志贺氏菌增菌肉汤基础 GB/ISO

培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。配好后不宜久置，现配现用。为了避免细胞爆破释放DNA和蛋白质，培养基中常常添加DNA酶和蛋白酶等酶类。志贺氏菌增菌肉汤基础 GB/ISO

培养细胞时应使用5%还是10%CO2，或者根本没有影响？一般培养基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中 NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10% CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5g时，则应使用5%CO2培养细胞。NaHCO3的作用：培养基中使用了 NaHCO3-CO2 缓冲系统，并采用开放培养，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶，再通过稳定调节温箱中CO2浓度（5%） ，与培养基中的NaHCO3处于平衡状态，从而调节培养基的PH值。NEAA：非必须氨基酸，NEAA（非必需氨基酸） 是含几种非必需氨基酸的合剂，添加到的原培养基不同，NEAA 也有不同的种类，比如添加至MEM的NEAA，含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。麦芽汁肉汤无血清培养基是在常规培养基中添加多种蛋白质、生长因子等等营养物质来代替动物血清。

培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。

bFGF是一个肝素结合的多肤类丝裂源，普遍分布于各种组织中。bFGF 是一种重要的细胞增殖分化调节剂，可刺激多种细胞的增殖。有研究发现它对滋养细胞也有促增殖作用。bFGF 主要是与细胞膜上FGF受体结合发挥作用，刺激与增殖有关的基因表达。Thomson 等认为，像其他体外培养的人体细胞一样，hES 细胞要求 bFGF 的存在以促进增殖。同理EGF（上皮生长因子） , 是人体内的一种活性物质，由53个氨基组成的活细胞，藉由刺激表皮细胞生长因子受体之酪氨酸磷酸化，达到修补增生肌肤表层细胞，据说对受伤、受损之表皮肌肤拥有很好的疗效，其较大特点是能够促进细胞的增殖分化。所以加入它们都是促进细胞增殖的。制备培养基需要精确控制培养基的营养成分以满足微生物对不同营养成分的需求。

预装培养基在实验室中的应用越来越普遍，但是在运输和储存过程中容易受到一些影响。因此，需要对预装培养基的运输进行注意和保护。在运输过程中需要遵循一定的规范，包装材料要符合环保要求，并且要使用专业的保护材料进行包装，保证在运输过程中预装培养基的完好性。在选购预装培养基时要选择正规可靠的生产厂家，产品质量要好，取样过程要规范，保证培养基的成分准确无误，细菌的生长情况更为良好。在运输过程中需要注意温控问题，保证预装培养基在运输中能够维持稳定的温度，且温度不至于过高或者过低，以免影响生长质量。在实验室中使用预装培养基时需要注意正确的保存方法，按照生产厂商的说明进行保存，并注意消毒问题，尽量防止预装培养基的受污染。培养基的选择和制备是微生物学研究中的关键步骤，它可以影响到实验结果的准确性和代表性。麦芽汁肉汤

培养基的pH值需要根据不同微生物的生长适应范围进行调节。志贺氏菌增菌肉汤基础 GB/ISO

使用过的预装培养基必须被按照正确的程序处理和处置。这意味着必须将预装培养基放置在专门用于处理微生物培养垃圾的容器中。这些容器通常是极度防护的，以避免包含在培养基中的微生物穿透到周围的环境中。在放入容器之前，预装培养基建议以封闭方式分装，以避免可能包含在其中的微生物侵入周围环境中。此外，使用过的预装培养基应该如实记录，以便跟踪以确定实验过程中是否出现任何异常结果。在处理使用过的预装培养基时，必须严格遵守实验室的安全和卫生标准。这包括穿戴适当的防护服、口罩和手套等防护用品。建议逐层穿戴，从内到外，以确保较大限度地减少微生物的扩散。在处理过程中，必须避免任何可能导致污染或扩散微生物的行为。应定期清洗处理容器和其他设备，以确保卫生和安全标准较大化。志贺氏菌增菌肉汤基础 GB/ISO

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