8000rpm离心1分钟,上清DNA溶液转移至新的离心管中。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例2 以硅胶膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有硅胶膜的离心柱中,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)上海关于土壤DNA提取的哪家靠谱?嘉定区土壤DNA提取一级代理
.53+0.03;1.09+0.03、1.51+0.05;1.37士0.03、1.43+0.03;0.81+0.02。提取不同土壤基因组DNA结果,有机营养土上样3μL其余土壤上样8μL;M: 1kb plus DNA ladder,Lane 1-4:自动化提取;Lane5-8:手工提取;Lane 1&5: 100mg有机营养土;Lane 2&6: 100mg花坛土;Lane 3&7: 250mg盐碱土;Lane 4&8: 250mg沙漠土。提取不同类型土壤DNA进行PCR及酶切结果。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1:有机营养土;Lane 2:花坛土;Lane 3:盐碱土;Lane 4奉贤区FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取哪家优惠益启生物是土壤DNA提取的代理商。
。DNA纯度对比—纯度更高。备注:采用紫外分光光度法测试DNA提取纯度,A260/A280比值在1.7-2.0,以及A260/A230大于1.0视为DNA纯度良好。PART.04。土壤基因组DNA提取产品系列。SPINeasy DNA Kit for Soil,货号: 11**30**0。MagBeads FastDNATM Kit for Soil,货号: 11*561**0。FastDNA" Spin Kit For Soil,货号: 11***0200。快、自动化、收率高、高通量。柱膜法:手工提取、操作简单快捷。磁珠法:手工/自动化提取、高遇量提取。玻璃奶法:手工提
12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,上海益启品牌土壤DNA提取规格。
。如果样品中的目的微生物含有比较厚的细胞壁,可能需要额外的破碎裂解。问题4:洗脱的DNA颜色为黄色或棕色怎么办?解决思路:·腐殖酸含量高【1】在洗涤步骤之前,可先用4.5M-5.5M的异硫氰酸胍溶液洗涤1-2次。【2】减少样本用量。问题5:A260/A280比值偏低怎么办?解决思路:·蛋白去除不干净:增加蛋白沉淀离心的次数。·洗涤不干净:增加洗涤次数。问题6:A260/A280比值高怎么办?解决思路:·RNA含量高,可在洗脱之后的溶液中加在线询价MP土壤DNA提取。长宁区土壤微生物土壤DNA提取联系电话
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