对于铜绿假单胞菌的检测,要注意将绿假单胞菌检测板上层膜不干胶标签部分揭开,用无菌吸管吸取1毫升样品稀释液均匀滴加到纸片上,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,静置2分钟左右,待样品稀释液完全被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两个检测板作为重复。将检测板叠在一起,倒置于恒温培养箱内,36摄氏度~1摄氏度,培养15~24h。铜绿假单胞菌又称绿脓杆菌,是一种常见的条件致病菌,属于非发酵革兰氏阴性杆菌。若为实验室长期保存菌种,因传代频繁可发生无色素变种。较低温甘油保存法和半固体保存法两种方法保存的菌种42摄氏度生长试验阳性,氧化酶阳性,氧化葡萄糖产酸不产气,动力阳性,明较液化试验阳性。亚硝酸钠诱变对金黄色葡萄球的抗药性是有利的。褐色链霉菌
大肠杆菌耐药性产生的原因:内在原因1940年,Abraham和Chain从大肠杆菌中分离和鉴定出了一种能水解青霉素的酶,这一发现说明了耐药性不只是反复用药的结果,而且也是大肠杆菌增强在不利环境中生存能力的自身防卫系统的重要组成部分,这也是大肠杆菌容易产生耐药性的自身原因。药物诱发作用:由于养殖户把使用药物当作控制大肠杆菌的主要手段,并且在实际生产中有时用药不合理,如随意加大剂量,或低剂量长时间使用,投药途径不当、不注意轮换用药,这些错误的用药的方子法和用药程序是造成大肠杆菌产生耐药性的主要原因、在某些养殖场畜禽发病后一旦怀疑由大肠杆菌引起,不管何种药物,只要是抗s素便用,但很少能收到有效的疗养效果。某些肉鸡场为防止疫病的发生,便采用饲料或饮水中长期添加药物的预防方法,还有一些养殖场为防止产生高的药物残留而小剂量反复用药也会导致细菌逐步产生耐药性。此外,有试验表明联合用药是加快大肠杆菌产生耐药性的又一原因、联合用药有时的确能起到尽快控制该病的目的,但用药剂量不足或用药时间过长,不只增加了用药开支费用,而且扩大了细菌耐药范围,使其对更多的药物产生耐药性。鹰嘴豆苍白杆菌铜绿假单胞菌中的原内毒养素蛋白质是一种高分子、低毒性,原性强的保护性抗原。
大肠杆菌可产生破坏抗s素或使之失去抑菌作用的霉,使药物在作用于菌体前即被破坏或失效,如钝化酶和同功酶、钝化酶可分解或取代抑菌药物,生成没有抑菌活性或不能渗入细胞内的新产物,如大肠杆菌所产生的磷酸转移酶、乙酰转移酶及腺苷转移酶可分别通过羧基磷酸化、氨基乙酰化、羧基腺苷酰化作用使氨基糖苷类药物的分子结构发生改变,使之失去作用活性、同功酶则主要是取代菌细胞内已被抑菌药物拮抗的酶,使阻断的代谢过程恢复、如对磺胺类药物的耐药就是由于合成二氢碟酸合成酶以代替原有的被磺胺药拮抗的二氢叶酸合成酶。
枯草芽孢杆菌对土壤脲酶活性的影响,应用土壤酶作为监测指标,评价农药的生态毒理效应已成为环境科学领域的研究热点之一。而脲酶属于土壤中研究得比较深入的一种水解酶类,是惟一对尿素在土壤中转化及尿素利用率有重大影响的酶。尿素施人土壤后,在脲酶的催化作用下,迅速分解成二氧化碳和氨,所以土壤脲酶活性的降低,不仅可使尿素水解减缓,令其水解产物更多地被土壤吸附而有效减少尿素水解产物氨的挥发损失,也可能相应减少水解产物NH硝化作用潜势。枯草芽孢杆菌能为以单细胞藻类为主的浮游植物提供营养物质,促进繁殖。浮游植物的光合作用,又为池内底栖水产动物的呼吸、有机物的分解提供氧气,从而使养殖水体形成一个良性的生态循环。金黄色葡萄球在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳,需氧或兼性厌氧,少数专性厌氧。
冻干粉菌种复苏中注意事项:菌种活化前,如要长期保藏,可将冻干管放在-20度条件下保存。此冻干菌是经冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能剩菌粉下次使用。冻干管中大部分是用牛奶做保护剂,菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接种在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。冻干粉是在冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长出,请继续在相应的环境下多培养24小时或更长时间,直至菌种培养出。正常情况下,菌种是需要培养2代后才会具备稳定的活性,所以建议做2次继代培养后才能用于您后续的实验。打开冻干管应在专业的微生物专业人员才可操作,注意生物危害程度为三级的菌种应在生物安全柜中操作。其中标准菌种可以在超净台中操作,并且做好个人防护。开管时要注意做好个人面部防护,防止碎片飞入眼中。以上开管操作都应该在安全柜或超净台中操作,并且操作完后所有器皿都要经灭菌后再销毁。所有的菌种操作和转移应依「实验动物微生物学等级及监测」规定订定安全等级,履行生物安全防护责任及採取必要之措施;并遵守「病原微生物实验室生物安全管理条例」。 铜绿假单胞菌菌种不能在4-10度条件下储存,容易死亡。肺形侧耳菌株
金黄色葡萄球普遍分布于自然界,如空气、水、土壤、饲料和一些物品上。褐色链霉菌
枯草芽孢杆菌分泌的多种胞外酶,已应用到许多不同领域中。脂肪酶具有多种催化能力,其在动物或人体的消化道中与原本存在的消化酶类共同发挥作用,使消化道处于健康的平衡状态。枯草芽孢杆菌还未直接用于食品中,但有研究表明枯草芽孢杆菌在酿酒过程中起到了非常重要的作用。芽孢杆菌,包括嗜热芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌以及地衣芽孢杆菌等都有较强的水解淀粉和蛋白质的能力,是酱香型白酒的风味物生成和风格形成的重要菌类。由于芽孢杆菌能够产生蛋白酶与淀粉酶,其水解原料形成丰富的前体环境,有利于风味物质的生成。褐色链霉菌
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