MRS-NNLP培养基添加剂

1951年厄尔开发了供动物细胞体外生长的人工合成培养基(MEM)。合成培养基的种类相当多。合成培养基成分已知，便于对实验条件的控制。但与天然培养基相比，有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代，因此，细胞培养中使用的基础合成培养基还必须加入一定量的天然培养基成分，以克服合成培养基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。动物血清成分复杂，各种生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清对细胞生长很有效，但后期对培养产物的分离、提纯以及检测造会成一定困难。另外高质量的动物血清来源有限，成本高，限制了它的大量使用。无血清培养基不加动物血清，在基础培养基中加入细胞生长有效因子等。有些培养基需要添加血清或其它富含蛋白质的物质以促进生长。MRS-NNLP培养基添加剂

在培养基中加人某种抑制剂和指示剂，抑制某些细菌生长，促进目的菌的繁殖，并使所生长的细菌菌落具有一定特征，以助鉴别挑选，这类培养基称为选择性鉴别培养基。如SS琼脂，在该培养基配方中含有乳糖(反应底物)、中性红和柠檬酸铁铵(指示剂)、灿烂绿及胆盐等(抑菌剂)。灿烂绿和胆盐等抑菌剂能抑制革兰氏阳性菌及部分大肠埃希菌的生长，而对沙门菌及志贺菌基本无影响，而且大肠埃希菌能发酵乳糖产酸，使菌落变红色，沙门菌和志贺菌不发酵乳糖，其菌落为无色。如细菌产生硫化氢，则与柠檬酸铁铵反应生成硫化亚铁沉淀，菌落中心呈黑色或褐色。以此达到鉴别的目的。MRS-NNLP培养基添加剂人工合成基因可以在特定的培养基中得到表达，需要选择含有适当营养物质的培养基。

L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？L-谷氨酰胺（L-Glutamine）是细胞生长的必须氨基酸，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中状态不稳定，它的降解速率随保存时间，保存温度及保存环境pH值等变化而变化。L-丙胺酰-谷氨酰胺（L-alanyl-L-glutamine）是细胞培养中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品，其在水溶液中稳定性高，即可保持长时间稳定的营养供给，也降低了分解产物造成的细胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液（L-alanyl-L-glutamineslution）可作为哺乳动物贴壁细胞或悬浮细胞培养添加剂。与谷氨酰胺相比，L-丙胺酰-谷氨酰胺不会自行降解成氨而导致细胞毒性，作为添加物培养条件更加可控，可有效提高细胞活力。

培养基的种类是检验技士考试需要掌握的内容，小编为大家搜集整理如下，希望可以帮助大家复习掌握。（1）基础培养基：含有基础生长所需的基本营养成分，常用的是肉浸液，俗称肉汤，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验，也是制备其他培养基的基础成分。（2）营养培养基：在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分，供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。黄色布氏菌芽孢杆菌常用的培养基为营养琼脂平板培养基。

合成培养基(synthetic medium) 由已知化学成分的营养物质组成的培养基。根据微生物对营养要求的不同，可完全由无机盐或化合物组成，如：氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、维生素等，其组成成分已知，只要严格操作，各批次间质量可做到稳定一致。此培养基可用来检测某种营养物或药物对微生物代谢的影响。组织细胞培养液均属合成培养基。合成培养基的成本较高，其价格相当于同类天然培养基的几倍以至于几十倍。只含几种无机盐的合成培养基，只适用于自养菌的培养，如培养亚硝化细菌、氧化硫杆菌等的培养基。有些培养基大部分成分为已知化学结构的营养物质，其中的个别或少数成分为未明化学成分的必须营养物，成为半合成培养基，如百日咳菌苗生产用的水解酪素培养基。细菌类培养基则包括马铃薯葡萄糖琼脂培养基、麦芽琼脂培养基等等。毛藓菌琼脂7号

大多数细菌都能在富含有机物的基质中繁殖生长，因此有机培养基是基本的培养基之一。MRS-NNLP培养基添加剂

细菌培养基之牛肉膏琼脂培养基：牛肉膏0.3g ，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，琼脂1.5g，水100ml在烧杯内加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2-7.6，分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌：1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15-30分钟。牛心培养基：取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。MRS-NNLP培养基添加剂

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