杭州广州RNA提取试剂

植物RNA快速提取试剂盒：1.固体组织破碎设备。可用下列装置之一：1)玻璃匀浆器。泡酸清洁，用高压灭菌蒸馏水洗涤数次。2)研钵。适用于液氮冻存组织的研磨，清洗方法同玻璃匀浆器。3)高速机械匀浆器(Polytron，Tekmar或类似产品)，打开开关，在蒸馏水中清洗分散器头数次。2.高压蒸汽30分钟消毒一次性吸头离心管。RNA沉淀溶解之后，应严格使用高压消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染环境下工作，在裂解步骤可使用未高压但洁净的一次性吸头和离心管，但光推荐在紧急情况下这样做。3.普通双蒸水，高压消毒20分钟。用于冲洗器皿，配制琼脂糖凝胶和电泳用缓冲液。DEPC处理的双蒸水。加DEPC到水中至终浓度为0.01%v/v，室温过夜，高压消毒30分钟。用于溶解RNA，配制TE缓冲液和75％乙醇。4.湿冰。在冰上进行操作有助于减少RNA降解。5.其它用品。电泳槽，双蒸水冲洗。离心机和加样器，无需处理。6.戴手套。注意某些实验如提取质粒DNA如使用极大量RNA酶，为防污染，须较全仔细清洗实验器具和实验区域。若比值较低，说明有残余蛋白质存在；比值太高，则提示RNA有降解。杭州广州RNA提取试剂

总RNA提取试剂试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如，从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色，可见许多介于7kb和15kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分)，两条优势核糖体~5kb(28S)和~2kb(18S)，低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间(tRNA,5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通琼脂糖凝胶电泳，28S的位置大约在2kb，18S大约在1kb的位置，不同浓度的凝胶位置变化较大。注意事项：样品用总RNA提取试剂匀浆后，如果不即刻加入氯仿之前，置于-70°C下可放置一个月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2-8°C可以保存一周，-20°C条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，NorthernBlot等。厦门正规RNA提取试剂价格RNA提取试剂注意事项：建议戴一次性口罩操作。

RNA提取真正需要注意的要点：你的植物组织样本采样、保存正常吗？组织裂解充分了吗？组织起始量是否过大？起始量过大的话，他们得带进去多少RNase呀，导致裂解液不能充分压制内源性的RNase，失败就在预料之中！你的细胞活性好吗？细胞都到衰亡期了，你提什么RNA呀；细胞加的那么多，破壁不充分，怎么裂解的好呢，他们本身得带进去多少内源性RNase污染呀！转移液体时吸到沉淀了吗？吸水相时碰到中间层了吗？乙醇干燥净了吗？裂解样本的过程是重中之重液氮研磨（手工）：要先加液氮预冷一下研钵，然后研磨，研磨过程要保证研钵中一直有少量液氮，研磨完成一个样本后，直接加入裂解液涡旋震荡后放常温，或者直接丢到液氮中，全部研磨后一起加裂解液。液氮研磨（研磨仪）：研磨模块丢到液氮中预冷，直到没有气泡冒出视为预冷完毕。在2ml圆底离心管（不需要无酶管，液氮研磨中不破裂就好）中加入5mm钢珠一粒，放进样品，投入液氮中预冷。把所有预冷好的离心管**研磨模块中，放进研磨机震荡20-30秒。完成后马上加裂解液，涡旋。RNA提取试剂销售厂家总共可以使用该试剂盒进行50次标准提取。

RNA提取试剂注意事项：1、必须戴一次性手套操作，且尽量不要对着RNA样品说话，以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。2、TRIReagent含有毒物质苯酚，避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛，请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触TRIReagent，请立即用大量去垢剂和水冲洗，如仍有不适，请听取医生意见。3、TRIReagent抽提总RNA的同时，理论上也可抽提蛋白和DNA，但未经测试。4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。是基于异硫氰酸胍/苯酚法的一种即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂，在样品裂解或匀浆过程中取出水相，用异丙醇可沉淀回收RNA；中间层用乙醇沉淀可回收DNA；有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白。当然还有其它的进口试剂盒，但是均存在价格高、订货周期长的问题。

提取RNA的详细步骤：首先，将研钵晾干够，倒入1/3体积的液氮，加入0.2g均质的植物材料，充分研磨后转入一个含有300微升GMT的1.5ml的离心管中，摇匀。然后，加入30微升2mol/lNaAc进行摇匀，加入300微升酸酚摇匀，加入100微升的氯仿摇匀。然后，在四摄氏度12000r/min下离心二十分钟，吸取上清液的3/4，加入等体积的异丙醇，于冰上放置十五分钟。然后，在四摄氏度12000r/min下离心十分钟，将沉淀悬浮于含100微升的4mol/lLiCl小试管中，于-20摄氏度下放置过夜。然后，在4摄氏度13000r/min下离心10-15min，将沉淀溶于0.4mlDEPC处理水中，加入1/2体积氯仿和1/2体积酸酚，摇匀，进行抽提，在4摄氏度13000r/min下离心五分钟。将上清液中加入等体积的氯仿摇匀，进行抽提，在四摄氏度13000r/min下离心五分钟，上清液中加入1/10体积3mol/lNaAc和两倍体积的午睡乙醇与-20摄氏度放置一小时。血浆/血清RNA提取试剂盒：可以从普通植物的根、茎、叶中快速提取总RNA。石家庄RNA提取试剂厂家直销

可从全血，哺乳动物细胞，细菌细胞和菌类细胞中分离总RNA。杭州广州RNA提取试剂

植物RNA提取过程：植物组织成分相对于动物组织来说复杂多样，因此其RNA的分离和纯化的难度也随之加大，如果要完美的数据结果，那么提取纯度高、完整性好的RNA就成了关键所在。植物RNA的提取一般会经历以下几个过程：1.破碎细胞壁。2.裂解细胞膜。3.杂质去除，包括：DNA、蛋白质、多糖、多酚、次生代谢产物等。4.纯化和浓缩RNA。而在RNA提取过程中，纯化除杂的过程是影响RNA纯度的关键所在。在完整的细胞内，多糖多酚类化合物，次级代谢产物，蛋白质如RNase等与核酸是分离的，一旦细胞破碎，这些物质就不可避免的会与RNA发生相互作用。杭州广州RNA提取试剂