亚硫酸铋琼脂平板培养皿(BismuthSulfiteAgar,简称BSA)是一种用于选择性分离培养沙门氏菌的培养基,具有以下特点:1.**试验原理**:-亚硫酸铋琼脂培养基通过其成分抑制大肠杆菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌的生长,但对沙门氏菌的生长没有影响。沙门氏菌能利用葡萄糖,将亚硫酸盐还原成硫化物并与硫酸亚铁反应,使得菌落呈黑色,此外还可以将铋离子还原成金属铋,使菌落呈现金属光泽,从而使沙门氏菌得到分离。2.**培养基配方**:-培养基的主要成分包括蛋白胨、牛肉粉、葡萄糖、硫酸亚铁、亚硫酸铋、磷酸氢二钠、亮绿和琼脂。具体配方为每升含有蛋白胨10.0g、牛肉浸粉5.0g、葡萄糖5.0g、硫酸亚铁0.3g、磷酸氢二钠4.0g、琼脂15.0g、亚硫酸钠6.0g、柠檬酸铋铵2.0g、煌绿0.025g、纯化水1000mL,pH值为7.5±0.2。3.**使用方法**:-亚硫酸铋琼脂平板培养皿为即用型成品平板,拆包即可使用,注意无菌操作。培养基中的柠檬酸铋铵和亚硫酸钠反应生成不溶物,培养基呈浑浊状,有黑色沉淀,摇匀后倒平板使用即可。4.**储存条件与保质期**:-亚硫酸铋琼脂平板培养皿应储存在2~8℃,避光保存,有效期见包装。制备SDA时,需要按照一定的比例称取各种成分,溶解在蒸馏水中,调节pH值,然后进行高压灭菌。DKW培养基
硫酸盐还原菌培养基E是一种专门用于培养硫酸盐还原菌(SRB)的培养基,其配方和使用说明如下:1.**配方**:-成分(g/L):磷酸氢二钾0.5g、氯化铵1.0g、硫酸钠0.5g、氯化钙0.1g、硫酸镁2.0g、乳酸钠3.5g、酵母汁1.0g、硫酸亚铁铵0.3g、维生素C0.1g,pH值控制在7.2±0.2(25℃)。2.**配制方法**:-按照上述配方准确称量各种成分,加入蒸馏水溶解,调节pH值至7.2±0.2,然后进行灭菌处理。3.**灭菌处理**:-配制好的培养基通常在121℃高压下灭菌15分钟以确保无菌。4.**培养条件**:-硫酸盐还原菌的培养条件需要在无氧环境下进行,因为这些细菌通常是厌氧的。培养温度和pH值需要根据具体菌株的偏好进行调整。5.**使用说明**:-培养基融化后应立即移开,室温静置片刻,以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到适宜温度后尽快使用,放置时间一般不超过4小时。剩余的培养基凝固后不得再次融化使用。6.**注意事项**:-在使用和进一步加热前,应将培养基放置到室温。经过高压灭菌的培养基应尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。加入样品的培养基应将温度调节到44℃~47℃,或按照相关标准调节温度。
VCN 抑菌剂SDA的pH值通常在5.6左右,这个pH值范围适合大多数病原菌的生长。
改良察氏肉汤(ModifiedCzapekDoxBroth)是一种常用于培养霉菌的培养基,其特点如下:1.**成分特点**:改良察氏肉汤的主要组成成分包括蔗糖作为的碳源,硝酸钠作为的氮源,以及磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氯化钾、硫酸镁、硫酸亚铁等,这些成分提供必需的离子和缓冲作用。2.**pH值**:改良察氏肉汤的pH值通常控制在6.0-6.5之间,这为霉菌提供了适宜的生长环境。3.**用途**:这种培养基主要用于霉菌的增菌培养,适用于多种菌的培养和传代,包括曲霉、青霉和放线菌等。4.**制备方法**:改良察氏肉汤的制备方法包括称量特定量的粉末,加入蒸馏水溶解,经过高温灭菌,并在冷却后使用。5.**培养条件**:接种后,通常在23℃-28℃下进行需氧培养,培养时间为48至72小时,以观察微生物的生长情况。6.**质控结果**:改良察氏肉汤支持多种质控菌株的生长,例如黑曲霉ATCC16404和白色念珠菌ATCC10231,这些菌株在培养基中表现出良好的生长。7.**应用范围**:除了霉菌培养,改良察氏肉汤还可用于土壤微生物学检验、和霉菌的抗性检验等生物学方法。
LPM琼脂培养皿的制备方法LPM琼脂培养皿的制备通常遵循以下步骤:称量:首先,根据需要的培养基体积,准确称量LPM琼脂粉末。溶解:将称量好的LPM琼脂粉末溶解在蒸馏水中,通常使用1000毫升水溶解50.5克培养基粉末。灭菌:将溶解后的培养基溶液进行高压灭菌,通常在121℃下保持15分钟。冷却:灭菌后的培养基需要冷却至45-50℃,以便于后续添加添加剂。添加添加剂:在冷却后的培养基中加入LPM琼脂添加剂,如拉氧头孢,每100毫升培养基中加入1支。混合:将添加剂与培养基混合均匀。倾倒入平皿:将混合好的培养基溶液倒入无菌平皿中,待其凝固后即可使用。R2A琼脂培养皿适用于多种微生物的培养,如铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌等,用于进行微生物质控结果的测试 。
连四硫酸盐肉汤培养基(TetrathionateBroth,简称TTB)是一种选择性富集培养基,主要用于分离和富集沙门氏菌。以下是其主要特点:1.**成分组成**:-连四硫酸盐肉汤培养基的基础成分包括胰酪蛋白胨、动物组织消化物、胆盐、碳酸钙和硫代硫酸钠等。每升培养基中通常包含胰酪蛋白胨2.5g、动物组织消化物2.5g、胆盐1.0g、碳酸钙10.0g和硫代硫酸钠30.0g。2.**选择性**:-该培养基通过添加去氧胆盐和亮绿染料等抑制剂,抑制革兰氏阳性菌的生长,从而提高对沙门氏菌的选择性。碘-碘酸钾与硫代硫酸钠反应生成四硫磺酸盐,阻遏常规肠道细菌生长。3.**鉴别功能**:-葡萄糖和甘露醇是可发酵的糖类物质,辅助肠道致病菌尤其是沙门氏菌的鉴别。连四硫酸盐肉汤培养基含有碘液和煌绿水溶液,这些添加剂有助于抑制共生生物,从而改善沙门氏菌的分离。4.**应用广**:-主要用于伤寒沙门氏菌和其他沙门氏菌的分离、增菌和鉴定。常用于从粪便、污水等样品中分离沙门氏菌。5.**配制方法**:-一般将培养基粉末溶解在蒸馏水或去离子水中,加热煮沸,分装后进行高压灭菌。使用时需现配现用,以保证培养基的稳定性和选择性。改良番茄汁琼脂培养基的pH值控制在6.8±0.2,这为乳酸菌的生长提供了适宜的酸碱环境 。酵母浸粉葡萄糖肉汤
不同细菌在TSA上的生长特征有区别,如金黄色葡萄球菌可能产生黄色的色素,大肠埃希氏菌形成无色透明菌落。DKW培养基
支原体肉汤培养基是一种专门用于支原体的分离和培养的培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-支原体肉汤培养基的主要成分包括猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。具体配方为每升含有猪胃消化粉10.0g,牛肉浸粉5.0g,酵母浸粉5.0g,氯化钠2.5g,葡萄糖5.0g,酚红0.02g,pH值调至7.6±0.2(25℃)。2.**用途**:-主要用于支原体的分离培养,特别是肺炎支原体。支原体检查法在2020年版《中华人民共和国药典》中体现,要求使用支原体肉汤培养基培养监测肺炎支原体。3.**培养条件**:-支原体肉汤培养基需要在36℃培养7-14天,观察培养基变色结果。肺炎支原体可以发酵培养基中的葡萄糖,使培养基的pH值降低,遇指示剂酚红使培养基变黄。4.**添加剂**:-每瓶支原体肉汤培养基需配套青霉素溶液(80万IU),每1000ml支原体肉汤培养基溶液中添加1支青霉素溶液(80万IU),以抑制细菌的生长。5.**培养基灵敏度**:-支原体肉汤培养基和精氨酸支原体肉汤培养基的灵敏度均达到10^9CCU·mL^-1。支原体肉汤基础和精氨酸支原体肉汤基础存放于2~8℃有效期为90天。DKW培养基