单个核细胞分离步骤:Ficoll试剂混匀:首先将Ficoll试剂瓶颠倒多次混匀,使用注射器法吸取Ficoll分离液(去掉聚丙烯盖,插入注射器针头)或吸管法吸取Ficoll分离液(去掉聚丙烯盖,拉起铝环,拉开金属密封,移除银环。拿掉橡胶密封,无菌操作吸取需要的Ficoll分离液)。1.离心管加入3mLFicoll分离液。2.稀释过的血液样本小心铺到Ficoll分离液上面。注:缓慢加入样本,小心不要和Ficoll分离液混合,勿搅动。1.室温条件,水平转子离心400g,离心30-40min,可见细胞分层。2.用无菌吸管吸掉上层血浆和血小板,不要碰到单个核细胞层。3.无菌吸管转移单个核细胞层到无菌离心管。固体试剂的取用:取固体量较多时用大匙,较少时用小匙。YPD/YEPD培养基
潮霉素 B使用方法:一、 储存液的配制(50mg/ml)称取1 g 潮霉素B(CH6362)用PBS(0.01 M)溶液或去离子水溶解,定容20ml。0.22μm滤器过滤除菌,分装于无菌冻存管,2-8℃冷藏,1年内稳定。或直接选购潮霉素B溶液(50mg/ml,CH6361)二、 工作浓度的筛选:潮霉素B用来筛选的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于开始次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定较佳筛选浓度。一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;菌类300-1000μg/mL。YPD/YEPD培养基科研实验中试剂取用应注意事项:当向量筒中倾倒液体接近所需刻度时,停止倾倒。
主要试剂配制:(1)PBS:PBS粉剂每袋加ddH2O定容至1000mL,调pH7.2,高压灭菌,4℃保存备用。(2)RPIM-1640培养基:临用前根据需要加15%胎牛血清,较后按1%体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素),使青霉素和链霉素的终浓度分别为100 U/mL和100 U/mL,置于4℃冰箱保存。(3)台盼蓝染液:称取4g台盼蓝,于研钵中用少量双蒸水研磨,加双蒸水至100mL,1500rpm离心15min,吸取上层液,即为4%水溶液。用前,用1.8%氯化钠溶液稀释1倍,即为2%台盼蓝染液。
潮霉素B溶液(Hygromycin B,50mg/ml)>20ml产品购须知:1、报价含普票含运费。2、可根据用户提供配方生产配置,详情咨询客服人员。3、大包装需求用户可根据订单生产。4、院校研究所支持货到付款。院校单位订购流程:咨询客服确定产品→告知客服人员收货开票信息→确立合同→等待收货→转账付款潮霉素B溶液(Hygromycin B,50mg/ml)>20ml为什么选择我们:1、3000余种实验室试剂,2000余种中草药标准品以及农药标准品现货供应,方便您的一站式采购。2、提供产品专业定*务,标准品可根据客户要求的规格包装。3、科研院校单位支持先发货后付款,解除老师报账上的困扰,免去您对产品质量的后顾之忧4、专业的客服人员解答,消除您心中对实验试剂选择的各种不确定。5、完善的售后服务,解除您的后顾之忧。6、杜绝暴利,节约您的每一分科研经费!淋巴细胞分离液是一种根据细胞密度差异,借助离心产生的重力加速度,进行细胞的分离纯化的常用试剂。
科研实验中试剂取用应注意事项:1. 取用少量的液体—使用胶头滴管a. 应在容器的正上方垂直滴入;胶头滴管不要接触容器壁【防止沾污试管或污染试剂】;b. 取液后的滴管,应保持橡胶胶帽在上,不要平放或倒置【防止液体倒流,沾污试剂或腐蚀橡胶胶帽】;c. 用过的试管要立即用清水冲洗干净;但滴瓶上的滴管不能用水冲洗,也不能交叉使用。2. 取用一定量的液体—使用量筒a. 当向量筒中倾倒液体接近所需刻度时,停止倾倒,余下部分用胶头滴管滴加药液至所需刻度线;b. 读数时量筒必须放平稳,视线与量筒内液体的凹液面的低处保持水平。固体试剂的取用:瓶塞必须倒放在桌面上【防止药品腐蚀实验台或污染药品】。YPD/YEPD培养基
固体试剂的取用:取用固体药品时药匙必须是干净的。YPD/YEPD培养基
pH缓冲溶液有何用途:(1)pH测量前标定校准pH计。(2)用以检定pH计的准确性,例如,用pH=6.86和pH=14.00,标定pH计后,将pH电极插入pH=9.18溶液中,检查仪器显示值和标准溶液的pH值是否一致。(3)在一般精度测量时检pH计是否需要重新标定。pH计标定并使用后也许会产生漂移或变化,因此在测试前将电极插入与被测溶液比较接近的标准缓冲液中,根据误差大小确定是否需要重新标定。(4)检测pH电极的性能。如何配制pH标准缓冲溶液:对于一般pH测量,可使用成套的pH组冲试剂(可配制250mL),配制溶液时,应使用去离子水,并预先煮沸15~30分钟,以除去溶解的二氧化碳。剪开塑料袋将试剂倒入烧杯中,用适量去离子水使之溶解,并冲洗包装袋,再倒入250mL容量瓶中,稀释至刻度,充分摇匀即可。YPD/YEPD培养基
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