检测试剂盒运用注意事项:在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为15~20min即可。若颜色较浅,可延长反响时间到30min。反之,则减短反响时间。反响停止液为2M硫酸,防止接触皮肤。不要运用过了有用日期的检测试剂盒;也不要运用过了有用期的试剂盒中的任何试剂,掺杂运用过了有用期的检测试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交流运用不同批号试剂盒中的试剂。试剂盒具有的几个优点:吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;稳定的重复性和可靠性;灵敏、特异的抗体。当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。氧化酶试验试剂(单试剂)
检测试剂盒办法的三大特色表现:1.稳定性好:包被的抗原的稳定性可使检测试剂盒的效期得到保证,早期以组成肽为包被抗原的检测试剂盒效期只有3-4个月,选用基因工程抗原后效期很大程度延长了。2.基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达,表达产品包括更多的抗原决定簇,可进步检测试剂盒的灵敏度,进步检出率。3.分子量大:组成肽选用化学办法制备,由于工艺的限制,组成数量有限,只能达到数百个氨基酸。而使用基因工程制备的抗原,分子量更大。马铃薯葡萄糖水培养基(不含琼脂)液体试剂给药途径多,可以内服,外用。
我们如何避免实验中基质效应?基质效应可以通过产品研发阶段的优化尽可能去消除的。上海通蔚生物科技针对产品研发进行了多种优化。检测试剂盒在开发进程中,标准品不选用人或动物血清、血浆作为标准曲线的稀释液,只能选用其仿照物。我们量身定制的缓冲液系统,这些优化后的缓冲液体系能很好消除基质效应。还有当检测某个分析物时,其他相关因子或类似结构因子如果有非特异性结合,也会导致基质效应,我们也因此做了大量的交叉反应,确保没有明显的交叉反应和干扰。而且我们检测试剂盒必须通过严格的基质效应测试,全部包括线性稀释和掺入回收率实验,并把测试结果记录在说明书中。
怎样减少检测试剂盒误差?严控反应时间,反应时间过长,酶失活;反应时间过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,生成物结构松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假阴性。注意检测试剂盒保存期,过保存期的试剂不能使用。评估试剂的实用性,试剂的稳定与否,对准确率的高低到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品反复比照试验,判定试剂符合要求后方可使用。严格掌握显色时间,显色时间过短,加入终止液反应终止后,底物结合物的量过少,易出现假阴性。超过显色要求时间后显色,应判为假阳性,这可能与试剂本身有关。加显色剂后立即显色,不可报阳性,这可能是本底显色的结果。用无菌吸管吸掉上层血浆和血小板,不要碰到单个核细胞层。
校准液标示值往往是按其基质偏差修正的,所以标示值并非实际值。校准液、质控血清通常是经过处理的混合人或动物血清,这种制备物在特定分析系统中往往与人新鲜血清反应性不同而产生基质偏差。如总胆固醇测定基质效应研究指出:校准液酶法测定回收结果偏低可达5%~7%。甘油三酯测定,有人主张选用双试剂方法消除内源性甘油,这个方法是可行的,但忽视了一个化学平衡理论。因为所有的酯在水溶液中都不是简单地以酯的形式存在,而是以水解与酯化相平衡的形式存在。在一个平衡体系中,如果去除游离甘油,这个平衡就向生成甘油方向移动,甘油三酯就会重新水解,生成新的甘油,达到新的平衡,因此样品与R1试剂孵育时间越长,测得甘油三酯值就越低。甘油三酯测定,不只要去除游离甘油,而且还要克服样本含量真实性发生的变化,试剂中必须加入甘油激酶,并且延迟时间要标准化。所以,一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时,会带来样品含量真实性的变化。滴剂是指药物与适宜的溶剂或分散介质制成的滴至动物的头、背等部位局部给药的液体试剂。多酚氧化酶(PPO)检测试剂盒(邻苯二酚比色法)
检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用。氧化酶试验试剂(单试剂)
pH缓冲溶液的效能指标:pH缓冲溶液抵抗外加强酸、强碱的能力可以用缓冲容量β来表示,缓冲容量的意义是,使1L缓冲溶液的pH增大1个单位时需加入的强碱(NaOH)的物质的量(mol),或减小1个pH单位时时需加入的强酸(HCl)的物质的量,显然β越大,缓冲外加强酸强碱的能力就越大。β与pH、总浓度C及共轭弱酸碱的浓度比有关。式中的C为弱酸+弱酸盐(或弱碱+弱碱盐)的总浓度,显然,总浓度越大,缓冲能力就越大。式中的两个δ分别为弱酸HA、弱酸根A-(又称共轭碱)的分布分数值,δ定义为其平衡浓度与总浓度之比(我以前在论坛中曾作过介绍),它们也是pH值的函数。数据学上可以证明:恒定C时,当两个分布分数值均等于0.5时,缓冲容量较大,其实用意义是:选择缓冲溶液体系时,应该选弱酸与弱酸盐的浓度比接近1,而pH值仍能满足配制要求的体系,对于弱碱及弱碱盐溶液,也有同样的要求。氧化酶试验试剂(单试剂)