15分钟。图4.扩展孵化(过夜):SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5%NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒,标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,对于HRP偶联的二抗山羊抗兔(AP132P),将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后,将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化(1小时):,SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免关于细胞分析仪的询价电话。虹口区Merck细胞跨膜电阻仪Merck仪器一级代理
养室培养室的面积为20x1.2毫米,陷阱高度为0.7,09.1.1。13.23和45um。带正蛋白标记的支持帖保持统一的高度入口功能和下表列出了每个培养单位的比较小/比较大狼数量。图1.平板配置BD04A板具有4个单独分别的单元[A-DI。每个都有5个进水口(1-5升细胞入口(8升细胞(6)。大出口井(7)。流动)每个通道的孔(A-D)的阻力都匹配处理相应的培养室。板已发货用PBS(磷酸盐缓冲盐水)溶液预涂,可以在实验之前,请先将其替换为所选择的缓冲液。盘子是给的只能使用一次。 细胞诱捕机制局限性该板与乙酸和有机溶剂(例如饼酮,乙醇和甲醇的命运应进行相容性测试在使用前与其他酸或有机溶剂一起使用。印版操作如果需要温度控制,请使用CellASICONIX2集成块XT(CAx2-MXT20]。请参阅Cel闵行区Merck细胞跨膜电阻仪Merck仪器代理价上海益启,采购电阻仪的放心之选。
2.0系统计算SNAP i.d.9 2.0系统所需的抗体浓度用于标准免疫检测的浓度标准SNAP i.d.o 2.0免疫检测免疫检测多印迹迷你印迹Midi污点_Ab浓度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗体量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗体量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比较终抗体稀释1:30,0001:10,0001:10,0001:10,000使用的抗体库存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每种抗体都是只有一个的,并且检测试剂的灵敏度各不相同,因此可能有必要进行调整抗体或抗原浓度,使用的检测试剂的类型或灵敏度或印迹X射线曝光时间。请注意,本指南只作为开发比较终抗体的起点浓度以获得所需的性能。表2.封闭,抗体和洗涤的建议体积SNAP i.d.o 2.0SNA
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关闭真空。同样,溶液将被吸收到印迹架中,并且表面可能看起来干燥。重要提示:孵育10分钟后,再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟,直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液(对于MultiBlot为15 mL)。重复洗涤步骤3次(共3次)4次洗涤)。12.关闭真空,然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点,并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白,则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育:一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL(对于MultiBlot),5 mL(对于Mini blot)或10 mL(对于Midi blot)1X一抗(浓缩液)通常在标准免疫检测过程中使用)。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话,将其从底座Merck样本制备仪上海授权代理商。虹口区Merck细胞跨膜电阻仪Merck仪器一级代理
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