如果干粉培养基使用后得以正确储存,也符合使用规范,完全可以重复使用。在使用之前,需要将其储存在密封的、不受光的容器中,以保持其干燥和细菌无菌。另外,为了增加干粉培养基的使用效率和可靠性,建议使用干燥无菌的器材来制备干粉培养基。在制备过程中,应充分混合干粉培养基和水,并在符合温度和时间要求的条件下灭菌。只有在这样良好的操作和储存环境下,干粉培养基才能保持干燥、无菌,质量得到保证。当然,为了保证实验的可重复性和一致性,建议在重复使用干粉培养基时,及时验证其培养效果。可以制备一定量的干粉培养基,将其分成若干批,每次只取一小部分用于实验。实验结果的一致性可以从不同批次之间的观察和比较中得到验证。制备培养基时,应严格控制这些参数并避免接触空气或污染源。改良Preston氏弯曲杆菌选择性琼脂添加剂
培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。无机盐淀粉琼脂培养基应适合不同类型细菌的生长,包括需氧菌和厌氧菌。
预装培养基在实验室中的应用越来越普遍,但是在运输和储存过程中容易受到一些影响。因此,需要对预装培养基的运输进行注意和保护。在运输过程中需要遵循一定的规范,包装材料要符合环保要求,并且要使用专业的保护材料进行包装,保证在运输过程中预装培养基的完好性。在选购预装培养基时要选择正规可靠的生产厂家,产品质量要好,取样过程要规范,保证培养基的成分准确无误,细菌的生长情况更为良好。在运输过程中需要注意温控问题,保证预装培养基在运输中能够维持稳定的温度,且温度不至于过高或者过低,以免影响生长质量。在实验室中使用预装培养基时需要注意正确的保存方法,按照生产厂商的说明进行保存,并注意消毒问题,尽量防止预装培养基的受污染。
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。生长细胞需要的营养物质包括碳源、氮源、微量元素和维生素等。
干粉培养基的组成:干粉培养基通常由基础草料、营养(或培养)成分、缓冲剂、指示剂、氨基酸、维生素和其他有机化合物等组成。具体成分的选择和比例取决于所需培养的微生物类型和生长条件。基础草料通常由各种蛋白质来源(如动物肌肉、黄豆、酵母等)组成,提供微生物生长所需的碳、氮、磷、硫、镁、铁等元素。营养(或培养)成分则包括转化碳源、氮源、磷酸盐、微量元素等,是培养基的主要能量源和合成原料。缓冲剂用于维持培养基的 pH 值稳定,适当的 pH 值对于微生物生长和代谢至关重要。指示剂常用于检测微生物在培养基中的生长和代谢情况,如酚红、溴蓝、氧化亚铁等。氨基酸和维生素等是微生物在生长过程中所需的营养物质,能够促进微生物的代谢和生长。培养基中含有的生长因子和营养成分会影响微生物的生长速率、形态和细胞大小。营养肉汤(NB)
长期保存培养基的实验室应采取措施,防止其硬化和污染。改良Preston氏弯曲杆菌选择性琼脂添加剂
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。改良Preston氏弯曲杆菌选择性琼脂添加剂