牛凝血酶(Bovine Thrombin),作为一种高特异性的丝氨酸蛋白水解酶,具有重要的生物学功能的科研应用。本文综述了牛凝血酶的分子特性、生物学作用及其在医学研究中的应用。引言凝血酶是血液凝固过程中的关键酶,负责将纤维蛋白原转化为纤维蛋白,从而促进血栓形成。牛凝血酶因其高比活度(>2000 IU/mg)和高纯度,在生物医学研究中用作工具酶。材料与方法产品来源与纯化:牛凝血酶从牛血浆中提取,并通过一系列生物技术手段进行纯化。活性测定:利用特定的底物或荧光共振能量转移(FRET)底物测定凝血酶活性。应用研究:通过体外实验和体内模型,研究牛凝血酶在血液学、分子生物学和药物开发中的应用。结果分子特性:牛凝血酶由两条肽链组成,分子量约为37 KD,具有高度的专一性和高效的催化能力。生物学作用:牛凝血酶能够催化纤维蛋白原水解释放A肽和B肽,形成纤维蛋白单体,参与血液凝固和伤口愈合。科研应用:牛凝血酶在重组蛋白的特异性断裂、基因工程产品开发、以及作为诊断学中的凝血化验工具等方面展现出重要价值。泛素-蛋白酶体途径在调控多种细胞过程中的关键作用,靶向这一途径的药物开发已成为预防某些疾病的新策略。Tuftsin
Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门作用于糖链的内切酶,对研究蛋白质糖基化修饰具有重要意义。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制以及在糖生物学研究中的应用。引言蛋白质糖基化是一种普遍存在的翻译后修饰,对蛋白质的结构、稳定性和功能发挥着关键作用。Endo H是一种能够特异性识别并切割高甘露糖型N-连接糖链的内切酶,广泛应用于蛋白质糖基化分析。Endo H的结构特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量约为130 kDa。该酶具有一个催化中心,能够识别并切割特定的糖苷键。Endo H的三维结构尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些关键催化残基已被确定。催化机制Endo H通过水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)与N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之间的β-1,4糖苷键,从而释放高甘露糖型N-连接糖链。该过程不涉及辅因子,表明Endo H催化机制可能依赖于其活性位点的氨基酸残基。Recombinant Human TSPAN8 Protein,hFc Tag全长跨膜蛋白A2AR,也就是腺苷受体A2aR(ADORA2A),是一种七次跨膜蛋白,属于G蛋白偶联受体。
CD30,又称KI抗原和Tnfrsf8,是一种120kdaI型跨膜糖蛋白,属于tnf受体超家族。成熟的人CD30由一个361AA细胞外域(ECD)和六个富含半胱氨酸的重复,28AA跨膜段和188AA细胞质域。相比之下,小鼠和大鼠CD30缺乏90AA的ECD,并且只包含三个富含半胱氨酸的重复。在ECD的共同区域内,人CD30与小鼠CD30和大鼠CD30的序列认同率分别为53%和49%。人类CD30的交替剪接产生一个等形,包括细胞质域的C132AA。CD30通常在抗原细胞和B细胞上表达。但是,它在霍奇金氏病(红-斯特恩伯格细胞上)、其他淋巴瘤、慢性炎症中,以及自体免疫。CD30与CD30配体/tnfsf8结合,TH细胞、单核细胞、粒细胞和髓质胸腺上皮细胞上表达。产品性质别名CD30;CD30KI-1;CD30Lreceptor;TNFRSF8;D1S166EKi-1;CD30KI-1工会编号P28908-1表达区间及表达系统重组的人CD30/Tnfrsf8蛋白表达于在C-端有标记和AVI标记的HK293细胞。它含有……。分子量大约41.3公里。由于糖基化,蛋白质迁移到70-100kda基于三联页面结果。纯度SDS-PAGE和高效液相色谱法测定的95%。
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)注意事项1.本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。2.不建议37℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,为获得理想的酶切结果,请先将样品透析到25mMTris-HCl8.0缓冲液中,然后再进行酶切实验;若不方便透析,可将样品稀释到咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白比例不变;若干扰因素很多,且不便去除,需要适当增加酶量或延长酶切时间,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用,痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。5.本品是具有高酶活力重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑除去。后续如需去除重组肠激酶,可用阴离子交换树脂(如DEAE-FF)对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下:平衡缓冲液:25mMTris-HClpH8.0洗脱缓冲液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可适当增加酶量,或适当延长酶切时间。全长膜蛋白由于其天然构象,是跨膜蛋白药物开发中的好的抗原。在细胞中的表达水平通常较低。
糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义(UnitDefinition)1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-25~-15℃保存,有效期1年。使用方法1、变性条件下蛋白质去糖基化:1)在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白(1-20μg),至终体积10μL;2)100℃温度下煮沸10min使其变性,冰上冷却,离心10秒;加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去离子水,总反应体积20μL;加入1-2μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。2、非变性条件下蛋白质去糖基化:1)在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白(1-20μg)至体积为20μL。2)加入2~5μL的PNGaseF,轻轻混匀。3)37°C孵育4-24h。注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。注意事项1.PNGaseF建议搭配我司提供的配套缓冲液使用,按我司说明书建议的操作量配套缓冲液足够。如您由于使用体系造成配套缓冲液不足,可咨询当地销售进行购买α-凝血酶的多面性质在其临床使用中提出了挑战,特别是在平衡其止血效果与血栓形成风险之间。Recombinant Mouse OSMR Protein,His Tag
在蛋白质工程中,PNGase F可以用于改变蛋白质的糖基化模式,以研究糖基化对蛋白质功能的影响。Tuftsin
重组肠激酶(rEK)是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段,氨基酸序列与牛肠激酶轻链一致,有着和天然提取的肠激酶同样特异的酶切位点,切割位点Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签,同时重组肠激酶(rEK)具有比天然酶更高的切割活性。重组肠激酶为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶,不含其他蛋白酶,可以在较宽pH范围(4.5-9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白,并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签,由于具有极高酶切活性,酶切反应使用量少,不影响下游蛋白应用,可不考虑除去。产品信息规格100U/200U/500U/1000U/5000U产品性质来源(Source)大肠杆菌表达分子量(MolecularWeight)理论值25.85kDa外观(Appearance)澄清、无色至淡黄色液体酶浓度(EnzymeConcentration)≥5U/uL活性定义(ActivityDefinition)一个活性单位定义为25°C,12-16h,Tuftsin
磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种利用磁性纳米颗粒固相核酸富集技术来纯化质粒DNA的产品。它通常包括高性能纳米磁珠和独特的缓冲体系组合,通过裂解菌体后释放的DNA,能够有效地结合于磁珠表面,漂洗除杂后获得高质量的目的质粒。以下是磁珠法质粒小量抽提试剂盒的一些主要特点和应用:1.**快速简便**:操作步骤简单,无需多次离心,整个抽提过程通常只需20-25分钟。2.**高得率和纯度**:可以从1-5ml新鲜大肠杆菌菌液中分离纯化2-20µg高质量的质粒DNA。纯化得到的DNA质量高,完整性好,OD260/280比值一般为1.8~1.9之间,OD260/230比值大于2.0。3.**适用性广**:适用于...