唐山正规外泌体提取试剂产品介绍

外泌体（exosomes）是活细胞经过"内吞-融合-外排"等一系列调控过程而形成的膜性囊泡，来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)，直径约为30-150nm，密度在1.13-1.21g/ml，天然存在于血液、唾液、尿液及母乳等体液中，同时外泌体也存在于组织和细胞间隙中。人体中几乎所有类型的细胞均能产生外泌体，人体中大约有1014个外泌体，大约平均每个细胞产生1000-10000个。外泌体中含有核酸（DNA、miRNA、lncRNA、mRNA、tRF等）、蛋白和脂类，在细胞间物质和信息转导中发挥重要作用，研究表明其在干细胞、免疫调控、瘤转移、血管生成以及生物标志物等领域都发挥着不可替代的作用。外泌体提取：尺寸排阻色谱可以精确分离大小分子。唐山正规外泌体提取试剂产品介绍

外泌体的提取、分离方法：微流控技术。微流控是利用微纳米级尺寸的管道来处理和操控流体所涉及的一门技术，其在外泌体分离方面的应用受到越来越多学者的关注。Jie等[16]课题组开发了一种三维纳米结构微流控芯片，微柱阵列通过化学沉积将交叉多壁碳纳米管功能化，然后其就可以识别特定的分子(CD63)并利用独特拓扑纳米材料高效的捕获外泌体。Wunsch等[17]利用硅工艺生产纳米级确定性侧向位移(Nano-DLD)芯片，得到了均匀的间隙尺寸，该芯片可以灵敏地将20~110nm的颗粒分离。该研究证明了外泌体基于大小的位移，从而揭示了利用芯片分选和量化纳米级生物胶体的潜力。唐山正规外泌体提取试剂产品介绍外泌体的提取、分离方法：聚合物沉淀法。

外泌体在肺病治病中的作用：有研究发现，使用外泌体运载紫杉醇（PTX）可显着提高病细胞对PTX的吸收，将PTX加载至外泌体中显着增加了药物细胞毒性，Exo-PTX能显着压制肺病的发展。Aqil等在进行裸鼠实验时发现，加载至外泌体中的雷公藤红素（Exo-CEL）比普通的CEL有更强的抗一些病症功效，且在小鼠中未发现明显全身性或系统性毒性，由此可以证明，外泌体制剂可以有效增强CEL功效并降低与剂量有关的毒性。到目前为止，外泌体在肺病治病方面的研究主要集中于免疫压制，有效的外泌体药物递送平台的搭建以及外泌体相关的潜在治病靶点的探索。已有的研究表明外泌体在肺病治病领域有着广阔的前景，期待外泌体在肺病治病领域早日得到突破，造福更多的患者。正规外泌体提取试剂供应商通过超速离心(120000g/分钟)20小时以上才能获得足够的外泌体量。

外泌体的提取、分离方法：开发高效、快速、稳定，并且保持外泌体结构和生物功能完整性的方法，是目前外泌体应用于临床的基础和前提。从细胞上清和体液中提取分离外泌体的方法很多，但是外泌体的纯度和产量却和分离方法息息相关。通常分离步骤少、产率高，但是纯度会受到影响。鉴于每种分离方法都有其优缺点，实验可以根据样本来源、下游实验目的等，选择合适的外泌体分离方法。2015年，国际囊泡组织(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出，简单依靠一种分离方法得到的外泌体的纯度和产量都难满足实验的需求。因此，推荐联合使用各种方法，从而得到高纯度和高产量的外泌体。外泌体提取：可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌体。

目前的主流观点认为，外泌体的产生过程为：细胞膜内陷，形成内体（endosome），再形成多泡体（multivesicularbodies，MVB），较后分泌到胞外成为外泌体。外泌体中携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息。外泌体较早见于1981年，EGTrams等在体外培养的绵羊红细胞上清液中发现了有膜结构的小囊泡，并命名为exosome。对于外泌体的作用，当时推测为细胞排泄废物的一种方式。1996年GRaposo等发现类似于B淋巴细胞的免疫细胞也会分泌抗原呈递外泌体（antigenpresentingvesicle），所分泌的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗一些病症反应。2007年HValadi等进一步发现细胞之间可以通过外泌体中RNA交换遗传物质。随着有关外泌体研究越来越多，研究者发现它普遍参与了机体免疫应答、抗原呈递、细胞分化、一些病症生长于侵袭等各种生物过程中。目前人们多采用超速离心、免疫磁珠、超滤、沉淀或试剂盒等方法实现外泌体的提取分离。外泌体提取：高速离心沉淀外泌体。唐山外泌体提取试剂单价

用于外泌体提取的体液收集注意事项：操作要轻柔迅速。唐山正规外泌体提取试剂产品介绍

外泌体的提取分离：1、超速离心法（差速离心）。超离法是常用的外泌体纯化手段，采用低速离心、高速离心交替进行（如图所示），可分离到大小相近的囊泡颗粒。超离法因操作简单，获得的囊泡数量较多而广受欢迎，但过程比较费时，且回收率不稳定（可能与转子类型有关），纯度也受到质疑；此外，重复离心操作还有可能对囊泡造成损害，从而降低其质量。2、密度梯度离心。在超速离心力作用下，使蔗糖溶液形成从低到高连续分布的密度阶层，是一种区带分离法。通过密度梯度离心，样品中的外泌体将在1.13-1.19g/ml的密度范围富集。此法获得的外泌体纯度较高，但步骤繁琐，耗时。唐山正规外泌体提取试剂产品介绍

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