浙江如何使用糖原染色试剂盒生产厂家

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：Schiff氏染液的配制是关键，尤其是偏重亚硫酸钠的质量，打开应是粉剂，且带有硫的气味，若成团或没有气味，则不能用，配制时使用的容器、药勺、称药天平与称药纸等必须洁净、无污染。新配制好的Schiff剂为无色透明液体[1]，配好后可分成小份置于-20℃保存，用时取一份恢复到室温即可。沈洪武等通过对比染色发现，冷冻保存1年的Schiff液的染色结果与新鲜配制的染色结果一致[5]。0.5％～1％高碘酸（pH值在3.0～5.0之间），环境温度以不高于20℃为宜，室温高时氧化时间适当缩短；如果染色时环境温度较高且高碘酸作用时间长，可使某些物质成分发生非特异反应，使染色结果出现假阳性。因此，室温较高时可适当缩短反应时间。较大增强了染色效果；性能稳定，特异性强；操作简捷，*需1h左右。浙江如何使用糖原染色试剂盒生产厂家

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：PAS染色时需于暗处加盖反应，染色时间10～20min（染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度，SO浓度高，染色时间适当缩短；环境温度高，染色时间也应适当缩短，反之则需适当延长反应时间）。染色过程中不能接触伊红，以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时，较好作消化对照，即取两张连续切片，其中一张脱蜡至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如经消化处理的切片染色阴性，不经消化处理的切片染色阳性，即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠（钾）溶液配置后，不能保存，因此，必须现配现用，用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。浙江如何使用糖原染色试剂盒生产厂家在滴加染液时，务必使染液完全覆盖组织，但不能溢出圈外，避免浪费试剂。

临床意义：1.急性白血病类型的鉴别 红白血病的幼红细胞PAS染色多呈阳性反应，阳性率高，反应强；成熟红细胞有时亦可为阳性；急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞PAS染色多为红色颗粒或块状阳性反应；急性粒细胞白血病的原粒细胞呈阴性或胞质呈弥漫淡色阳性反应；急性早幼粒细胞白血病　异常早幼粒细胞的PAS染色为阳性反应；急性单核细胞白血病原、幼单核细胞PAS染色阳性反应呈弥漫分布的红色细颗粒，巨核细胞白血病原巨核细胞PAS染色呈阳性或强阳性反应，表现为红色颗粒或块状。2.各类贫血的鉴别 MDS、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血（曾称地中海贫血）的幼红细胞PAS染色多为阴性反应，有时可出现阳性反应；巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。

染色的原理和临床意义：在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色，常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理，同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间，较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞，因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒－单核细胞白血病 该染色法在急性粒－单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞，甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应，因此酯酶双染色反应在急性粒－单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。糖原的固定要及时，而且标本要新鲜。

特殊染色方法选择应遵循：染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法；突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质，甲基紫染色法虽然流程较为简单，但结果不易保存，阳性对比度相对不突出；刚果红染色法阳性结果明显，长时间保存不褪色，流程简便，更是实用的方法。如显示弹性纤维，地衣红染色染液虽配制较方便，但结果对比度相对欠佳，与其他几个染色法相比，多不选择使用。切出的石蜡切片要好，不能有皱褶或者刀痕，切片不能太厚。浙江提供糖原染色试剂盒直销价

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染色的一般原则：因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照，进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素 FITC，EGFP激发光：488nm发射光：525nm;使用面较广，价格便宜。PE激发光488nm 发射光575nm，此荧光的激发效率较佳，故此荧光得到的信号较强；检测某些弱表达的抗原，推荐使用此荧光素。价格较FITC昂贵。APC激发光633nm， 发射光660nm，在配有双激光的流式细胞仪上，此荧光染料可与7-AAD或PI共同使用来避开自带绿色荧光的样本。流式细胞仪相关试剂盒。浙江如何使用糖原染色试剂盒生产厂家