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在该序列5’端上添加数个碱基作为保护碱基。点击完成。-生命科学软件△下游引物设计相同，不再赘述。2.突变引物绘制：在目的基因上截取一小段包含要突变位点的序列，点击Primers→Addprimers，为该引物命名，在5’序列突变位点的三个碱基画黑，点击Insertions，选择突变成的氨基酸，点击Insert。即可获得该突变引物，点击ReverseComplement，可获得反向引物。-生命科学软件模拟标准限制性克隆1.打开**入片段的质粒图谱，选择合适的两个酶切位点，如HindIII和ApaI。湖南数据统计生命科学软件推荐常用生物软件(windows)介绍。

TA和GC克隆-生命科学软件。通过TA或GC克隆捕获PCR产物选择常规TA克隆或高校GC克隆为了方便起见，通过了常见的TA克隆载体和Lucigen的GC克隆载体。退火寡核苷酸将两个寡核苷酸退火以形成双链产物使用简单的控件添加突出端以进行限制性克隆。避免错误-生命科学软件。使用SnapGene确保所需的结构是正确的，并确认已获得所需的序列。基因融合阅读框确保构造中的翻特征在框架中。链接的翻译使用“序列”视图可以一目了然的查看两个已翻译的要素是否在框架中。如果这样，翻译将链接在同一行上。如果不是，则翻译在单独的行上。

分子克隆：SnapGene详细使用教程生命科学软件1SnapGene生命科学软件是一款综合性的分子生物学的软件，其包括的功能如PCR，酶切，质粒，载体构建，电泳等等，基本上你用到的，这里都有。SnapGene使用教程SnapGene中的一些工具的介绍查看质粒图谱：打开一个质粒图谱文件，在Topologyoption处选择circularSnapgene软件左侧提供了多个功能按钮查看质粒Feature—点击Features，显示各个已命名片段的一些特点。显示编码的氨基酸序列，有缩写和全写两种。查看酶切位点—点击Enzymes常用生物学软件介绍。

点击序列可以查看区域内的可用酶切位点。我们可以看到所有酶切位点中，在我们实验室有的酶又不会把基因切碎的酶*有Nde1,EcoR1,而Pst1不在载体的酶切位点上，所以排除。这里我们选择双酶切法，所以选择了Nde1,EcoR1两个位点，其中Nde1在前，EcoR1在后-生命科学软件查看可以插入的酶切位点后，返回到目的基因的DNA文件。点击primerforward序列，点击Insertions,***列绿色方框不要管，这个方框是用来添加氨基酸，在构建载体过程不需要调整。把第二列红色方框改成***个酶切位点基因Nde1,然后点击insert.并在前面添加G或者C为保护碱基（也可以网络查询适用的保护碱基）。-生命科学软件。生命科学软件 - 专业软件代理商。江苏图像处理生命科学软件价钱

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