检测试剂盒以免疫学反应为根底，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗刷除去剩余的游离反应物，从而确保试验结果的特异性与稳定性。运用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入，再与HRP符号的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，通过完全洗刷后加底物TMB显色。检测试剂盒TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线核算样品的浓度。固体试剂的取用:直接倾倒时瓶口必须紧挨试管口，试管45度，并且缓缓地倒。Mallory磷钨酸苏木素染色液(PTAH化学氧化法)
检测试剂盒安全性：试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀检测试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。N6培养基见光易分解的试剂（如硝酸银）应装在棕色瓶中。
检测试剂盒冷冻后的质量会受损吗？检测试剂盒可以冷冻，但不能反复冻融，如果您在一周之内做实验，可以2-8℃保存。如果在一周至一个月之内做实验，可以-20℃保存。如果在一个月以上做实验，可以-80℃保存。但是值得注意的是，冻融一次比2-8℃保存损失更大，主要是因为蛋白的降解，冻融一次蛋白都有降解。检测试剂盒实验标本要求:标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
检测试剂盒检测成果分析办法:试验中样品都要做复孔或三孔，然后计算每个浓度规范品的均匀OD值，复孔的变异系数应该小于20%。均匀OD值减去空白孔的OD值。制造规范曲线。以减去本底后的OD值为X轴，规范品的浓度为Y轴，运用作图软件得出一个适宜的计算办法。主张运用适宜的软件来作图，比方CurveExpert 1.4。这款软件能够给出许多种办法(比方直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中挑选一条*适宜的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据符合，能够将规范品的浓度作为未知数，将对应的OD值带入该方程，计算出规范品的浓度，得到的成果应该与实际浓度很挨近(+/-10%)。挑选拟合度的那条曲线。检测试剂盒孔底透明度高的固相载体。
弱酸-弱碱型缓冲溶液的构成与配制。这类缓冲溶液的组成为：弱酸+弱酸盐（即共轭碱）、弱碱+弱碱盐（即共轭酸）。常见的实例有：HAc-NaAc、HAc-NH4Ac（微酸性）、NH4Cl-NH3.这类缓冲溶液的实验室配制方法一般是根据溶液组成和浓度要求，直接称取或量取弱酸、弱酸盐溶液或弱碱、弱碱盐溶液来配制。其实，这类缓冲溶液还可以用强酸与弱碱、强碱与酸来配制，归纳起来，应该有三种配制方法：（1）弱酸+弱酸盐，弱碱+弱碱盐例如，HAc-NaAc、NH4Cl-NH3（2）弱酸（过量）+强碱（适量），弱碱（过量）+强酸（适量）例如，HAc（过量）-NaOH（适量）、NH3（过量）-HCl（适量）。这类缓冲溶液需要的共轭碱（NaAc）或共轭酸（NH4Cl）是通过反应后产生的。（3）弱酸盐（过量）+强酸（不足量）或弱碱盐（过量）+强碱（不足量）例如，NaAc（过量）+HCl（适量），NH4Cl（过量）+NaOH（适量）缓冲溶液需要的弱酸（HAc）或弱碱（NH3）则通过反应后产生。利福平溶液怎么配制：配制时每毫升可加入～5滴 10 N NaOH以助溶。β-甘油磷酸钠溶液(5%)
科研实验中试剂取用应注意事项：读数时量筒必须放平稳。Mallory磷钨酸苏木素染色液(PTAH化学氧化法)
使用方法：1， 固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行染色。 2， 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。 3， 室温染色 5-10 分钟。 4， 吸除染色液，生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。 5， 置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。 溶液注意事项： dapi 被普遍认为具有致性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。 本产品需避光，并尽量避免反复冻融。荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。Mallory磷钨酸苏木素染色液(PTAH化学氧化法)
