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Snapgene构建载体—酶切位点法-生命科学软件本文以拟南芥相关基因ATG7为例，打开Tair网页（专门的拟南芥基因库网站），找到基因那一栏，输入目标基因后得到结果。从图中可以看到描述这一栏写的这个基因的名称，其中就包括了ATG7。确认基因后点击目标基因。-生命科学软件找到SequenceRNAData：点击fulllengthCDS.打开页面后，复制全部序列。打开snapgene，点击newdnafile。黏贴复制文件，并重命名DNA文件，点击OK。选择全部序列后，点击Features>addfeature>labelname(CDS),type(CDS),点击OK。生命科学软件有哪些特点。湖北生命科学软件试用

得到的结果如下图所示。下图中显示的酶是能够切断目的基因的酶，因此要排除。所以我们剩下的可以选择的酶包括Nde1,EcoR1,Pst1共3种酶。下一步打开载体DNA文件。-生命科学软件打开载体以pGADT7AD为例，查看切入位点的酶有哪些。在筛选的过程中还要注意酶切位点不能把基因切断。因此在选择酶切位点时候要保证两点。1.载体中多克隆位点中包含该限制性内切酶。2.目标基因可酶切的位置不包含该限制性内切酶。点击图中标记的地方MCS（多克隆位点）插入基因的位置。-生命科学软件。山东文档处理生命科学软件费用生命科学软件 - QuickPHOTO。

酶界面，基本就是酶和酶组选择的各种信息，方便查看和使用。-生命科学软件特征界面是质粒的每个元件详细情况，双击特征能显示出特征的开始结束碱基序列，简单描述，表达产物，转录方向和复制方向等等一系列的特征。有助于帮助更好地了解你所需的质粒。引物界面显示图谱中通用的引物，可以用来测序，检测插入片段是否正确。-生命科学软件历史界面能够显示对质粒处理的过程，制成流程图，方便你去查看，例如上面切除lacz特征片段后，历史界面会做出相应的改变，同时还有文字描述的流程。

载体构建——同源重组法-生命科学软件。还是以基因ATG7为例，首先在NCBI,TAIR等基因网站找到这个基因，复制CDS序列。将序列插入newdnafile，然后重命名文件。选中全长后，点击Features>addfeature>labelname改为CDS>type改为CDS。这样的目的是为了方便后续检测基因是否插入成功。查看实验室已有的酶，点击Emazy>chooseemazy>先移除右边框中的酶，然后再添加你所在实验室中已购买的酶。保存文件为ATG文件。后续要在载体中插入到这个文件所以要先保存。-生命科学软件。打开载体文件,找到到多酶切位点序列。查看哪些酶切位点可用且不会切到基因片段，然后确定酶切位点，可用一个酶，也可以用两个酶，不过比较好选两个酶。在载体文件中选择要两个酶切位点，点击Action>In-fusioncloning>Insertfragment。生物软件,会用这个就够了!

特征-生命科学软件。DNA可视化查看DNA序列的多个视图地图：自定义，酶位点，特征，引物，ORF，DNA颜色等的显示。地图可以是圆形或线性格式。序列：使用双链模式查看酶位点，具有翻译，引物和DNA颜色的特征。单链模式显示具有彩色特征的紧凑概览。酶：从一系列酶组中选择。剪切网站可以显示为数字或行，按名称或频率排序。-生命科学软件。特征：按名称、位置、大小、颜色，方向性或类型对带注释的要素列表进行排序。复选框在紧凑或完全展开的显示之间的切换。有什么好的生物学软件推荐。山东文档处理生命科学软件费用

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