干粉培养基在制备时需要先和水或其他液体混合,然后通过加热灭菌的方式进行消毒。在此之后,干粉培养基中的微生物都已经被有效地杀死。但是,如果在制备过程中或存储时破坏了其消毒状态,就可能对实验的结果产生负面的影响。因此,为了保证干粉培养基的消毒状态,通常也需要进行消毒处理。消毒干粉培养基的方法有许多种,比较常见的方法是用酒精喷雾消毒和紫外线消毒。使用酒精喷雾可以有效地消灭表面上的细菌和病毒,但是对于深层的细菌和孢子等微生物则不具有很好的杀菌作用。因此,对于已经受到外界环境污染的干粉培养基,通常还需要通过其他消毒手段进行消毒,以有效杀死内部细菌和病毒等。制备培养基需要考虑生长细胞所需的营养、酸碱度和水分含量等因素。Stainer and Scholte液体培养基
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。巧克力血琼脂培养基基础好氧菌需要富含氧气和富含葡萄糖的培养基,而厌氧菌则需要采用无氧培养技术。
培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。
需要特别注意的是,预装培养基的储存时间不能太长。虽然一般来说,预装培养基可以在 4℃ 到 8℃ 的环境下保存数个月的时间,但是长时间的储存也会导致培养基失去一定的活性和营养价值。因此,建议在使用预装培养基之前,应该先检查一下储存时间和储存条件是否符合要求,以保证实验结果的准确性和可靠性。预装培养基的储存温度和储存条件至关重要,在实验室工作中应该引起足够的重视。在使用预装培养基时,应当注意储存温度不能太高,要存放在干燥、阴凉、避光和密封的地方,同时也需要注意储存时间不能太长,以保证培养基的效果和实验结果的准确性。液体培养基的配方和制备方法不同于干粉培养基,需要在满足卫生标准和生物安全操作指南的情况下进行。
干粉培养基的成分和保存条件有关。它基本上由粉末制成,可以长期保存。干燥的粉末是细菌、霉菌和其他微生物生长的不良条件,因此干粉培养基适合在干燥和阴凉的环境中保存。这可以使其更长时间地保存,并减少出现问题的风险。对于一些菌株而言,基础的培养温度为37℃,一些不同种类的微生物在培养时的较适温度也会有所不同。因此,在选择保存干粉培养基温度时,应该考虑不同类型的细胞在不同温度下生长的特点。一般来说,室温下保存是可行的,但是在如此的温度下保存仍然会发生微生物的生长和其他一些反应,这会影响到干粉培养基的质量和保质期。因此,干粉培养基的较佳保存温度应该在-20 ℃或-80 ℃的低温下进行保存。这种温度环境可以使干粉培养基的成分保持稳定,减缓分解反应,避免细菌生长和其他不良影响。选择培养基时,必须考虑具体微生物的生长条件。拉氧头孢钠溶液
在培养细胞时通常还需要添加药物,以防止细菌污染。Stainer and Scholte液体培养基
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。Stainer and Scholte液体培养基