检测试剂盒标本保存方法:标本管中增加物质的影响。抗凝剂、酶抑制剂及快速分别血清的分别胶等均对测定有必定烦扰作用。标本溶血。由于各种人为原因引起的标本溶血,均可因红细胞破坏溶解时释放出很多具有过氧化物酶活性的血红蛋白,在以辣根过氧化物酶为符号的测定中,会导致非特异性显色,检测试剂盒烦扰测定作用。为打败上述烦扰作用,标本搜集时有必要留意避免溶血。标本保存不妥。 在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚组成多聚体、AFP可构成二聚体,在间接法测定中会导致本底过深、乃至形成假阳性;标本放置时刻过长(如一日以上),有时抗原或抗体免疫活性削弱,亦可出现假阴性。为打败上述烦扰,测定的血清标本宜为新鲜搜集;如不能立即测定,5天内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质部分浓缩,分布不均,应充沛混合后再测定,但混匀时应轻柔,不行激烈振荡。检测试剂盒变质的原因:样本因素。RNase A(10mg/ml,热灭活)
检测试剂盒标本保存方法:标本凝集不全。在没有促凝剂和抗凝剂存在的状况下,正常血液搜集后1/2~2h初步凝聚,18~24h完全凝聚。临床查验工作中,有时为了争取时刻快速检测,常在血液还未初步凝聚时即强行离心分别血清,此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原,在测定过程中可以构成肉眼可见的纤维蛋白块,易形成假阳性作用;这类状况于次日复查时因血凝已完全,血清中不再有纤维蛋白原存在,故复查作用变为阴性。为避免上述烦扰作用,处理的办法是血液标本搜集后有必要使其充沛凝聚后再分别血清,或标本搜集时用带分别胶的采集血液管或于采集血液管中加入适当的促凝剂。碳酸钠洗液(10%)检测试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶。
缓冲溶液的缓冲能力:在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用。组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH较小,缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算:此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内。
从试剂瓶取用试剂,用左手持量筒(或试管),并用大姆指指示所需体积刻度处。右手持试剂瓶(注意:试剂标签应向手心避免试剂沾污标签),慢慢将液体注入量筒到所指刻度。读取刻度时,视线应与液体凹面的低处保持水平。倒完后,应将试剂瓶口在容器壁上靠一下,再将瓶子竖直,以免试剂流至瓶的外壁。如果是平顶塞子,取出后应倒置桌上,如瓶塞顶不是扁平的,可用食指和中指(或中指和无名指)医学教育|网搜集整理将瓶塞夹住(或放在洁净的表面皿上),切不可将它横置桌上。取用试剂后应立即盖上原来的瓶塞,把试剂瓶放回原处,并使试剂标签朝外,应根据所需用量取用试剂,不必多取,如不慎取出了过多的试剂,只能弃去,不得倒回或放回原瓶。以免沾污试剂。固体试剂的取用:一支药匙不能同时取用两种或两种以上的试剂。
检测试剂盒实验经验分析:要保证移液的准确性,误差不能超过2%。可用水和天平">电子天平进行校正。校正方法自己放狗吧,但有专业人员进行矫正。要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排各一支(靠,基本是废话了)。吸取不同的液体后,要更换头。即使是吸取标准品时(应该是特别是!)。要在实验前1小时将检测试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定(这个是容易忽视的!)。实验时,要使底物避光保存。用吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大。RNase A(10mg/ml,热灭活)
液体试剂的取用方法试剂瓶取用试剂,用左手持量筒(或试管),并用大姆指指示所需体积刻度处。RNase A(10mg/ml,热灭活)
说明检测试剂盒的具体规则:汲取液体时要选用量程和需要量挨近的微量加样器吸,削减误差。液体全部参加酶标孔后,将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s,使液体充沛混合均匀,也使其得到充沛的反响。孵育时要使盖板膜封好酶标板,避免水分蒸发,以防曲线不成线性。实验前的30min将试剂盒中的所有试剂从冰箱取出,检测试剂盒使试剂盒中的所有试剂与提取好的样品溶液的温度相同,酶标板只需取出所需量。因为底物显色剂对光及其灵敏,因而要避光保存。手艺洗板时每次参加洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,避免穿插污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。RNase A(10mg/ml,热灭活)