5'DNA腺苷酰化试剂盒通过特定的酶催化反应,将5'-磷酸化的单链DNA(pDNA)转化为5'-腺苷酰化DNA(AppDNA)。以下是启用5'-磷酸化的单链DNA的一般步骤:1.**准备反应体系**:-根据试剂盒说明书,准备所需的反应组分,包括5'-磷酸化的单链DNA、腺苷酰化酶(如Adenylase或MthRNA连接酶)、ATP和相应的缓冲液。2.**混合组分**:-将5'-磷酸化的单链DNA与腺苷酰化酶、ATP和缓冲液混合在适当的反应容器中。3.**孵育反应**:-将混合好的反应体系在指定的温度(通常是65℃)下孵育一定的时间,以允许酶将ATP中的AMP部分转移到DNA的5'端。4.**酶失活**:-反应完成后,在85℃孵育5分钟以失活腺苷酰化酶,这一步是为了防止后续的去腺苷酰化现象,确保腺苷酰化比率不下降。5.**产物收集**:-由于转化效率高,通常不需要进行凝胶纯化步骤。可以通过乙醇沉淀等方法收集腺苷酰化后的DNA产物。6.**产物应用**:-收集的腺苷酰化DNA可以直接用于后续的克隆、测序、连接或其他分子生物学实验。7.**注意事项**:-确保所有操作在无RNA酶和无DNA酶的环境中进行,以避免污染。-使用时需注意反应体系的准确性,确保底物、酶和ATP的比例适当。

pA-Tn5转座酶是一种经过改造的高活性Tn5转座酶,与ProteinA融合,形成一种新型融合酶,应用于CUT&Tag技术中,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。这种融合酶具备以下特点:1.**高活性**:pA-Tn5转座酶是超高活性的突变形式,体外转座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5转座酶的N端结构域为ProteinA的一部分,可以与免疫球蛋白的Fc区相互作用,特别是与大多数哺乳动物的IgG结合。3.**Tn5转座酶活性**:C端结构域为Tn5转座酶,能够特异性识别转座子两端反向重复的ME序列(MosaicEnd),并在形成转座复合体后随机插入靶DNA中。4.**应用广**:适用于CUT&Tag技术、高通量测序建库、ATAC-seq等,特别适用于早期胚胎发育、干细胞、以及表观遗传学等研究领域。5.**操作简便**:pA-Tn5转座酶的使用简化了实验步骤,可以在一步反应中实现DNA片段化和接头连接,从细胞到二代测序文库的转化过程需9小时。6.**低细胞投入量**:CUT&Tag技术允许从低至60个细胞的样本中获得结果,甚至可以应用于单细胞水平的研究。7.**高质量结果**:pA-Tn5转座酶的使用可以保证DNA片段化,同时获得的蛋白纯度高、核酸残留低。Recombinant Human IL-17RB Protein,His TagPfu DNA Polymerase 具有3'-5'外切酶活性,能够识别并切除错配的核苷酸,进一步提高扩增的准确性。

PCR抑制剂是指那些在PCR反应中能够干扰或阻碍DNA扩增的物质。这些物质通常来源于生物样本本身或者样本的收集和处理过程。以下是一些PCR抑制剂的特点:1.**多样性**:PCR抑制剂可以是多种不同的化合物,包括胆酸盐、尿素、血红素、酚类化合物、蛋白质、多糖、植物或血液成分等。2.**来源**:它们可能来自血液(如血红素)、尿液(如尿素)、粪便(如胆酸盐)、植物(如多酚和多糖)、土壤(如腐殖酸)或化学物质(如酚类化合物)。3.**影响**:抑制剂可以影响DNA聚合酶的活性,干扰引物的退火,或与DNA模板发生非特异性结合,导致PCR扩增效率降低或特异性下降。4.**复杂性**:由于样本来源的复杂性,不同的抑制剂可能需要不同的策略来克服。某些抑制剂可能通过物理方法(如离心、过滤)去除,而其他抑制剂可能需要化学处理或使用特定的PCR增强剂。5.**浓度依赖性**:抑制效果通常与抑制剂的浓度有关。在较低浓度下,某些抑制剂可能不会影响PCR,但随着浓度增加,抑制效果会变得更加明显。6.**特异性**:某些抑制剂可能对特定的DNA聚合酶或PCR体系有特定的影响。例如,一些抑制剂可能特别影响高GC含量的模板扩增。
dNTPMix(脱氧核苷酸三磷酸混合溶液)的"特异性"一词在不同的上下文中可能有不同的含义。在分子生物学领域,特异性通常指的是分子识别和相互作用的精确性。对于dNTPMix,特异性可以指以下几个方面:1.**碱基特异性**:dNTPMix包含四种dNTPs(dATP、dCTP、dGTP、dTTP),每种对应DNA中的一个特定碱基。在DNA合成过程中,DNA聚合酶确保只有正确的互补dNTP与模板链上的碱基配对,这体现了碱基配对的特异性。2.**酶特异性**:某些DNA聚合酶具有校正(proofreading)功能,它们可以识别并修正配对错误,提高DNA合成的特异性。3.**应用特异性**:dNTPMix可以为特定的DNA合成应用提供所需的所有四种核苷酸,例如PCR、cDNA合成、DNA测序等。不同的应用可能需要特定的dNTP浓度或配方。4.**质量控制特异性**:dNTPMix在生产过程中会进行质量控制,以确保没有杂质、DNase和RNase污染,保证产品在实验中的特异性表现。5.**稳定性和纯度特异性**:dNTPMix的稳定性和纯度(通常≥99%)对于实验的成功至关重要,高纯度的dNTPMix可以减少非特异性反应的发生。6.**反应条件特异性**:使用dNTPMix时,需要考虑反应条件的特异性,如Mg2+浓度、pH值、温度等,这些条件都会影响DNA合成的特异性。利用His标签通过亲和层析从细胞裂解物中纯化目标蛋白,然后可能通过离子交换层析、等方法进一步提纯。

BloodDirectPCRMasterMix(2×)适合血液样本的PCR扩增主要通过以下几个方面:1.**抗血液抑制剂能力**:该预混合溶液含有的DNA聚合酶和其他成分能够抵抗血液样本中的PCR抑制剂,如胆酸盐、血红素、蛋白质等。2.**优化的缓冲体系**:预混合溶液中的缓冲体系经过特别优化,以适应血液样本中的特定条件,包括pH、离子强度和Mg2+浓度,从而提高PCR扩增的效率和特异性。3.**高保真DNA聚合酶**:包含的DNA聚合酶具有高保真度,能够在复制DNA时减少错误,保证扩增结果的准确性。4.**快速扩增速度**:一些BloodDirectPCRMasterMix产品具有快速扩增的特点,可以缩短PCR实验的时间。5.**宽泛的GC含量适应性**:该产品可以用于扩增不同GC含量的基因,包括高GC和低GC区域,提高了PCR的适用性。6.**直接使用血液样本**:无需对血液样本进行DNA提取或纯化,可以直接将抗凝血样品或干血斑样品加入PCR反应中。7.**兼容性**:兼容多种抗凝剂,如EDTA、肝素或柠檬酸钠,适用于不同来源的血液样本。8.**简化的操作流程**:由于省去了DNA提取的步骤,BloodDirectPCRMasterMix简化了实验操作流程,减少了实验时间和潜在的污染风险。牛痘DNA拓扑异构酶I具有解超螺旋的活性,可以解开双链闭合环状DNA的超螺旋结构,便于后续的酶切反应。NLS-Cas9-BPNLS Nuclease
牛痘DNA拓扑异构酶I是TOPO克隆技术的关键组分,该技术允许快速、简便地将PCR产物克隆到质粒载体中。Recombinant Human IGF2R Domain 1-7 Protein,His-Avi Tag
5'DNA腺苷酰化试剂盒的适用性非常广,主要包括以下几个方面:1.**miRNA克隆**:该试剂盒可用于miRNA等3'端为羟基的RNA或单链DNA在克隆时,3'端添加接头的制备。2.**高通量测序建库**:在高通量测序中,该试剂盒可用于制备5'端腺苷酰化修饰的单链DNA,这些DNA可以用于测序文库的构建。3.**PCR检测**:在PCR检测中,该试剂盒可以帮助制备具有特定5'端修饰的DNA片段,以适应某些PCR应用的需求。4.**单链DNA或RNA的5'端腺苷酰化**:试剂盒可以催化5'端磷酸化的单链DNA或单链RNA转换成5'端腺苷酰化DNA或RNA,无论3'端是否进行了氨基化等封闭。5.**环状DNA生成**:在不存在ATP的条件下,5'DNA/RNAAdenylase可以催化5'端磷酸化的单链DNA生成环状DNA。6.**RNALigation**:该试剂盒包含的MthRNA连接酶,可以用于RNA的连接反应,尤其是在需要5'端腺苷酰化DNA作为连接接头时。7.**科研实验**:所有提到的产品信息都明确指出,5'DNA腺苷酰化试剂盒用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途。Recombinant Human IGF2R Domain 1-7 Protein,His-Avi Tag
重组人潜伏性TGF-β3蛋白(Recombinant Human Latent TGF-β3 Protein, His Tag)是一种重要的多功能细胞因子复合物,属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员。TGF-β3与TGF-β1、TGF-β2同属TGF-β亚型,广参与胚胎发育、组织修复、细胞分化及免疫调节等生理过程。潜伏性TGF-β3由成熟TGF-β3肽段与其潜伏相关肽(Latency-Associated Peptide, LAP)通过非共价键结合形成,是TGF-β3在体内的主要存在形式,能够维持其非活性状态,防止过早启动。该重组蛋白通常采用真核表达系统(如CHO细胞或HEK293细胞...