Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门作用于糖链的内切酶,对研究蛋白质糖基化修饰具有重要意义。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制以及在糖生物学研究中的应用。引言蛋白质糖基化是一种普遍存在的翻译后修饰,对蛋白质的结构、稳定性和功能发挥着关键作用。Endo H是一种能够特异性识别并切割高甘露糖型N-连接糖链的内切酶,广泛应用于蛋白质糖基化分析。Endo H的结构特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量约为130 kDa。该酶具有一个催化中心,能够识别并切割特定的糖苷键。Endo H的三维结构尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些关键催化残基已被确定。催化机制Endo H通过水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)与N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之间的β-1,4糖苷键,从而释放高甘露糖型N-连接糖链。该过程不涉及辅因子,表明Endo H催化机制可能依赖于其活性位点的氨基酸残基。全长跨膜蛋白A2AR,也就是腺苷受体A2aR(ADORA2A),是一种七次跨膜蛋白,属于G蛋白偶联受体。Recombinant Mouse HGF Protein
RecombinantBiotinylatedHumanHLA-A*02:01&B2M&MAGE-A4orMAGE-A8(KVLEHVVRV)MonomerProtein,His-AviTag性能参数分子别名(Synonyms)MAGE-A4orMAGE-A8;MAGE-A4;MAGE-A8;表达区间及表达系统(Source)BiotinylatedHumanHLA-A*02:01&B2M&MAGE-A4orMAGE-A8(KVLEHVVRV)MonomerProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*02:01),Ile21-Met119(B2M)andKVLEHVVRVpeptide.[Accession|A0A140T913(HLA-A*02:01)&P61769(B2M)&KVLEHVVRV]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof50.50kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto52-62kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制剂(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).储存条件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recombinant Cynomolgus LAMP5 Protein,His Tagα-凝血酶不仅在凝血中起作用,还在细胞信号中发挥作用。它可以启动血小板并刺激炎症介质的产生。
糖苷酶F(PNGaseF)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。N-糖苷酶F(PNGaseF)在酵母中重组表达(比活性:100000U/mL),可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGaseF的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括酵母重组表达的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),内切糖苷酶H,内切糖苷酶S。产品信息产品性质中文别名(Chinesesynonym)N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶F英文别名(Englishsynonym)PNGaseF来源(Source)酵母重组表达分子量(Molecularweight)36kDa比活性(Specificactivity)100000U/mL缓冲液组分(Buffer)20mMTris-HClpH7.5,50mMNaCl,5mMEDTA,50%Glycerol
抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。泛素是一种小分子蛋白,存在于真核生物中,它在细胞内起到调节蛋白质降解、信号转导、细胞周期控制。
3C蛋白酶(3C Protease),也称为3Cpro或3C样蛋白酶(3CLpro),是一类在RNA病毒复制中发挥关键作用的酶。它们负责切割病毒的多聚蛋白前体,从而释放出成熟的病毒蛋白,这些蛋白对于病毒的复制和组装至关重要。3C蛋白酶在多种病毒中都有发现,包括冠状病毒、小RNA病毒等。结构与功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位点,能够识别并切割特定的氨基酸序列。例如,小RNA病毒科的3C蛋白酶识别位点为Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro,切割位点位于谷氨酰胺(Gln)和甘氨酸(Gly)之间,称为Q-G位点4。抗病毒药物开发3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的关键作用,成为抗病毒药物开发的重要靶点。通过抑制3C蛋白酶的活性,可以有效阻断病毒的复制过程。例如,SARS-CoV-2(病毒)的3CLpro是抗冠状病毒药物的重要靶点,西湖大学胡奇团队等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潜在耐药机制,为解决潜在的耐药问题提供了重要信息3。耐药性研究随着3CLpro抑制剂的使用,其耐药问题也日益受到关注。研究表明,3CLpro的某些突变可能导致病毒对抑制剂产生耐药性。在某些疾病中,特定蛋白质的泛素化水平可能发生变化,因此,泛素化蛋白质可以作为疾病的生物标志物。Recombinant Human GFRA3 Protein,His Tag
PNGase F是一种酰胺水解酶,能够特异性地裂解糖蛋白中由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂型的寡糖。Recombinant Mouse HGF Protein
重组肠激酶(rEK)是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段,氨基酸序列与牛肠激酶轻链一致,有着和天然提取的肠激酶同样特异的酶切位点,切割位点Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签,同时重组肠激酶(rEK)具有比天然酶更高的切割活性。重组肠激酶为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶,不含其他蛋白酶,可以在较宽pH范围(4.5-9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白,并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签,由于具有极高酶切活性,酶切反应使用量少,不影响下游蛋白应用,可不考虑除去。产品信息规格100U/200U/500U/1000U/5000U产品性质来源(Source)大肠杆菌表达分子量(MolecularWeight)理论值25.85kDa外观(Appearance)澄清、无色至淡黄色液体酶浓度(EnzymeConcentration)≥5U/uL活性定义(ActivityDefinition)一个活性单位定义为25°C,12-16h,Recombinant Mouse HGF Protein
磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒在科研中的应用非常广,主要包括以下几个方面:1.**PCR产物的纯化**:磁珠法试剂盒可以从PCR反应液中回收不同片段大小的DNA,有效去除酶、dNTP、盐类等杂质,回收率高,产物纯度好,可以直接应用于PCR、连接、测序、NGS建库等下游实验。2.**基因组DNA的提取**:适用于从血液、唾液、口腔拭子和动物组织等样品中分离纯化高质量基因组DNA,提取的DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠,适合高通量工作站的自动化提取。3.**质粒DNA的提取**:磁珠用于从粗制的提取物中分离质粒DNA,通过精心优化的溶液将质粒DNA从基因组DNA和蛋白质中分离出来。4.**DNA...