一些温和的损伤刺激及一些抗药物可诱导细胞凋亡,通常这些因素在诱导凋亡的同时,也可产生细胞坏死,这取决于损伤的剧烈程度和细胞本身对刺激的敏感程度。三尖杉酯碱(HT)是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病,急性单核白血病等有良好疗效的抗药物。研究表明HT在μg/ml范围内作用2小时,即可诱导HL-60细胞凋亡,并表现出典型的凋亡特征。本实验用1μg/mlHT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡,同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶(丙啶碘化,PI)对细胞进行双重染色,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。细胞膜是一选择性的生物膜,一般的生物染料如PI等不能穿过质膜。当细胞坏死时,质膜不完整,PI就进入细胞内部,它可嵌入到DNA或RNA中,使坏死细胞着色,凋亡细胞和活细胞不着色。而一些活细胞染料由于为亲脂性物质,可跨膜进入活细胞,因而可进行活细胞染色。Hoechst33342是一种活性荧光染料且毒性较弱,它是双苯并咪唑的一种衍生物。与DNA特异结合(主要结合于A-T)碱基区),显示凋亡细胞和活细胞。凡是看到有凋亡小体的细胞都是凋亡细胞。 成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构。肺巨噬细胞细胞询问报价
不建议替换。每株细胞均有其特定使用且已适应的培养基,而且经过一定时间驯化后,若骤然改变培养条件,细胞有可能出现不适应,表现出生长缓慢、颗粒增多、死细胞出现,造成细胞无法存活;也有些细胞在更换培养基后也能正常的生长,细胞状态也能维持,但问题会出现在冻存后期的复苏过程,有可能细胞没法复苏,所以不建议随便更换培养基。首先,观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请及时与普诺赛技术支持联系。用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于细胞培养箱内静置培养,隔天再取出进行观察。仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。确认细胞状态良好后,应及时将细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失。建议客户收到细胞后天,100X、200X、400X各拍3-5张细胞照片,记录细胞状态,便于和菩禾医药技术支持沟通交流。 尿道上皮细胞细胞技术指导大鼠外周血单个核细胞分离自外周血。
大鼠软骨细胞分离自关节软骨组织;关节软骨属于透明软骨,表面光滑,呈淡蓝色,有光泽,它是由一种特殊的叫做致密结缔组织的胶原纤维构成的基本框架,这种框架呈半环形,类似拱形球门,底端紧紧附着在下面的骨质上,上端朝向关节面,这种结构使关节软骨紧紧与骨结合起来而不会掉下来,同时受到压力的时候,还可以有少许的变形,起到缓冲压力的作用。细胞为圆形、或偏梭形,单层贴壁生长,呈规律性分布,可能出现同源细胞群,每2-8个细胞为一个群生长,细胞质丰富,细胞核为圆形或卵圆形,细胞增殖能力差。体外培养的软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
大鼠食管上皮细胞分离自食管组织;是消化管道的一部分,上连于咽,沿脊柱椎体下行,穿过膈肌的食管裂孔通入胃。食管主要由环节肌层(内层)和纵行肌层(外层)组成。由于这两种肌肉的收缩蠕动,迫使食物进入胃,故其主要作用是向胃内推进食物。食管上皮细胞与其它上皮细胞一样,融合后呈铺路石状排列。食管上皮细胞主要功能:(1)食管上皮细胞形成有效渗透屏障,防止食管内容物渗入;(2)食管上皮细胞使表层细胞的基质外侧细胞膜和深层细胞的全部细胞膜均不暴露于食管腔内规律的大幅波动的渗透压之下;(3)食管上皮基底层的细胞可增殖并向食管腔移行。大鼠主动脉内皮细胞分离自主动脉。
胚胎干细胞是一类具有强大分化潜能的细胞类群,能够分化机体内几乎各种类型的细胞,包括血管细胞。血管平滑肌细胞是血管的主要细胞组成,对维持血管壁的完整和血管功能至关重要。人多能干细胞衍生血管平滑肌细胞在血管疾病模型构建、药物研发和血管组织工程方面具有的应用价值。研究发现存在于哺乳动物的转录因子BTBandCNChomology1(BACH1)在多种心血管疾病中发挥重要的调控作用,包括干细胞维持自我更新和决定分化命运等,但BACH1在干细胞向血管平滑肌细胞分化过程中的作用还不清楚。近日,研究人员揭示了BACH1在调控人胚胎干细胞向血管平滑细胞分化中的重要作用及机制。研究人员发现,在诱导人胚胎干细胞向血管平滑细胞分化过程中,BACH1水平逐渐升高。缺失BACH1的干细胞在分化过程中平滑肌标志基因表达降低,分化效率降低。而在中胚层分化阶段后诱导BACH1过表达,分化细胞中平滑肌标志基因表达上调。进一步机制研究发现,BACH1具有调控组蛋白甲基化修饰的作用。BACH1将精氨酸甲基转移酶1(CARM1)招募到平滑肌标志基因启动子区,增加组蛋白3第17位精氨酸二甲基化(H3R17me2)修饰,进而促进平滑肌标志基因表达。抑制CARM1或H3R17me2。大鼠肺微血管内皮细胞分离自肺;外周血白细胞细胞厂家
肺巨噬细胞来源于骨髓生成的单核细胞向肺内的迁移。肺巨噬细胞细胞询问报价
目前缺血性脑卒中患者为有效的药物是组织纤溶酶原剂(tPA)。但tPA溶栓会引起血脑屏障(BBB)破坏,导致出血转化,不仅减弱了药物发挥的效果,并且与不良预后和死亡密切相关。因此找到有效的临床干预措施对于改善tPA效益仍然十分迫切。研究表明,间充质干细胞来源胞外囊泡(MSC-EVs)能够自由通过BBB,具有良好的BBB保护作用以及促进组织损伤修复功能。采用MSC-EVs联合tPA溶栓缺血性脑卒中具有理论依据。近日,研究人员报道MSC-EVs通过抑制星形胶质细胞活化和炎症,从而发挥BBB保护作用,进而改善tPA缺血性脑卒中的效益。研究人员构建大脑中动脉闭塞后再通(MCAO/R)的缺血性脑卒中小鼠模型,并在使用tPA前加用MSC-EVs处理。结果发现,与tPA单独处理相比,经MSC-EVs处理后BBB破坏程度减轻,出血转化减少,小鼠神经功能改善。荧光成像发现MSC-EVs可透过BBB并集聚在颅内缺血区,增加了星形胶质细胞的摄取。进一步机制研究发现,MSC-EVs通过miR-125b-5p靶向TLR4/NF-κB通路,进而抑制星形胶质细胞活化和炎症,从而发挥BBB保护作用。肺巨噬细胞细胞询问报价