α-凝血酶(α-Thrombin)是一种高度特异性的丝氨酸蛋白酶,由凝血酶原(Prothrombin,II因子)经蛋白水解活化而来。它在凝血过程中起着非常重要的作用,不仅能够促使纤维蛋白凝块的产生,还负责提供反馈信号来寻找前辅因子:V因子和VIII因子。也可以用作血管收缩剂。在体内,活化的X因子(FactorXa)切割凝血酶原,释放出活性肽并将凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一条轻链(Achain)(Mw~6,000)和一条重链(Bchain)(Mw~31,000)通过二硫键连接而成。某些情况下,α-凝血酶会发生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由对α-凝血酶A链水解并切割含有B链糖基化位点的小片段(B1,B2)组合而成。除了用于凝血研究之外,α-凝血酶还常用来位点特异性切割融合蛋白。基因重组时将凝血酶识别位点插入在目的蛋白与利于后续纯化和/或表达的多肽或者蛋白之间,通过凝血酶切割表达的重组子即可释放目的蛋白。凝血酶本身可通过亲和层析技术快速去除。本品是由匀质化的人凝血酶原经由Xa因子,Va因子和磷脂活化而得,经SDS-PAGE检测确保凝血酶原的完全活化,并以NIH凝血酶的标准品为参考,提供的酶活力不少于3091NIHU/mg。在分子生物学、生物化学或生物工程制药研究中也常作为工具酶用于重组融合蛋白的特异性断裂。Recombinant Protein G (Freeze-Dried) 重组蛋白G(冻干)
胶原蛋白是哺乳动物体内含量多的功能性蛋白[1]。胶原蛋白由3条α链的多肽链亚基组成,α链自身构型为左手螺旋,三条α链又互相缠绕成右手螺旋结构,即胶原蛋白的“胶原域”[2]。胶原蛋白的一级结构分析结果显示,其肽链由(Gly-X-Y)n组成,其中X通常是脯氨酸,Y通常是羟脯氨酸[3]。按照胶原蛋白发现的先后顺序,可将其分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型等28种胶原蛋白[4],Ⅰ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ),主要分布于骨骼中[5];Ⅱ型胶原蛋白由[α1(Ⅱ)]3组成,主要由软骨细胞产生,因其含有大量赖氨酸残基,因而糖基化率较高[6];Ⅲ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅲ)]3,因含半胱氨酸所以肽链间形成二硫键,因此其本身就可形成细纤维,Ⅲ型胶原蛋白血管中含量较高,主要存在于肺泡间质中且分布杂乱,因而形成复杂的网状结构,正是这种结构使得肺组织具有良好的柔韧性与弹性,并且可以为细胞提供充足养分,使得皮肤饱满透亮[7]。Recombinant Human Galectin-3 ProteinOSM与白血病抑制因子(LIF)密切相关,实际上,除了其在人类中的特定受体外,它实际上还使用了LIF受体。
基因工程与抗体技术通过基因工程方法,可以构建重组3C蛋白酶,并利用其切割特异性进行活性验证。此外,通过动物实验获得3C蛋白酶抗体,可以探索利用抗体技术抑制3C蛋白酶活性,进而达到抑制病毒复制的目的4。研究进展与挑战3C蛋白酶及其抑制剂的研究进展迅速,但仍面临挑战。例如,需要深入了解不同耐药突变对3CLpro自身活性的影响,以及不同抑制剂之间的交叉耐药风险。这些研究对于开发新的广谱抗病毒药物具有重要意义38。结论3C蛋白酶是一类在RNA病毒复制中发挥关键作用的酶,是抗病毒药物开发的重要靶点。深入研究3C蛋白酶的结构、功能以及耐药机制,对于开发有效的抗病毒药物和方法具有重要意义。随着科学技术的不断进步,3C蛋白酶的研究将为人类战胜病毒性疾病提供更多的科学依据策略。
抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。人α-凝血酶,一种丝氨酸蛋白酶,是凝血级联反应中的中心酶,对止血和其他多种生理过程至关重要。
RecombinantBiotinylatedHumanENPP-3Protein,His-AviTag性能参数分子别名(Synonyms)NPP3;E-NPP3;PD-Ibeta表达区间及表达系统(Source)BiotinylatedHumanENPP-3ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheN-Terminus.ItcontainsLeu48-Ile875.[Accession|O14638]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof99.97kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto110-130kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制剂(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重构方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.储存条件Theproductshouldbestoredat-25~-15℃for1yearfromdateofreceipt.2-7days,2~8°Cundersterileconditionsafterreconstitution.3-6months,-85~-65℃还具有抑制髓样细胞增殖的能力,髓样细胞增殖是Eotaxin不共有的生物学功能。Recombinant Human Galectin-3 Protein
鼠AFGF与人AFGF具有96%的氨基酸序列身份,因此它在鼠和人AFGF之间表现出相当大的物种交叉反应性。Recombinant Protein G (Freeze-Dried) 重组蛋白G(冻干)
BovineThrombin,HighSpecificActivity,>2000IU/mg牛凝血酶(高活力,>2000IU/mg)本品有效切割质量比1:2000,通常在未做过预实验的情况下建议在1:1000质量比进行体系的优化,即1mg的目的蛋白加入2U的酶(2000U/mg),使用时可用生理盐水将酶配成100U/mL,有效消化缓冲液:20mMTris-HCl,含150mMNaCl,pH8.0。在20℃-37℃切割0.3-16h。注意:①具体反应温度可根据融合蛋白的性质而定,如需要低温保存的蛋白,可在4℃切割24h。②因为凝血酶会吸附在玻璃上,建议用塑料管分装冻存(-20℃)凝血酶溶液。注意事项1.此冻干产品稳定性好,2~8℃条件下保存3年,酶活力未有变化。室温条件下保存1年,酶活力未有变化。2.本产品作科研用途。3.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。Recombinant Protein G (Freeze-Dried) 重组蛋白G(冻干)
磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种利用磁性纳米颗粒固相核酸富集技术来纯化质粒DNA的产品。它通常包括高性能纳米磁珠和独特的缓冲体系组合,通过裂解菌体后释放的DNA,能够有效地结合于磁珠表面,漂洗除杂后获得高质量的目的质粒。以下是磁珠法质粒小量抽提试剂盒的一些主要特点和应用:1.**快速简便**:操作步骤简单,无需多次离心,整个抽提过程通常只需20-25分钟。2.**高得率和纯度**:可以从1-5ml新鲜大肠杆菌菌液中分离纯化2-20µg高质量的质粒DNA。纯化得到的DNA质量高,完整性好,OD260/280比值一般为1.8~1.9之间,OD260/230比值大于2.0。3.**适用性广**:适用于...