抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。肠激酶用于重组抗体和其他蛋白质的质量检测,确保其正确折叠和功能。Recombinant Human Prolactin Protein
产品描述纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg),即凝血因子I,分子量约340kDa,由α、β、γ三对不同多肽链组成,多肽链间以二硫键相连。α链分子量63.5kDa,β链分子量56kDa,γ链分子量47kDa,纤维蛋白原约含4%碳水化合物。纤维蛋白原参与凝血的原理:在凝血酶作用下,α链与β链分别释放出A肽与B肽,生成纤维蛋白单体。在此过程中,由于释放了酸性多肽,负电性降低,单体易于聚合成纤维蛋白多聚体,但此时单体之间借氢键与疏水键相连,尚可溶于稀酸和尿素溶液中。进一步在Ca2+与活化的ⅩⅢ因子作用下,单体之间以共价键相连,则变成稳定的不溶性纤维蛋白凝块,完成凝血过程。来源于不同物种(如来源于牛、猫、狗、豚鼠、人、绵羊、小鼠和大鼠等)的纤维蛋白原具有相似的结构和性质。因此,一般来源于一种哺乳动物的纤维蛋白原可与其他来源的凝血酶交叉反应,相反地来自一种哺乳动物蛋白的凝血酶液也可注入多种动物,发生凝血反应。Recombinant Canine CD28 Protein,mFc Tag酵母重组表达N-糖苷酶F,是一种利用酵母作为宿主细胞,通过基因工程技术表达特定酶的过程。
RecombinantBiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling),hFcTag性能参数分子别名(Synonyms)OX40Lreceptor;CD134;TNFRSF4;Ly-70表达区间及表达系统(Source)BiotinylatedHumanOX40/TNFRSF4/CD134Protein(PrimaryAmineLabeling)isexpressedfromHEK293withhFctagattheC-Terminus.ItcontainsLeu29-Ala216.[Accession|P43489]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof46.8kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto72-75kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGE制剂(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).储存条件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.
糖苷酶F(PNGaseF)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。N-糖苷酶F(PNGaseF)在酵母中重组表达(比活性:100000U/mL),可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGaseF的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括酵母重组表达的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),内切糖苷酶H,内切糖苷酶S。产品信息产品性质中文别名(Chinesesynonym)N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶F英文别名(Englishsynonym)PNGaseF来源(Source)酵母重组表达分子量(Molecularweight)36kDa比活性(Specificactivity)100000U/mL缓冲液组分(Buffer)20mMTris-HClpH7.5,50mMNaCl,5mMEDTA,50%Glycerol泛素蛋白(Ubiquitin,简称Ub)是一种在真核细胞中普遍存在的小分子蛋白,具有高度保守性。
大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质,由于只需要简单的培养基和条件,因此费用低且方便。此外,除了无细胞表达,它是速度的系统,大肠杆菌倍增时间(约20min)比酵母(2h)、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说,在大肠杆菌中表达重组蛋白包括:1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌;2.培养细胞至对数生长期;3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后,相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的,以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类:E.coliRNA聚合酶转录的载体GPCR家族是一类存在于生物体中的跨膜蛋白,它们可以识别并与外界分子相互作用,引发各种细胞内信号。Recombinant Cynomolgus BAFFR/TNFRSF13C Protein,His Tag
透明质酸(Hyaluronic Acid,简称HA)是一种存在于人体和动物组织中的天然高分子多糖,称为糖醛酸或玻尿酸。Recombinant Human Prolactin Protein
牙花(GPC)是硫酸肝素蛋白聚糖的一个家族,它是由糖磷酸肌醇(GPI)锚连接在细胞表面的。在哺乳动物中发现了这个家族的六名成员(GPC-GPC6)。已经研制出几种抗gpc3抗体。产品性质同义词Gpc3;dgsx;gbs1;sgbs1;sgbs1;工会编号P51654-1来源重组人的Gpc3/葡萄糖3蛋白表达于C-端的HK293细胞和AVI标记。里面有GLN-25-559。分子量该蛋白质的预测兆瓦为63.6kda。由于糖基化,蛋白质迁移到42kda,80-135kda基于三联页面结果。纯洁根据三-BIS页面确定的90%产品用Lal法测定每一种蛋白质。公式化在PBS(PPS)中用0.22离子过滤溶液冻干(PH7.4)。通常在冻干前添加5%海藻糖作为保护剂。重建离心管打开前。建议将其重组为超过100克/毫升的浓度(冻干时通常使用1毫克/毫升的溶液)。在蒸馏水中溶解冻干蛋白。Recombinant Human Prolactin Protein
牛痘DNA拓扑异构酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)在实验室中的使用主要涉及以下几个步骤:1.**DNA载体连接**:-牛痘DNA拓扑异构酶I可以用于DNA载体连接,特别是在TOPO克隆载体制备中。它能够识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT],并与DNA形成共价连接形成稳定复合物,遇到DNA的5’-OH基团后,重新连接形成完整DNA链。2.**接头连接**:-在NGS建库中,牛痘DNA拓扑异构酶I可用于接头连接。这包括将含有特定序列的接头A和接头B与酶一起孵育,以实现DNA片段的连接。3.**操作步骤**:-**质粒解旋**:将超螺旋质粒DNA与...