dGTPSolution(脱氧鸟苷三磷酸溶液)在分子克隆中扮演着重要角色,主要应用包括但不限于以下几个方面:1.**DNA合成**:dGTP作为DNA聚合酶的底物之一,在分子克隆中用于合成新的DNA链,特别是在PCR扩增和cDNA合成中。2.**PCR扩增**:在常规PCR和高保真PCR中,dGTP提供必要的核苷酸,以确保目标DNA片段的准确复制。3.**cDNA合成**:在从mRNA模板合成cDNA的过程中,dGTP是合成互补DNA链的关键成分。4.**DNA测序**:dGTP也用于Sanger测序等DNA测序技术中,帮助合成测序反应中的DNA链。5.**质粒构建**:在质粒或其他载体的构建过程中,dGTP可能用于填补缺口或连接DNA片段。6.**引物延伸**:在引物延伸反应中,dGTP用于延伸引物,以合成完整的DNA链。7.**DNA标记**:dGTP可以用于DNA片段的标记,便于后续的克隆和检测。dGTPSolution通常以100mM的浓度提供,以便于在实验中根据需要进行稀释。在使用时,应确保产品具有高纯度、无DNase和RNase污染,以保证实验的准确性和重复性。此外,dGTPSolution应储存在-20°C的条件下,避免反复冻融,以保持其稳定性。泛素化是一种蛋白质翻译后修饰过程,涉及将泛素分子共价结合到靶蛋白上。这个过程由一系列酶促反应组成。Recombinant Bovine PF-4/CXCL4
1st Strand cDNA Synthesis Kit(RNase H-)的逆转录过程是将RNA模板转换成cDNA的过程。这个过程通常包括以下几个步骤:模板RNA的准备:确保RNA模板的质量和纯度,可能需要使用DNase I来去除RNA样品中的DNA污染。逆转录反应体系的配制:根据试剂盒的说明,将RNA模板、引物(如Oligo(dT)、随机六聚体或基因特异性引物)、dNTPs、逆转录酶和缓冲液等组分混合在一起。逆转录酶的启用:如果需要,可能要将反应体系预热到一定温度以达到逆转录酶。逆转录反应:在适宜的条件下,逆转录酶会根据RNA模板合成一条互补的DNA链。这个过程通常在一定的温度范围内进行,以保证酶的活性和反应的效率。反应的终止:逆转录反应完成后,通常通过加热到较高温度来终止反应,以防止cDNA的进一步合成。产物的纯化:合成的cDNA可能需要通过某些方法(如柱层析或沉淀)进行纯化,以去除未反应的dNTPs、RNA模板和酶等。cDNA的检测和应用:合成的cDNA可以用于后续的PCR、qPCR、克隆、测序等实验。Recombinant Human CDH11/Cadherin 11 Protein,His Tag通过使用PNGase F去除糖蛋白上的糖链,可以确定蛋白质是否发生糖基化,以及糖基化位点。
pA-Tn5转座酶是一种经过改造的高活性Tn5转座酶,与ProteinA融合,形成一种新型融合酶,应用于CUT&Tag技术中,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。这种融合酶具备以下特点:1.**高活性**:pA-Tn5转座酶是超高活性的突变形式,体外转座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5转座酶的N端结构域为ProteinA的一部分,可以与免疫球蛋白的Fc区相互作用,特别是与大多数哺乳动物的IgG结合。3.**Tn5转座酶活性**:C端结构域为Tn5转座酶,能够特异性识别转座子两端反向重复的ME序列(MosaicEnd),并在形成转座复合体后随机插入靶DNA中。4.**应用广**:适用于CUT&Tag技术、高通量测序建库、ATAC-seq等,特别适用于早期胚胎发育、干细胞、以及表观遗传学等研究领域。5.**操作简便**:pA-Tn5转座酶的使用简化了实验步骤,可以在一步反应中实现DNA片段化和接头连接,从细胞到二代测序文库的转化过程需9小时。6.**低细胞投入量**:CUT&Tag技术允许从低至60个细胞的样本中获得结果,甚至可以应用于单细胞水平的研究。7.**高质量结果**:pA-Tn5转座酶的使用可以保证DNA片段化,同时获得的蛋白纯度高、核酸残留低。
5'DNA腺苷酰化试剂盒的适用性非常广,主要包括以下几个方面:1.**miRNA克隆**:该试剂盒可用于miRNA等3'端为羟基的RNA或单链DNA在克隆时,3'端添加接头的制备。2.**高通量测序建库**:在高通量测序中,该试剂盒可用于制备5'端腺苷酰化修饰的单链DNA,这些DNA可以用于测序文库的构建。3.**PCR检测**:在PCR检测中,该试剂盒可以帮助制备具有特定5'端修饰的DNA片段,以适应某些PCR应用的需求。4.**单链DNA或RNA的5'端腺苷酰化**:试剂盒可以催化5'端磷酸化的单链DNA或单链RNA转换成5'端腺苷酰化DNA或RNA,无论3'端是否进行了氨基化等封闭。5.**环状DNA生成**:在不存在ATP的条件下,5'DNA/RNAAdenylase可以催化5'端磷酸化的单链DNA生成环状DNA。6.**RNALigation**:该试剂盒包含的MthRNA连接酶,可以用于RNA的连接反应,尤其是在需要5'端腺苷酰化DNA作为连接接头时。7.**科研实验**:所有提到的产品信息都明确指出,5'DNA腺苷酰化试剂盒用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途。将Cas9/sgRNA复合物转染到目标细胞中。可以使用脂质体介导转染、电穿孔或其他转染技术 。
EB分子生物学通常指的是溴化乙锭(EthidiumBromide,EB)在分子生物学中的应用。溴化乙锭是一种常用的荧光染料,主要用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA或RNA。它通过插入核酸的碱基对之间,在紫外光照射下发出橙红色的荧光,从而实现对核酸的可视化。溴化乙锭与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性,并且在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个EB分子。然而,值得注意的是,溴化乙锭具有一定的毒性,它是一种强诱变剂,具有高致病性。在实验结束后,需要对含EB的溶液进行净化处理,以避免对环境和人体健康造成危害。处理方法包括稀释EB溶液至低于0.5mg/ml的浓度,然后加入化学物质进行中和,废弃。除了作为染色剂外,溴化乙锭还可用于凝胶阻滞分析中检测蛋白与DNA复合物,以及在凝胶电泳过程中观察单个DNA分子。尽管EB具有这些应用,但由于其潜在的毒性和诱变性,使用时必须格外谨慎,并采取适当的安全措施。在实验操作中,EB可以加入到凝胶中进行染色,也可以在电泳完成后加入进行染色。先加EB可以节省时间,但可能会导致背景稍微高且信号强度下降,不宜用于核酸分子大小的确定和定量。后加EB可以减少污染,图谱更清晰,但相对耗时。全长A2aR蛋白可应用于免疫、ELISA、SPR(表面等离子共振)、BLI(生物层干涉)和细胞实验等场景。OVA Peptide (257-264)
2aR蛋白在细胞内发挥着不同的作用,例如在信号传递、物质转运和细胞通讯等方面。Recombinant Bovine PF-4/CXCL4
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)是一种用于合成互补DNA(cDNA)的试剂盒,它通过逆转录过程从信使RNA(mRNA)或总RNA模板合成cDNA的链。这类试剂盒通常包含逆转录酶(ReverseTranscriptase,RT)和其他必要的组分,以确保高效和准确的cDNA合成。RNaseH-表示该试剂盒使用的逆转录酶缺乏RNaseH活性,这意味着在合成cDNA链的过程中不会发生RNA的降解,从而可以产生更高产量的全长cDNA,特别是从较长的模板(可达13kb)。该试剂盒通常包括以下组分:-逆转录酶,如RevertAidHMinusM-MuLVReverseTranscriptase,它通过点突变完全消除了RNaseH活性。-RiboLockRNaseInhibitor,这是一种重组蛋白,可有效保护RNA在高达55°C的温度下不受RNases的降解。-缓冲液、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)和其他辅助成分,以支持cDNA合成反应。-有时还包括用于去除RNA样品中污染的基因组DNA的DNaseI。合成的cDNA可以作为PCR或实时PCR的模板直接使用,也适用于第二链cDNA合成或线性RNA放大。此外,可以在cDNA合成过程中加入放射性或非放射性标记的核苷酸,以便在包括微阵列在内的杂交实验中作为探针使用。Recombinant Bovine PF-4/CXCL4
磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒在科研中的应用非常广,主要包括以下几个方面:1.**PCR产物的纯化**:磁珠法试剂盒可以从PCR反应液中回收不同片段大小的DNA,有效去除酶、dNTP、盐类等杂质,回收率高,产物纯度好,可以直接应用于PCR、连接、测序、NGS建库等下游实验。2.**基因组DNA的提取**:适用于从血液、唾液、口腔拭子和动物组织等样品中分离纯化高质量基因组DNA,提取的DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠,适合高通量工作站的自动化提取。3.**质粒DNA的提取**:磁珠用于从粗制的提取物中分离质粒DNA,通过精心优化的溶液将质粒DNA从基因组DNA和蛋白质中分离出来。4.**DNA...