近年来,国内外利用某些细菌特有的酶,选择相应的作用底物,研制出某些细菌专门用的的显色培养基,用于细菌的分离鉴别,收到了良好的效果,这种显色培养基实际上也是鉴别培养基。其基本原理是将色原(或荧光原)与细菌作用底物的结合物加于培养基中,当细菌含有相应酶时,使该结合物分解而显色(或显示荧光)。如色原糖苷结合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷与色原分离,并显示颜色;荧光氨基酸结合物(不显荧光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸与荧光物质分离而显示荧光。常用显色的色原有α-萘酚、β-萘酚、邻位硝基酚、对位硝基酚、对硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的荧光物有4-甲基伞形酮(又称7-羟基4-甲基香豆素)等。目前,显色培养基已用于多种细菌的分离鉴别培养,如沙门菌、大肠埃希菌、李斯特菌、双歧杆菌和乳酸杆菌、白色念珠菌等显色培养基。胰酪胨大豆羊血琼脂TSSB基础 桑塔斯琼脂基础 Spizizen马铃薯琼脂 双歧杆菌生化管用基础培养基 BBL液体培养基。酵母氨基酸缺陷型合成液体培养基尿嘧啶/亮氨酸/色氨酸缺陷)
细菌培养基之面粉琼脂培养基:面粉60g,琼脂20g,水1000ml把面粉用水调成糊状,加水到500ml,放在文火上煮30分钟。另取500ml水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用。微藻培养基,BG-11培养基:NaNO3 1.5g,K2HPO4 ·3H2O0.04g,MgSO4·7H2O0.075g,CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid (柠檬酸)0.006g,Ferric ammonium citrate(柠檬酸铁铵0.006g,EDTA (dinatrium-salt) 0.001g,Na2CO3 0.02g,A5 + Co solution * (A5溶液1000×)1ml Distilled Water (蒸馏水)919ml。
改良Stuart运送培养基蛋白胨-氯化钠-纤维二糖-多黏菌素E(PNCC)增菌液 脱脂奶蔗糖蛋白胨培养基 改良的酵母浸汁-孟加拉红肉汤。
T2806上层琼脂250g/瓶390产品详情培养基配方(每升)NutrientBroth(营养肉汤)8.0±0.1gPotassiumChloride(氯化钾)5.0±0.06gBacto-Agar(琼脂)7.0±0.09gpH7.3±0.1(25℃)使用说明T2807下层琼脂250g/瓶390产品详情培养基配方(每升)NutrientBroth(营养肉汤)8.0±0.1gPotassiumChloride(氯化钾)5.0±0.06gBacto-Agar(琼脂)15.0±0.19gpH7.3±0.1(25℃)使用说明T2805噬菌体营养肉汤(Phi-X174)250g/瓶290产品详情培养基配方(每升)Tryptone(胰蛋白胨)8.0±0.1gPotassiumChloride(氯化钾)5.0±0.06gCalciumChloride(氯化钙)0.2±0.003gPolysorbate80(聚山梨酯80)0.1±0.00125mlpH7.3±0.1(25℃)使用说明T2804BryantandBurkey培养基250g/瓶490产品详情培养基配方(每升)Beefextract(牛肉浸粉)7.5gCaseinenzymichydrolysate(酪蛋白酶解物)15.0gL-cysteinehydrochloride(L-半胱氨酸盐酸盐)0.5gResazurin(刃天青)0.0025gSodiumacetate(乙酸钠)5.0gYeastextract(酵母浸粉)5.0gpH5.9±0.2(25℃)使用说明
T2866改良Frey氏液体培养基基础250g/瓶220产品详情培养基配方(每升)氯化钠5.0g氯化钾0.4g7水硫酸镁0.2g12水磷酸氢二钠1.6g磷酸二氢钾0.2g1水葡萄糖10.0g乳蛋白水解物5.0g酵母浸粉5.0g酚红0.01gpH7.7±0.1(25℃)使用说明T2867Hayflick培养基250g/瓶490产品详情培养基配方(每升)PPLOBroth(PPLO肉汤)21.0gYeastExtract(酵母浸粉)25.0gDextrose(葡萄糖)1.0gPhenolRed(酚红)0.002gpH7.8±0.2(25℃)使用说明T2868KM2猪肺炎支原体琼脂培养基250g/瓶540培养基配方(每升)乳清蛋白水解物5.0g鲜酵母浸出物10.0gEagles氏液5.975gDulbecco磷酸盐缓冲液2.925g琼脂15.0gpH7.5±0.2(25℃)使用说明称取本品38.9g于800ml蒸馏水或去离子水中,煮沸溶解,115℃灭菌20分钟,冷至55℃左右,无菌操作加入0.125g无菌醋酸铊、20万单位无菌青霉素和200ml无菌健康猪血清,混匀,倾注平板,备用。Cary-Blair氏运送培养基 Amies运送培养基(含活性炭) Stuart运送培养基(含活性碳) 改良Stuart运送培养基。
HBS 和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在 Eagle′s(2.2g/L) 中比在 Hanks′(0.35g/L)中高。碳酸氢钠需用高水平的 CO2 平衡,以维持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空气水平的CO2中,溶液会变碱,Hanks′液在 CO2 培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用Eagle′s液,如果只是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用Hanks′液就可以了。由于大多数细胞适宜pH为7.2-7.4,偏离此范围可能对细胞生长将产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不完全相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些。在配制培养用液时,需要注意一点:新配的培养基在经过 0.10um 或 0.22um 滤膜过滤时,溶液的pH 还会向上浮动0.2左右。马铃薯葡萄糖水(PD水) 马铃薯蔗糖琼脂(PSA) 麦芽浸膏汤 MEA培养基麦芽浸膏琼脂MEA琼脂。番茄汁琼脂
改良V-P培养基 6.5%氯化钠肉汤 石蕊牛奶培养基 缓冲李斯特氏菌增菌肉汤基础BLEB基础LEB基础 LM-137琼脂基础。酵母氨基酸缺陷型合成液体培养基尿嘧啶/亮氨酸/色氨酸缺陷)
1951年厄尔开发了供动物细胞体外生长的人工合成培养基(MEM)。合成培养基的种类相当多。合成培养基成分已知,便于对实验条件的控制。但与天然培养基相比,有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代,因此,细胞培养中使用的基础合成培养基还必须加入一定量的天然培养基成分,以克服合成培养基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。动物血清成分复杂,各种生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清对细胞生长很有效,但后期对培养产物的分离、提纯以及检测造会成一定困难。另外高质量的动物血清来源有限,成本高,限制了它的大量使用。无血清培养基不加动物血清,在基础培养基中加入细胞生长有效因子等。酵母氨基酸缺陷型合成液体培养基尿嘧啶/亮氨酸/色氨酸缺陷)
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