4.**培养条件**:-培养基的制备方法包括称取基础培养基14.2g加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取1.2g李斯特氏菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动,使其乳化均匀,将二者分别于121℃高压灭菌15分钟。冷至50℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入李斯特氏菌抑菌剂,混匀,倾入无菌平皿。5.**质量控制**:-质控菌株在37℃培养24-48小时,单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌在该培养基上生长良好,形成蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。其他菌如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌则不生长或生长不良。6.**储存条件**:-制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,保存温度2-8℃。7.**注意事项**:-严格按照标签说明进行配制培养基,避免混合时培养基和添加剂温度过高导致平板出现絮状物。干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。这些特点使得李斯特氏菌显色培养基在食品卫生微生物检验中具有重要的应用价值。由于含有不溶性活性炭,BCYE琼脂培养基整体呈现黑色,这有助于在培养过程中观察到的特征性变化 。发根农杆菌培养基(YEB)
赖氨酸培养基(LYS)是一种选择性培养基,主要用于野生酿酒酵母的分离和计数。以下是其主要特点:1.**成分**:-赖氨酸培养基的主要成分包括D-葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、氯化钠、腺嘌呤、DL-甲硫氨酸、L-组氨酸、DL-色氨酸、硼酸、硫酸锌、钼酸铵、硫酸锰、硫酸亚铁、L-赖氨酸、肌醇、泛酸钙、硫胺素、吡哆醇、对氨基苯甲酸、烟酸、核黄素、生物素、叶酸和琼脂等。2.**pH值**:-培养基的pH值通常控制在5.0±0.2,使用10%乳酸调节pH值至5.0。3.**选择性**:-赖氨酸作为氮源,很多酵母可以利用赖氨酸为氮源,这使得培养基具有选择性。4.**应用范围**:-主要用于接种用酵母中野生酵母的分离和计数。5.**制备方法**:-称取6.6g培养基粉末,用100ml去离子水重悬,加入0.84ml的60%乳酸钾溶液,加热煮沸至完全溶解,冷却至50°C,用10%乳酸调节pH至5.0,倒入无菌培养皿。6.**灭菌方法**:-将培养基加热煮沸,溶解于1000ml蒸馏水中,冷至50℃左右时,用16%乳酸溶液调整pH至4.8±0.2,混匀,倾入无菌平皿,备用。7.**保存条件**:-培养基应密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。L-酪氨酸悬液含糖牛肉汤琼脂培养基在生产过程中会进行质量控制,确保其性能和准确性,适用于微生物实验室研究 。
LPM琼脂培养皿的主要成分LPM琼脂培养皿的主要成分包括:氯化锂(Lithium chloride):这是一种渗透压调节剂,能够抑制非李斯特菌的生长,特别是对革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌有较强的抑制作用。苯乙醇(Phenylethanol):苯乙醇是一种抗菌剂,能够抑制一些非目标细菌的生长,帮助筛选出李斯特菌。拉氧头孢(Moxalactam):这是一种抗生物质,主要用于抑制革兰氏阳性菌,特别是葡萄球菌和链球菌。甘氨酸酐(Glycine):甘氨酸酐是一种氨基酸衍生物,可以促进李斯特菌的生长。氯化钠(Sodium chloride):氯化钠用于维持培养基的渗透压平衡。蛋白胨和牛肉浸粉:这些成分提供细菌生长所需的氮源和维生素。琼脂:作为凝固剂,使培养基凝固成固体状态,便于细菌在其表面生长。
在配制改良高氏二号培养基时,如果遇到成分沉淀问题,可以采取以下措施进行处理:1.**充分溶解**:确保所有成分在加入之前已经充分溶解。对于不易溶解的成分,如琼脂,需要在加热条件下不断搅拌直至完全溶解。2.**调整溶解顺序**:根据各成分的溶解特性,调整添加顺序。通常先溶解无机盐和维生素,再加入有机物质。3.**使用辅助溶剂**:对于某些难溶成分,可以考虑使用适当的溶剂或助溶剂来帮助溶解。4.**避免混合沉淀**:在混合不同成分时,要注意避免因成分相互作用而产生沉淀。例如,避免将钙盐和磷酸盐直接混合。5.**控制pH值**:pH值的变化可能会影响某些成分的溶解度,因此在调节pH值时要小心,确保在成分完全溶解后再进行。6.**分步灭菌**:如果培养基中某些成分不耐热,可以考虑分步灭菌。即先灭菌大部分成分,冷却后再添加不耐热的成分。7.**过滤**:如果沉淀物已经形成,可以通过过滤来去除。使用适当孔径的滤纸或滤网过滤培养基。8.**搅拌**:在溶解和加热过程中,持续搅拌可以减少沉淀的形成。9.**使用螯合剂**:对于易氧化的成分,如硫酸亚铁,可以使用螯合剂(如EDTA)来防止沉淀和氧化。胡萝卜浸出液葡萄琼脂糖培养基具有一定的透明度,便于观察微生物的生长情况,如菌落形态、颜色等。
哥伦比亚琼脂培养基(ColumbiaAgar)是一种常用的微生物学培养基,具有以下特点:1.**用途**:-主要用于梭菌的分离培养,特别是用于药品中梭菌的检测。2.**成分组成**:-培养基的主要成分包括酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、玉米淀粉、氯化钠和琼脂。这些成分提供碳氮源、维生素和生长因子,维持均衡的渗透压,并作为凝固剂。3.**添加剂**:-每瓶需配套添加硫酸庆大霉素,以抑制肠杆菌科和铜绿假单胞菌的生长。4.**pH值**:-培养基的pH值控制在7.3±0.2(25℃)。5.**配制方法**:-称取44g培养基粉末,加热溶解于1000ml纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃,加入硫酸庆大霉素20mg,混匀,倾入无菌平皿,备用。6.**培养条件**:-将培养基放置于30℃-35℃恒温培养箱中,进行厌氧培养48-72小时。7.**质控结果**:-接种质控菌株如生孢梭菌、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌,观察其生长情况和特征。生孢梭菌在该培养基上生长良好,形成无色菌落,而大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌则被抑制。8.**注意事项**:-培养基中含少量淀粉,若灭菌前未加热煮沸溶解,灭菌后冷却可能出现少量白色沉淀。
改良番茄汁琼脂培养皿的主要成分包括番茄粉、牛肉粉、酵母粉、磷酸氢二钾、葡萄糖、乙酸钠、乳糖和琼脂。发根农杆菌培养基(YEB)
连四硫酸盐肉汤培养基(TetrathionateBroth,简称TTB)是一种选择性富集培养基,主要用于分离和富集沙门氏菌。以下是其主要特点:1.**成分组成**:-连四硫酸盐肉汤培养基的基础成分包括胰酪蛋白胨、动物组织消化物、胆盐、碳酸钙和硫代硫酸钠等。每升培养基中通常包含胰酪蛋白胨2.5g、动物组织消化物2.5g、胆盐1.0g、碳酸钙10.0g和硫代硫酸钠30.0g。2.**选择性**:-该培养基通过添加去氧胆盐和亮绿染料等抑制剂,抑制革兰氏阳性菌的生长,从而提高对沙门氏菌的选择性。碘-碘酸钾与硫代硫酸钠反应生成四硫磺酸盐,阻遏常规肠道细菌生长。3.**鉴别功能**:-葡萄糖和甘露醇是可发酵的糖类物质,辅助肠道致病菌尤其是沙门氏菌的鉴别。连四硫酸盐肉汤培养基含有碘液和煌绿水溶液,这些添加剂有助于抑制共生生物,从而改善沙门氏菌的分离。4.**应用广**:-主要用于伤寒沙门氏菌和其他沙门氏菌的分离、增菌和鉴定。常用于从粪便、污水等样品中分离沙门氏菌。5.**配制方法**:-一般将培养基粉末溶解在蒸馏水或去离子水中,加热煮沸,分装后进行高压灭菌。使用时需现配现用,以保证培养基的稳定性和选择性。发根农杆菌培养基(YEB)