加药时间:由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早；但是也不能太晚，因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大，增值较慢，时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没，终导致筛选不出阳性克隆，一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降，所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。培养液:加药筛选约6天左右，细胞会大量死亡，孔中只剩下的细胞。这时会出现两个问题：1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质，导致那些有neo表达的阳性细胞死亡，即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少，细胞之间的信号会变得很弱，也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液：假如你要转染3T3细胞，在3T3细胞汇合度达到80%的时候，换液，培养过夜之后收集培养液，通过滤器消毒，和新鲜的培养液按1：1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。注意ELISA检测试剂盒保存期，过保存期的试剂不能使用。RIPA裂解液(强)
检测试剂盒正确保存与操作办法？检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗刷液可能会有结晶分出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响成果。各步加样均应运用加样器，并常常校正其准确性，以防止试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，引荐运用排加样。请每次测定的一起做规范曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于规范品孔*孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定，核算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。尼氏染色液(焦油紫法)BMC原代分离步骤：吸取稀释血液，在离分层液上方1cm处，沿试管壁徐徐加入。
检测试剂盒的要点有哪些？在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。一切试剂瓶盖须盖紧以避免蒸腾和污染，试剂避免受到微生物的污染，由于蛋白水解酶的干扰将导致出现过错的成果。当心汲取试剂并严格遵守给定的孵育时刻和温度。请注意在汲取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，*个孔与后一个孔加样之间的时刻距离假如太大，将会导致不同的 “预孵育”时刻，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且，洗涤不充分将影响实验成果。检测试剂盒保存：部分试剂保存于-20℃，部分试剂保存于2-8℃，详细以标签上的标明为准。
标准物质的正确使用:不确定度表示被测量值的分散性，不同的标准物质其特性的不确定度也不同。在选择标准物质时应当考虑其对考虑其对预期分析结果要求的不确定度水平的影响。除生产者确定的不确定度外，标准样品的不同处理过程也会影响分析结果的不确定度，例如标准物质与分析样品基体之间有差异时，或使用与标准物质定值方法不同的分析方法时，可能其不确定度与生产者提供的会有差异。使用标准物质时，其不确定度并不是越小越好，还应当考虑供应状况、成本、预期使用的化学适用性和物理适用性。配制ph计的3mol/L的KCL溶液 ph计的ph电极在使用前都是被护套里的保护液保护着。
标准物质RM（reference material）是具有准确量值的测量标准，是具有一种或多种足够均匀并已确定特性值的，用于校准设备、评价测量方法或给材料赋值的材料或物质。应用于化学测量、生物测量、工程测量、无力测量等领域。有证标准物质CRM（certified reference material）是附有证书的标准物质，用建立了溯源性的程序来确定其一种或多种特性值，使之可溯源到准确复现的用于表示该特性值的计量单位，而且每个标准值都附有给定置信水平的不确定度。其证书是介绍标准物质的技术文件，是研制者/生产者向用户提出的质量保证。证书给出了标准物质的标准值及其准确度，扼要的描述标准物质的制备程序、均匀性、稳定性、特性量值及其测量方法，介绍标准物质的正确使用方法、储存方法。所有的化学分析，定性定量，都依赖于，并且后，可溯源至一种有证标准物质或某种类型的标准物质。检测试剂盒将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。GTBE电泳缓冲液(10×)
已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。RIPA裂解液(强)
检测试剂盒应该如何保存？血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。实验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已普遍应用在免疫学检验的各领域中。检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗体检测。RIPA裂解液(强)
