尿肠球菌菌种

微生物危害评估，当建设使用传染性或有潜在传染性材料的实验室前，必须进行微生物危害评估。应依据传染性微生物致病能力的程度、传播途径、稳定性、传染剂量、操作时的浓度和规模、实验物件的来源、是否有动物实验资料、是否有有效的预防和医治方法等诸因素进行微生物危害评估。通过微生物危害评估确定物件微生物应在哪一级的生物安全防护实验室中进行操作。根据危害评估结果，制定相应的操作流程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，必须形成书面档并严格遵守执行。口腔内的菌株包括链球菌、放线菌、葡萄球菌等。尿肠球菌菌种

磁珠菌种使用说明介绍：在无菌的条件下，打开瓶盖并使用灭菌的接种棒或镊子移出一个小珠，盖好瓶盖并尽快放回低温保存。过度改变温度会减少生物生存能力。小珠可直接使用接种在固体培养基培养皿上，盖上培养皿盖，等待10分钟待磁珠内部菌种解冻，倾斜培养皿以滚动磁珠，使磁珠在培养皿表面滚动，滚动到的地方则接种了菌种。或者小磁珠可加入至100-200ul液体培养基中，震荡摇晃几次，然后用无菌吸头吸取上述液体培养基至培养皿上，涂布均匀即可。亚德食烷菌菌株的保存和传递需要注意其稳定性、纯度和活性等。

铜绿假单胞菌为直或稍弯的革兰氏阴性杆菌，是无核细菌，以极生鞭毛运动，不形成芽孢，化能有机营养，严格好氧，呼吸代谢，从不发酵，普遍分布于自然界，如土壤、水、食物和空气中。营养要求不高，种类多，铜绿假单胞菌为需氧的革兰阴性小杆菌。铜绿假单胞菌菌体呈杆状或略弯曲，有单端鞭毛或丛鞭毛，有荚膜，无芽胞。铜绿假单胞菌菌属中有些菌株在代谢中能产生多种水溶性的色素，如绿脓素、荧光素、红脓素、黑脓素等，有的菌可产生多种，有的只产生1—2种。铜绿假单胞菌与荧光似单胞菌和恶臭假单胞菌的鉴别，三者均可产生荧光色素，但铜绿假单胞菌42摄氏度时生长，后两者则不能生长。

铜绿假单胞杆菌离心的目的是两个：去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。关于细胞贴壁少的问题，冻存细胞解冻时1毫升细胞液要加10毫升－15m培养液，而培养基越少细胞越容易贴附。复苏细胞分装的问题，试验中复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。菌株资源的管理和利用也需要与国际上的标准和规范相协调。

铜绿假单胞杆菌在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞，贮存在－130摄氏度以下的低温中能减少冰晶的形成。细胞复苏时速度要快，使之迅速通过细胞较容易受损的－5～0摄氏度，细胞仍能生长，活力受损不大目前常用的保护剂为二甲亚砜（DMSO）和甘油，它们对细胞无毒性，分子量小，溶解度大，易穿透细胞。合适的铜绿假单胞杆菌温度通常在45～68摄氏度之间(预备实验可2摄氏度间隔进行)。另外，由于在60～68摄氏度间，也有很高的活性，因此可在此温度范围内设定铜绿假单胞杆菌温度，进行2StepPCR。铜绿假单胞杆菌温度为68摄氏度时，每kbp大体可设定30秒～1分钟；当温度设定在68摄氏度以下时，时间设定可稍长一些。菌株在食品加工中也有应用，如发酵制作酸奶、豆腐等。假委内瑞拉链霉菌

菌株在医药领域中具有普遍的应用，可制备疫苗等。尿肠球菌菌种

铜绿假单胞杆菌的冻干菌种是经冷冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次再用，另外安瓿管里大部分仍是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功。菌种活化前，如要长期保藏，请将安瓿管保存在4-10摄氏度的环境下。操作前如有不明白之处，应先咨询专业人员，避免不必要的损失。菌种操作应在在无菌条件下进行；转钟完毕，废弃物应经灭菌再做丢弃处理，以免污染周围环境。复苏后，微生物菌种应保藏于建议的温度、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长或导致菌种衰退。尿肠球菌菌种

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