胞的分化。实际实验应用方面:马血清已被用作脑皮质神经元-胶质细胞培养的一种必添加物;大鼠的PC12细胞,在培养过程中,也需要在基础培养基中添加马血清作为补充剂。山东云海生物的胎牛血清,为细胞提供良好的营养支持,助力您的研究取得突破。贵州胎牛血清采购平台
血清为何要热灭活,有必要对所有血清都灭活吗?如何正确的进行灭活?加热可以灭活补体系统。启动的补体系统参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。在免疫学研究中,培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭清。实验显示,热灭清对大多数的细胞而言是不需要的,对于非必须的细胞来说血清灭活对于细胞生长只有微小甚至无任何作用,还可能造成生长速率降低,沉淀物还会明显增多,不利于细胞观察。因此,若非必须,不需要对血清进行灭活处理。将需要进行处理的血清置于56℃水浴30min,建议加放空白对照(同体积水)使用温度计测温,以测得温度为56℃时为计时起始点,加热中可不时轻度旋转混匀血清。杭州胎牛血清批发商选择山东云海生物的胎牛血清,您将获得高质量的原材料,从而提高实验的可靠性和成功率。
马血清的作用:1.提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长需要的物质。2.提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质()、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。3.提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。4.提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。5.对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。
如何避免沉淀物的产生?建议您在血清使用的过程中,采用正确的解冻方法(冷冻→4℃→室温),若血清解冻时改变的温度太大(如冷冻→37℃)非常容易产生沉淀物。温度过高、时间过久、摇晃不均匀等,都会造成沉淀增多,我们建议如非必要无须对血清进行灭活;若必须热灭活,应严格遵守56℃,30min的原则,并随时摇晃均匀。国产的各种系列胎牛血清国产的胎牛血清,国内没有严格意义的胎牛血清,胎牛血清本身是需要穿刺取血的,而国内都是剖腹产出胎牛,8小时左右取血,然后,进行过滤分装。所以,国产的胎牛血清不是严格意义的胎牛血清。不过也很多实验室使用,具体情况那就看实验的要求了。胎牛血清中含有丰富的生长因子和营养物质,促进细胞的生长和分化,加速实验进程。
这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。胎牛血清培养效果好于新生牛,且因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低。故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行细胞培养。胎牛血清根据实验要求的不同又进行了特殊加工工艺加工,那么在这么多种类的血清面前,要怎么选择适合自己细胞培养的那一款呢?我们需要知道都有哪些种类的牛血清和它们的用途:1透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白均被移除。透析血清主要用在进行营养成分优化和标定特定成分进行研究的实验中。2碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的亲脂类(lipophilic)物质,如某些、细胞因子、生长因子等,去除作用对分子量大小并无区分。碳吸附胎牛血清常用于体外培养研究验证的作用效果。3去外泌体血清适用于收集细胞分泌的外泌体时使用。4低IgG血清用于研究抗体、病毒和病毒反应、细胞表面抗原表位。稳定性和一致性,山东云海生物猪血清,保证每批产品质量稳定可重复。贵州猪血清订购
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胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到祛毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(比较常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报,或细胞类型或基础培养基的成分来确定相应浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质贵州胎牛血清采购平台
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