Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein

磁珠法质粒小量抽提试剂盒中的磁珠分离通常涉及以下步骤：1.**裂解细胞**：-首先，使用裂解液（含有SDS等成分）裂解细菌细胞，释放出质粒DNA。2.**结合磁珠**：-将磁珠加入到裂解后的混合物中，磁珠表面通常修饰有能够特异性结合核酸的配体，使得质粒DNA吸附于磁珠表面。3.**磁分离**：-将含有磁珠和质粒DNA的混合物置于磁分离架上。磁分离架产生磁场，使得磁珠迅速聚集在管壁或管底。4.**未结合物质**：-在磁珠固定后，小心移除上清液，避免扰动磁珠。上清液中含有未吸附的蛋白质、RNA和其他细胞碎片。5.**洗涤磁珠**：-向磁珠中加入洗涤液，轻轻混匀以去除残留的杂质，然后再次使用磁分离架分离磁珠和洗涤液。6.**重复洗涤**：-根据试剂盒的说明，可能需要进行多次洗涤以确保高度纯化。每次洗涤后都需洗涤液。7.**干燥磁珠**（如果需要）：-在某些情况下，可能需要去除洗涤后的残留液体，让磁珠在磁场作用下干燥，但要注意不要使磁珠完全干燥，以免影响DNA的洗脱。8.**洗脱质粒DNA**：-使用洗脱液（通常是低盐或高pH的缓冲液）将质粒DNA从磁珠上洗脱。洗脱液可以破坏磁珠与DNA之间的结合力，释放DNA。。

T4UvsX重组酶是一种来源于T4噬菌体的酶，它是RecA/Rad51家族的同源体。这种重组酶在双链DNA断裂的修复和复制叉重新启动的过程中起到重要作用。T4UvsX重组酶可以通过与其他DNA结合蛋白或辅助因子一起与单链DNA形成核酸蛋白复合物，并通过寻找与靶标DNA的互补区域进行杂交，以完成链置换反应。此外，T4UvsX重组酶在生产时由大肠杆菌表达和纯化。T4UvsX重组酶的产生过程涉及到基因工程和蛋白质表达的常规技术。首先，T4噬菌体的基因序列被识别并克隆到适合的表达载体中，然后这个载体被转化到大肠杆菌宿主细胞中。在宿主细胞内，T4UvsX基因被转录和翻译，产生重组酶蛋白。随后，通过一系列步骤包括细胞培养、蛋白质表达、细胞裂解、蛋白质纯化等，获得所需的T4UvsX重组酶。这一过程通常在生物技术实验室中进行，并且需要精确的分子生物学操作和蛋白质工程知识。

pA-Tn5转座酶是一种经过改造的高活性Tn5转座酶，与ProteinA融合，形成一种新型融合酶，应用于CUT&Tag技术中，用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。这种融合酶具备以下特点：1.**高活性**：pA-Tn5转座酶是超高活性的突变形式，体外转座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**：pA-Tn5转座酶的N端结构域为ProteinA的一部分，可以与免疫球蛋白的Fc区相互作用，特别是与大多数哺乳动物的IgG结合。3.**Tn5转座酶活性**：C端结构域为Tn5转座酶，能够特异性识别转座子两端反向重复的ME序列(MosaicEnd)，并在形成转座复合体后随机插入靶DNA中。4.**应用广**：适用于CUT&Tag技术、高通量测序建库、ATAC-seq等，特别适用于早期胚胎发育、干细胞、以及表观遗传学等研究领域。5.**操作简便**：pA-Tn5转座酶的使用简化了实验步骤，可以在一步反应中实现DNA片段化和接头连接，从细胞到二代测序文库的转化过程需9小时。6.**低细胞投入量**：CUT&Tag技术允许从低至60个细胞的样本中获得结果，甚至可以应用于单细胞水平的研究。7.**高质量结果**：pA-Tn5转座酶的使用可以保证DNA片段化，同时获得的蛋白纯度高、核酸残留低。

5'DNA腺苷酰化试剂盒通过特定的酶催化反应，将5'-磷酸化的单链DNA（pDNA）转化为5'-腺苷酰化DNA（AppDNA）。以下是启用5'-磷酸化的单链DNA的一般步骤：1.**准备反应体系**：-根据试剂盒说明书，准备所需的反应组分，包括5'-磷酸化的单链DNA、腺苷酰化酶（如Adenylase或MthRNA连接酶）、ATP和相应的缓冲液。2.**混合组分**：-将5'-磷酸化的单链DNA与腺苷酰化酶、ATP和缓冲液混合在适当的反应容器中。3.**孵育反应**：-将混合好的反应体系在指定的温度（通常是65℃）下孵育一定的时间，以允许酶将ATP中的AMP部分转移到DNA的5'端。4.**酶失活**：-反应完成后，在85℃孵育5分钟以失活腺苷酰化酶，这一步是为了防止后续的去腺苷酰化现象，确保腺苷酰化比率不下降。5.**产物收集**：-由于转化效率高，通常不需要进行凝胶纯化步骤。可以通过乙醇沉淀等方法收集腺苷酰化后的DNA产物。6.**产物应用**：-收集的腺苷酰化DNA可以直接用于后续的克隆、测序、连接或其他分子生物学实验。7.**注意事项**：-确保所有操作在无RNA酶和无DNA酶的环境中进行，以避免污染。-使用时需注意反应体系的准确性，确保底物、酶和ATP的比例适当。

5'DNA腺苷酰化试剂盒是一种用于将单链DNA(ssDNA)5'端腺苷酰化修饰的实验工具，其主要应用于miRNA等3'端为羟基的RNA或单链DNA在克隆、高通量测序建库或PCR检测等时，在3'端添加的接头的制备。以下是5'DNA腺苷酰化试剂盒的一些关键特点和使用方法：1.**高效转化**：该试剂盒能将95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)转化成腺苷酰化DNA(AppDNA)，从而提高产量并避免胶回收提纯步骤。2.**操作简便**：单步反应即可完成腺苷酰化，无需复杂的操作或额外的纯化步骤。3.**高温反应**：在65℃的高温下进行反应，这有助于避免DNA或RNA的二级结构对腺苷酰化反应的干扰。4.**适用性广**：适用于pmol级别至µmol级别的底物量，可以方便地根据实验需要放大反应体系。5.**组成成分**：试剂盒通常包含腺苷酰化酶(Adenylase)、ATP和所需的缓冲液，以及用于启动反应的5'-磷酸化的单链DNA。6.**保存条件**：一般建议在-20℃保存，有效期至少一年，长期储存建议在-70℃。7.**注意事项**：底物单链DNA或RNA的5'端磷酸化是必须的，而3'端可以进行氨基化等封闭，也可以不封闭。反应完成后推荐在85℃孵育5分钟以失活Adenylase，防止去腺苷酰化现象。Cas9 NLS与CRISPR/Cas9系统中的gRNA兼容，可以进行位点特异性的DNA切割 。Recombinant Human CA125/MUC16 Protein,His Tag

C5a通过与髓源性抑制细胞 (MDSCs) 膜上的受体C5aR1结合，招募MDSCs至炎症局部，抑制CD8+ T细胞增殖与功能。Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein,hFc Tag

5'DNA腺苷酰化试剂盒的单步反应是一种高效的酶促反应，用于在DNA分子的5'端添加一个腺苷酸（AMP）基团。这个过程通常涉及以下步骤：1.**准备反应混合物**：-根据试剂盒说明书，将所需的5'磷酸化的单链DNA（ssDNA或pDNA）、MthRNA连接酶（或其他腺苷酰化酶）、ATP和相应的缓冲液按比例混合。2.**孵育反应**：-将混合好的反应体系在指定的温度（通常是65℃）下孵育一定的时间，以允许酶将ATP中的AMP部分转移到DNA的5'端。3.**酶失活**：-反应完成后，通常在85℃孵育5分钟以失活腺苷酰化酶，这一步是为了防止后续的去腺苷酰化现象，确保反应的稳定性。4.**产物收集**：-由于转化效率高，通常不需要进行凝胶纯化步骤。可以通过乙醇沉淀等方法收集腺苷酰化后的DNA产物。5.**产物应用**：-收集的腺苷酰化DNA可以直接用于后续的克隆、测序、连接或其他分子生物学实验。6.**注意事项**：-确保所有操作在无RNA酶和无DNA酶的环境中进行，以避免污染。-使用时需注意反应体系的准确性，确保底物、酶和ATP的比例适当。单步反应的优势在于简化了操作流程，减少了样品处理的复杂性，并且由于高转化效率，避免了耗时的纯化步骤，从而节省了时间和成本。Recombinant Cynomolgus PVRIG Protein,hFc Tag