HBS 和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在 Eagle′s(2.2g/L) 中比在 Hanks′(0.35g/L)中高。碳酸氢钠需用高水平的 CO2 平衡,以维持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空气水平的CO2中,溶液会变碱,Hanks′液在 CO2 培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用Eagle′s液,如果只是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用Hanks′液就可以了。由于大多数细胞适宜pH为7.2-7.4,偏离此范围可能对细胞生长将产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不完全相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些。在配制培养用液时,需要注意一点:新配的培养基在经过 0.10um 或 0.22um 滤膜过滤时,溶液的pH 还会向上浮动0.2左右。3%NaCl精氨酸双水解酶试验培养基 3%NaCl氨基酸脱羧酶试验对照培养基 MRVP培养基 动力培养基 淀粉水解培养基。改良巴尔斯氏培养基基础(不含硫酸亚铁铵)
在培养基中加入 HEPES 有何好处?培养基中常用的缓冲体系是碳酸氢盐,它可提供营养,但却在生理 pH 条件下会降低缓冲能力。而HEPES 是一种很强的缓冲剂,能使细胞培养基在 pH7.2-7.6 条件下缓冲能力增强。HEPES溶液:是一种弱酸,中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下,观察细胞时培养基脱离了 5%CO2 的环境,CO2 气体迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此时可以维持 pH7.0 左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES。神经细胞原代培养的过程中能用到。药敏试验琼脂PBS-Tween20洗液 卵磷脂多价胨稀释液基础 30%葡萄糖溶液(pH6.5±0.5) 1.5%蛋白胨水。
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、色素和血清等)等。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。
半固体培养基(half-solid medium) 在液体培养基中加人0.2%~0.5%的琼脂粉,加热溶解后冷却即成,以倒置不流动的较软状态为宜,一般供细菌动力试验、菌种传代、保存和储运标本之用。固体培养基(solid medium) 培养基中含有足量的凝固剂(琼脂粉>0.5%),在常温下能保持固体状态。此类培养基大都用于微生物的分离、纯化、药敏试验及菌苗制造。如营养琼脂、营养斜面、SS琼脂、TCBS琼脂等。此外,还有一些特殊用途的培养基,如用血清或鸡蛋做凝固剂配成的吕氏血清斜面培养基、鸡蛋斜面培养基等。Bennett琼脂放线菌肉汤 葡萄糖天冬酰胺液体培养基葡萄糖天门冬素液体培养基脯氨酸培养基高氏二号培养基。
培养基分类有哪些?营养缺陷型:野生型菌株经过人工诱变或者自然突变失去合成某种营养(氨基酸,维生素,核酸等)的能力,只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长,称为营养缺陷型(auxotroph)。营养缺陷型是一种生化突变株,它的出现是由基因突变引起的。遗传信息的载体是一系列为酶蛋白编码的核酸系列,如果核酸系列中某碱基发生突变,由该基因所控制的酶合成受阻,该菌株也因此不能合成某种营养因子,使正常代谢失去平衡。DTA培养基DTA琼脂培养基 胰酪胨大豆羊血琼脂(TSSB)基础 含0.2%可溶性淀粉的BCP脱脂奶粉平板计数培养基。产气荚膜梭菌测定用培养基
硫酸盐还原菌培养基N 韦荣氏球菌培养基基础 依姆歇涅茨基纤维素培养基 奥曼梁斯基培养基 赫奇逊琼脂培养基。改良巴尔斯氏培养基基础(不含硫酸亚铁铵)
T3052蛋白胨淀粉酵母培养基250g/瓶450配方:(/L)蛋白胨23.0g淀粉1.0g酵母提取物6.0g琼脂粉10.0gNaCl2.0gKNO31.0gK2HPO4•3H2O0.5gMgSO4•7H2O0.5gFeSO4•7H2O0.01gpH7.1-7.5(25℃)使用方法:取本品粉末44.01g溶解于950ml的蒸馏水或去离子水,加热沸腾后分装,121度灭菌15分钟后,待温度降至55度时加入50ml脱纤维羊血,倾注至培养皿凝固后冷藏待用。T3053铁细菌肉汤250g/瓶115用途:用于水中铁细菌培养成分(/L):柠檬酸铁铵10.0g硫酸镁0.5g硫酸亚铁铵0.5g磷酸氢二钾0.5g氯化钙0.2g硝酸钠0.5gpH值6.9±0.1(25℃)用法:称取本品12.2g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。T3054铁细菌培养基250g/瓶115用途:用于铁细菌的分离培养。成分(/L)柠檬酸铁铵10.0g硫酸镁0.5g硫酸亚铁铵0.5g磷酸氢二钾0.5g氯化钙0.2g硝酸钠0.5g琼脂15.0gpH值6.8-7.0(25℃)用法:称取本品27.2克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟备用。改良巴尔斯氏培养基基础(不含硫酸亚铁铵)
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