培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。培养基类型和配方可以根据需要进行定制,以满足特定的实验需求。弯曲杆菌琼脂基础
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。蜡状芽孢杆菌琼脂基础培养基是一种供养分离的微生物和生物样品的营养物质基质。
在制备培养基的过程中,安全是第1原则。要保证培养基的无菌性、无致病性、无致变性,避免应用医疗性维生素、肽聚糖、半合成血清等,以避免在细胞培养等实验过程中产生的杂菌和微生物的病变,对实验过程的准确性和可靠性产生不利影响。培养基中含有营养成分,必须考虑基本食物成分(水、碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等)作为通用要素。不同类型的生物需要不同的营养成分,因此在制备培养基时必须注意保证各种营养成分的均衡和充足,以确保生物体生长、繁殖的需要和生理上的健康状况。
天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。例如。牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基和LB培养基等。常用的天然有机营养物质包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。例如。高氏1号培养基和查氏培养基等。合成培养基有一定的配方,配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。特定的培养基可用于特定的微生物和组织细胞培养。
预装培养基的有效期是指由于技术和保质问题而限定的使用时限。虽然预装培养基在生产过程中基本上是消毒处理的,但是在使用过程中,仍然会存在着微生物和其他污染因素对培养基的影响。因此,即使保质期未过,在使用之前也应检查其质量,并确保其适用于实验的要求。一般情况下,市售的预装培养基的保质期通常为6-12个月,但是这只是一个约定值,并不是通用值。在制造过程中,每个厂家都会考虑到不同的因素,如培养基成分、凝胶结构、包装方式和储存条件等,保质期因此也不一样。因此,在购买预装培养基时,我们应该认真查看其保质期,以便判断其可行性。LG培养基 SSM琼脂 平板计数琼脂(PCA)标准方法琼脂(SA) TAT肉汤基础 心浸液肉汤(Huntoon)HIB培养基。双歧杆菌活化培养基
胰蛋白酶大豆琼脂(TSA) TGE肉汤(含TTC) 四号琼脂基础/4号琼脂基础 O/F试验用培养基(HLGB)。弯曲杆菌琼脂基础
预装培养基的保存方法:预装培养基的保存在实验中也是非常重要的一步。由于培养基中含有大量的微生物和营养成分,因此需要进行正确的储存,以确保实验结果的准确和稳定。在保存预装培养基时,一定要注意以下几点:储存的环境一定要干燥、洁净、通风,并且要避免阳光直射。储存温度通常在2℃-8℃之间,在保存时需要进行冷藏处理,避免高温环境下的微生物污染。使用之前需要在无菌操作区域中先将培养基倒入无菌的器皿中,再进行培养实验。除了在储存和使用时需要注意的细节,还有一些其他对预装培养基进行选择和应用的一些要点。在选择预装培养基时,需要根据实验需求选择相应的培养基,比如可以选择差异性培养基、选择性培养基及其它特殊性质的培养基。其次,在使用预装培养基时,需要注意其适用范围,以免出现不必要的实验失败。弯曲杆菌琼脂基础