T4UvsX重组酶是一种来源于T4噬菌体的酶,它是RecA/Rad51家族的同源体。这种重组酶在双链DNA断裂的修复和复制叉重新启动的过程中起到重要作用。T4UvsX重组酶可以通过与其他DNA结合蛋白或辅助因子一起与单链DNA形成核酸蛋白复合物,并通过寻找与靶标DNA的互补区域进行杂交,以完成链置换反应。此外,T4UvsX重组酶在生产时由大肠杆菌表达和纯化。T4UvsX重组酶的产生过程涉及到基因工程和蛋白质表达的常规技术。首先,T4噬菌体的基因序列被识别并克隆到适合的表达载体中,然后这个载体被转化到大肠杆菌宿主细胞中。在宿主细胞内,T4UvsX基因被转录和翻译,产生重组酶蛋白。随后,通过一系列步骤包括细胞培养、蛋白质表达、细胞裂解、蛋白质纯化等,获得所需的T4UvsX重组酶。这一过程通常在生物技术实验室中进行,并且需要精确的分子生物学操作和蛋白质工程知识。

磁珠法质粒小量抽提试剂盒通过一系列优化的步骤来确保从细菌细胞中提取高质量和高纯度的质粒DNA。以下是这一过程的一般步骤:1.**细胞培养**:-首先,将含有质粒的大肠杆菌在适宜的培养基中培养至适宜密度(通常是OD600约0.6-1.2)。2.**裂解细胞**:-使用试剂盒提供的裂解液(含有SDS和可能的其他裂解成分)破坏细菌细胞壁和膜,释放出细胞内容物。3.**吸附磁珠**:-将磁珠加入裂解后的混合物中,磁珠表面修饰有能够特异性结合核酸的配体,使得质粒DNA吸附于磁珠表面。4.**磁分离**:-利用磁力架将吸附有质粒DNA的磁珠从溶液中分离出来,去除未结合的蛋白质和其他细胞碎片。5.**洗涤杂质**:-经过几次洗涤步骤,使用试剂盒提供的洗涤液去除吸附在磁珠表面的蛋白质、RNA和其他杂质。6.**去除洗涤液**:-磁分离后,小心地移除洗涤液,避免磁珠干燥或吸入磁珠,以确保纯度。7.**洗脱质粒**:-使用试剂盒提供的洗脱液(通常是低盐或高pH的缓冲液)将质粒DNA从磁珠上洗脱下来。8.**收集质粒**:-洗脱后的质粒DNA通常在室温或4°C下保存,避免多次冻融,以维持DNA的完整性。

T4UvsX重组酶在生产时由大肠杆菌表达和纯化,指的是利用分子生物学技术将T4UvsX重组酶的基因克隆到大肠杆菌(Escherichiacoli)中,然后通过大肠杆菌的生物合成机制来生产这种酶。具体过程如下:1.**基因克隆**:首先,科学家们会从T4噬菌体中分离出编码T4UvsX重组酶的基因。2.**载体构建**:将这个基因插入到一个质粒(一种小型、圆形的DNA分子)中,这个质粒可以作为载体,将目标基因导入大肠杆菌。3.**转化**:将含有T4UvsX基因的质粒转化到大肠杆菌细胞中。转化是指将外源DNA引入到细胞内的过程。4.**表达**:一旦质粒进入大肠杆菌细胞,它将开始表达T4UvsX基因,即利用大肠杆菌的核糖体和其他细胞机制来合成T4UvsX重组酶的蛋白质。5.**培养**:将转化后的大肠杆菌在适宜的培养基中培养,使其繁殖,从而增加T4UvsX重组酶的产量。6.**纯化**:培养一段时间后,收集大肠杆菌细胞,通过一系列生化方法(如离心、过滤、层析等)从细胞裂解物中提取并纯化T4UvsX重组酶。
T4UvsX重组酶的保存和纯化是实验室工作流程中的重要环节,确保了酶的稳定性和活性。以下是根据搜索结果提供的信息:保存条件:-T4UvsX重组酶通常在-20°C的条件下保存,可以保持3年的有效期。-某些产品说明中提到,该制品不含甘油,可用于建立冻干体系,这可能对长期保存和运输有额外的好处。-建议避免反复冻融,因为这可能会影响酶的活性。纯化过程:-T4UvsX重组酶是由大肠杆菌表达和纯化的。这意味着科学家首先将T4噬菌体的uvsX基因克隆到适合在大肠杆菌中表达的质粒载体中。-然后将这个质粒转化到大肠杆菌宿主细胞中,使其表达T4UvsX蛋白。-接下来,通过一系列生化步骤从大肠杆菌细胞中提取和纯化T4UvsX蛋白,这些步骤可能包括细胞裂解、离心、层析等技术。注意事项:-T4UvsX重组酶的保存液中甘油含量为20%,建议单独分装保存,以避免反复冻融。-该酶无核酸酶活性,这表明它在催化反应时不会切割DNA链,而是促进DNA链的重组。-本产品用于科研用途,不应用于临床诊断。应用:-T4UvsX重组酶主要用于等温扩增技术,如重组酶聚合酶扩增(RPA),这是一种快速、灵敏的核酸检测技术。通过遵循这些保存和纯化指南,研究人员可以确保T4UvsX重组酶在实验中的有效性和可靠性。由于Cas9 NLS系统不涉及DNA的整合,因此降低了外源DNA整合至细胞基因组的风险 。

PCR预混合溶液是一种为聚合酶链反应(PCR)实验预先配制好的混合试剂,它包含进行PCR所需的大部分或全部成分,除了特定的DNA模板、引物和可能的水之外。这种预混合溶液的设计旨在简化实验步骤,减少实验过程中的误差,提高实验的重复性和效率。通常,PCR预混合溶液包含以下成分:-**DNA聚合酶**:负责在PCR过程中合成新的DNA链。-**dNTPs**(脱氧核苷三磷酸):是DNA合成的原料,包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP。-**缓冲体系**:提供适宜的pH和离子环境,保证DNA聚合酶的活性。-**Mg2+**:作为DNA聚合酶的辅助因子,影响酶的活性和PCR的特异性。-**稳定剂**:延长预混合溶液的有效期和稳定性。-**染料**(可选):如溴酚蓝或类似物质,用于在电泳时观察DNA条带。PCR预混合溶液的使用可以减少实验者在每次实验时手动添加各种成分的需要,从而节省时间并降低污染的风险。此外,一些预混合溶液还可能包含其他添加剂,比如增强剂或保护剂,以提高PCR的效率和稳定性。在基因编辑中,Pfu DNA Polymerase可以用于精确地引入特定位点的突变,或在基因组中插入特定的DNA序列。Recombinant Mouse Galectin 3 Protein,His Tag
与其他Cas12蛋白相比,FnCas12a蛋白的分子量较小,大约在400-700个氨基酸之间。Recombinant Human IL-18 R1/CD218a Protein,hFc Tag
pA-Tn5转座酶的产品组分通常包括以下几个部分:1.**pA-Tn5转座酶蛋白**:一种高活性的Tn5转座酶突变体与ProteinA的融合蛋白,它是产品的主要组分,用于实现DNA片段化和接头连接的功能。2.**储存溶液**:碧云天的BeyoNGS™pA-Tn5转座酶产品含有特定的储存溶液,其组成为50mMHEPES(pH7.2),100mMNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.1%TritonX-100,50%(v/v)Glycerol,这种溶液有助于保持酶的稳定性和活性。3.**测序接头(Adapters)**:用于与pA-Tn5转座酶组装形成pA-Tn5转座体(pA-Tn5Transposome),这是进行CUT&Tag实验的必需组分。4.**反应缓冲液**:部分产品包含用于转座酶反应的缓冲液,例如5×TagmentBuffer,这种缓冲液含有Mg2+,对转座酶的活性至关重要。5.**附件**:某些产品可能还包括附件,如说明书,提供产品使用和保存的详细信息。6.**其他组分**:根据产品的不同,可能还包括CouplingBuffer、AnnealingBuffer等其他辅助组分,这些组分有助于转座酶与DNA的结合和反应的进行。7.**包装规格**:pA-Tn5转座酶的包装规格可能有所不同,例如碧云天提供的BeyoNGS™pA-Tn5转座酶有800pmol和4000pmol两种包装规格。Recombinant Human IL-18 R1/CD218a Protein,hFc Tag
在现代替物技术的微观世界中,限制性核酸内切酶是基因工程的关键工具之一,而 ApaI 便是其中一位“精细切割手”。它以其高度的特异性和精细的切割能力,在基因工程、分子生物学研究以及遗传学等领域发挥着重要作用。ApaI 的识别序列是“GGG^CCC”,这一序列在基因组中相对罕见,使得 ApaI 能够在特定位置进行切割。它会在识别到该序列后,在“^”标记的位置将 DNA 链切断,产生黏性末端。这种切割方式使得 ApaI 在基因克隆和重组 DNA 构建中具有独特的优势。在基因工程中,ApaI 的应用极为广。科学家可以利用它将目标基因从复杂的基因组中精细地分离出来,再通过 DNA 连接酶将切割后的基因片...