P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印迹框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗体量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗涤缓冲液*量每孔4x 15 mL每个4x 30 mL每个4x 30 mL●Tris或磷酸盐缓冲盐溶液，补充有0.1％Tweene 20表面活性剂在计算免疫检测所需的抗体量时，三个要素对于成功检测出蛋白质并获得了高质量的印迹（低背景，高信号）：●样品类型和凝胶上样浓度●一级和二级抗体浓度●检测试剂的种类和灵敏度下表中的所有抗体均使用LuminataTM Forte化学发光检测试剂进行了测试。对于SNAP i.d. @ 2.0系统，抗体浓度高于标准免疫检测中的浓度，但浓度较低体积。 表3.标准免疫检测中一抗稀释的实例 SNAPi.d.®2.0免疫检益启生物提供专业的细胞计数器。静安区Merck细胞计数器Merck仪器规格
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有关详细信息，请参见表2。●不建议在SNAP i.d. @ 2.0系统中剥离印迹。印迹已被剥离可以从阻塞步骤开始在SNAP i.d.o 2.0系统中对遵循标准协议的系统进行重新探测。●如果不需要剥离（例如，如果使用其他二抗进行检测），则可以重新检测印迹快速清洗后，立即在SNAP i.d.9 2.0系统中使用。 优化准则抗体已经开发了优化指南，以使用户能够转换所用抗体的浓度将标准免疫检测测定法浓缩至适用于SNAP i.d. @ 2.0系统的浓度。大多数用户会能够使用相同量的抗体，但与标准品相比，体积更小，浓度更高免疫检测。但是，当使用扩展抗体方案（第12页）时，可以使用相同的方法通常用于标准免疫检测的一抗的浓度，体积和时间，其次是较高浓度的二抗，持续时间较短。表1.如何根据SNAP i.d.9
向。松开框架，并同时使用双手，像书一样打开它，同时轻轻地将左半部分向下推，右半部分向上推。当框架是几乎完全打开，两半将滑开。注意不要丢掉位于其中一个的小O形圈中心销的位置。 。要重新组装框架，请按照与上述相反的步骤进行操作。可能需要更多的力才能使两者接合由于O形圈已被压缩，因此可将其减半。注意：此0环的目的是在将印迹放入框架中时保持框架盖处于打开状态。这框架没有0环就可以正常工作。组件重用吸盘支架和抗体夹盘只一次性使用。重复使用会增加污点固定器堵塞的风险印迹中信号不均匀，以及样品交叉污染。请参阅适用的国际，联邦，州和地方法规，以进行适当处置。 故障排除症状原因纠正措施真空控制旋钮棒_清洁不足用洒水冲洗系统。吸盘座不能倒空真空度不足确保系统和真空之间的管道连接或何时缓慢排空来源是安全的。真空M益启生物公司带您了解WB实验加速器详情。
中移出并在恒定的温度下孵育颤抖。如果需要过度保温，建议冷藏。虽然表面上的污点支架可能看起来部分干燥，印迹不会变干，因为溶液包含在框架中。注意：如果长时间处理多个印迹，则可以堆叠印迹固定框架减少工作空间。可选：如果要回收一抗，请先将抗体回收盘放入底座，然后再继续执行步骤4。4.延长孵育时间后，将框架放回底座上，卸下盖子，然后按照步骤8进行操作。通用议定书第12条。注意：SNAP i.d不需要延长二抗的孵育时间。 2.0系统。建议使用5倍浓度的二抗，持续10分钟。抗体回收1.执行《通用议定书》的步骤1至5，但将真空时间增加到2分钟，以确保所有的封闭溶液都已从框架的凹槽和通道中移除。2.从底座上取下印迹固定框架，并用一根刷子擦拭框架底部的所有残留液体。纸巾。3.将抗体收集盘放入底座，确保抗体上的定上海益启生物的超滤杯询价公司电话。静安区Merck细胞计数器Merck仪器规格
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位孔收集盘与底座中的定位销对齐。注意：对于Mini和Midi框架，将单个清洁托盘放置在底座的**。对于多印迹如图所示，在框架上放置两个收集托盘。在MultiBlot框架中运行单点印迹时，将空白的卡放在空的孔中，然后将孔下方的收集盘上有污点。4.将污渍固定框架放回底座上的位置。5.按照《通用规程》第6步和第7步中的指示，应用一抗并进行孵育。6.孵育10分钟后，打开真空并等待一分钟，以确保所有蚂蚁都具有被收集。注意：当同时处理两个框架时，请先对一侧进行吸尘，然后再对另一侧进行吸尘。这确保在每个框架上具有完全的真空力，并改善体积回收率。7.关闭真空并卸下框架。卸下抗体收集盘。8.将抗体转移到合适的容器中进行存储或分析。9.将印迹保持架放回原位，并继续执行通用规程的步骤9。 性能证明图1. B-管蛋静安区Merck细胞计数器Merck仪器规格
