培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。牛肉精蛋白胨培养基是常用的富营养培养基,适用于快速生长的微生物。马丁琼脂
使用预装培养基前应该检查其有效期,确认其是否过期。如果装在容器中的培养基已经超过了其有效期,即使它看起来没有问题,也不能在实验中使用。因为过期的培养基可能会因为细菌、病毒等微生物侵入而变质,使得实验结果不准确或者完全失败。因此在使用前需要仔细检查有效期。使用预装培养基需要先检查容器的密封性,确认容器是否完好无损,是否密封良好。因为培养基是灵敏的生物制品,如果容器未密封良好,其中的培养基可能会受到外部污染,细菌、霉菌等微生物可能会侵入其中,导致实验结果不准确或失败。所以在使用前要检查容器完整性和密封性。马丁琼脂自制培养基需要小心配比,防止成分误差或者污染。
选择和配置培养基是生物实验中的重要步骤。在选择培养基时,需要考虑微生物或细胞的种类、生长条件、培养目的等因素。同时,还需要注意培养基的配方和制备过程,以确保培养基的质量和稳定性。在配置培养基时,需要按照一定的步骤和比例称取各种成分,并加入适量的水混合均匀。为了确保培养基的质量,需要对培养基进行检查和筛选。一般来说,可以通过显微镜观察菌落形态、颜色等方法来初步判断培养基的质量。此外,还可以采用比色法等生化实验方法对培养基中的营养成分进行定量分析,以确保培养基的适宜性和稳定性。
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。培养基还可以根据所需生长的微生物类别,加入特定的营养物质,例如血清、血红蛋白等等。
各种生物具有不同的营养需求和生长特性。在选择培养基时需要了解生物的基本信息,如生长率、形态、特化程度、基因型和病毒负荷等因素。对于不同种类的生物,需要选择适当的培养基,以使其能够生长繁殖,并保持其原始形态和特性。在选择培养基时,一般需要考虑的问题包括生物的饲养密度、培养时间、培养液中浓度的较佳浓度等。不同的实验要求需要不同的培养基。例如,细胞培养和微生物培养需要不同种类的培养基。细胞培养的培养基一般需要提供较高的营养水平和多种生长因子,以支持细胞生长和繁殖;而微生物培养的培养基则需要提供特定的有机物或无机盐类,以保证微生物生长和繁殖的需要。此外,对于一些特定的细胞和微生物,还需要有特殊的培养技术和特定的培养基,以实现对其生长和繁殖的控制。大多数微生物可以使用富含营养的复合培养基快速生长,但有些微生物需要特定配方的培养基。TTC溶液
液体培养基的使用需要遵循严格的实验操作规程和生物安全标准,以确保实验室工作人员和环境的安全。马丁琼脂
培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。马丁琼脂