检测试剂盒运用注意事项:在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为15～20min即可。若颜色较浅，可延长反响时间到30min。反之，则减短反响时间。反响停止液为2M硫酸，防止接触皮肤。不要运用过了有用日期的检测试剂盒；也不要运用过了有用期的试剂盒中的任何试剂，掺杂运用过了有用期的检测试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交流运用不同批号试剂盒中的试剂。试剂盒具有的几个优点：吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；稳定的重复性和可靠性；灵敏、特异的抗体。检测试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶。糊精水溶液(1%)
缓冲溶液的计算分为两大类：（1）已知共轭酸碱的浓度或质量，计算pH值。（2）已知pH值，计算配制时要满足的浓度和质量配制缓冲溶液时，有多种组合的方法，常见的有以下几种（1）两种溶液混合：如，NH3+NH4Cl溶液，NaOH溶液 +NH4Cl溶液，NH3+HCl溶液。（2）固体试剂+溶液：如，NH3+NH4Cl固体，NaOH固体 +NH4Cl溶液，HAc+NaAc固体。（3）两种固体试剂溶解混合：如，NaOH固体 +NH4Cl固体，Na2CO3固体+NaHCO3固体。由此可见，缓冲溶液的计算类型是很丰富的。实验中的配制一般是按共轭酸碱的量来称取或量取试剂后，再溶解混合到指定体积。但分析化学学习中的计算类型则可以演绎出十几种计算情况。EDTA溶液(0.25mol/L,pH8.0)试剂的稳定性对准确度非常重要。
用pH计测定配制好的盐溶液的pH值，使其在6.4~7.0之间。一般盐雾标准中要求试验过程中的盐雾收集液pH值在6.5~7.2之间。当pH值不在上述范围时，应用氢氧化钠（NaOH）或者冰乙酸（CH3COOH）进行调节。氢氧化钠可以使pH值升高，冰乙酸使pH值降低。通常只需要加入少量的即可调节pH值。在氯化钠溶液中加入少量冰乙酸，搅拌均匀，并用pH计测量溶液的pH值，直至其为3.0-3.1之间，试验过程中收集液的PH值应在3.1-3.3之间。配制好乙酸盐雾溶液后，加入氯化铜，其浓度为0.26g/L±0.02g/L（即0.205g/L±0.015g/L无水氯化铜）。调节溶液的pH值，直至其为3.0-3.1之间，试验过程中收集液的PH值应在3.0-3.1之间。
检测试剂盒实验注意事项有哪些？正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。在实验中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括：固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。检测试剂盒保存：部分试剂保存于-20℃，部分试剂保存于2-8℃，详细以标签上的标明为准。
潮霉素 B使用方法：一、 储存液的配制（50mg/ml）称取1 g 潮霉素B（CH6362）用PBS（0.01 M）溶液或去离子水溶解，定容20ml。0.22μm滤器过滤除菌，分装于无菌冻存管，2-8℃冷藏，1年内稳定。或直接选购潮霉素B溶液（50mg/ml，CH6361）二、 工作浓度的筛选：潮霉素B用来筛选的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于开始次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定较佳筛选浓度。一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；菌类300-1000μg/mL。检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用。巴氏染色液(Papanicolaou EA36)
如果试剂符合基准物质的要求 (组成与化学式相符、纯度高、稳定)，可以直接配制标准溶液。糊精水溶液(1%)
加药时间:由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早；但是也不能太晚，因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大，增值较慢，时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没，终导致筛选不出阳性克隆，一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降，所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。培养液:加药筛选约6天左右，细胞会大量死亡，孔中只剩下的细胞。这时会出现两个问题：1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质，导致那些有neo表达的阳性细胞死亡，即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少，细胞之间的信号会变得很弱，也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液：假如你要转染3T3细胞，在3T3细胞汇合度达到80%的时候，换液，培养过夜之后收集培养液，通过滤器消毒，和新鲜的培养液按1：1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。糊精水溶液(1%)
