培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。按照固态和液态的分布方式,培养基也可分为固态和液态培养基。Luria琼脂基础
干粉培养基是一种经常被使用的培养基,由于其易于储存和携带,也经常被用于实验室的常规操作中。在使用干粉培养基时,人们经常会问到一个问题,那就是干粉培养基可以重复使用吗?首先,需要明确的是干粉培养基是指培养基由干燥制成的粉末,而并不是指培养基的原液。在细菌或其他微生物培养中,常用的是制成干粉之后需要通过加水或其他液体来重建成液态培养基的干粉培养基。因此,干粉培养基在制备时需要严格的操作和储存规范,以保证其质量和可重复使用性。而对于是否可以重复使用,需要依据实验室的具体情况来考虑。如果干粉培养基使用过程中与周围环境接触,或者在制备时不符合储存要求,那么干粉培养基的质量就无法得到保障。这时候,即便再次使用干粉培养基,也无法保证其质量和培养结果的可靠性。乳酸杆菌琼脂培养基头孢磺啶-氯苯酚-新生霉素(CIN)琼脂 尿素吲哚培养基 吡嗪酰胺酶检测酪蛋白大豆琼脂 木糖-明胶培养基。
预装培养基是一种快速而方便的微生物培养技术,通常在无菌的纸板或管中提供。它们已经含有必要的营养成分,可以直接使用于微生物,从而将实验室的培养基制备时间从几个小时缩短到几分钟。此外,预装培养基通常具有长期的稳定性,可以存储数月甚至数年而不影响到较终的微生物培养结果。虽然预装培养基可以提供必要的营养成分,但它们不能提供微生物所需要的所有物质。一些微生物需要特定的营养成分,如果预装培养基缺少这些必要成分,它们将无法生长和繁殖。此外,某些微生物需要特定的肥料和环境条件来繁殖,而预装培养基通常无法满足这些要求。
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。制备的培养基应该被分装并在适当的装置中储存。
对于已经购买来的预装培养基,其内部较初的状态已经是无菌的。因此,在通常情况下,我们不需要对新的预装培养基进行任何形式的消毒处理。只需要在使用之前,检查预装培养基瓶口是否无菌,便可以直接使用。在使用过程中,应当严格遵守实验室操作规范,避免外界微生物的污染。对于需要自制的培养基而言,其情况也不尽相同。如果自制的培养基中包含天然成分,那么在自制之后就需要进行消毒处理,以杀死培养基中可能存在的微生物。在消毒处理之后,再将培养基装入瓶中,就可以进行进一步的实验使用。同时,在使用自制的预装培养基时,需要严格控制其培养温度、培养时间、以及实验环境等参数,以保证实验结果的准确性。干粉培养基可以添加不同的生长因子,这些物质有助于促进或抑制细胞分裂和生长。CCDA添加剂
血肉汤是含有动物红细胞和肉浸出物的液体培养基,适用于需要求血因子的微生物。Luria琼脂基础
在细胞、组织和微生物的培养过程中,pH值的控制非常重要。不同的培养基需要不同的pH范围,以满足生长和发展的需求。pH值是指培养基中氢离子(H+)的浓度,是一个表示溶液酸碱性的指标。pH值的数值越小,表示溶液越酸性。pH值的数值越大,表示溶液越碱性。pH值的中性为7。pH值对细胞和微生物生长和发展有着重要的影响。过高或过低的pH值都会影响生命体的正常生长。pH值的小幅度变化就足以影响酶的活性,从而影响代谢和生长。因此,对于细胞、组织和微生物的研究,必须控制好培养基的pH值。Luria琼脂基础