改良Frey氏培养基是一种专门用于支原体培养的培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-改良Frey氏培养基的基础配方包括氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钾、水解乳蛋白、酚红、硫酸镁、磷酸氢二钠、葡萄糖、酵母浸粉和醋酸铊。每升培养基中具体分量为氯化钠5.0克,氯化钾0.4克,磷酸二氢钾0.2克,水解乳蛋白5.0克,酚红0.1克,硫酸镁0.2克,磷酸氢二钠1.4克,葡萄糖10.0克,酵母浸粉25.0克,醋酸铊0.1克,pH值控制在7.7±0.1。2.**用途**:-主要用于培养滑液支原体及其他禽支原体。特别适合于滑液支原体的培养和检测。3.**pH值**:-改良Frey氏培养基的pH值在7.6~7.8之间,适合支原体的生长。4.**灵敏度和稳定性**:-改良Frey氏液体培养基为澄清、无杂质,呈玫瑰红色的液体;经灵敏度检验,液体培养基灵敏度菌达到10^-8及以上,且阴性对照无变色,证明该培养基灵敏度高。5.**使用方法**:-称取47.4克培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,116℃高压灭菌30分钟,冷至45℃左右时加入100ml无菌马血清、辅酶I0.1g、L-半胱氨酸0.1g、精氨酸0.4g和青霉素80万单位。6.**添加剂**:-可加入改良Frey添加剂,每支添加于1000ml改良Frey氏培养基中,以增强培养效果。甘油天门冬素琼脂培养皿包含L-天门冬酰胺、七水合硫酸锌、七水合硫酸亚铁、四水合氯化锰、磷酸氢二钾等。淋病奈瑟菌增菌培养基基础
除了Pachlewski固体培养基,常用的微生物培养基有多种,根据不同的分类标准,可以列举如下:1.**按成分分类**:-**天然培养基**:含有化学成分不完全明了的天然物质,如蛋白胨、牛肉膏等。-**合成培养基**:由已知化学成分的化学药品配制而成,适用于科学研究。2.**按形态分类**:-**液体培养基**:不加任何凝固剂,适用于微生物的生理、代谢研究。-**半固体培养基**:加入少量凝固剂,用于观察细菌的运动等。-**固体培养基**:加入足量的凝固剂,常用于微生物的分离、纯化。3.**按用途分类**:-**基础培养基**:提供微生物生长繁殖所需的基本营养物质,如蛋白胨水、肉汤培养基。-**营养培养基**:在基础培养基中添加特殊营养物质,如葡萄糖、血液等。-**增菌培养基**:为液体培养基,用于细菌的增菌培养。-**选择性培养基**:含有抑菌剂,有利于特定微生物的增殖或分离。-**鉴别培养基**:加入试剂或化学药品,通过培养后的变化区别不同类型的微生物。L型细菌高渗盐增菌培养基改良番茄汁琼脂培养皿的制备方法包括将干粉成分加入蒸馏水,加热溶解,校正pH值,然后进行高压灭菌。
哥伦比亚琼脂培养基(ColumbiaAgar)是一种常用的微生物学培养基,具有以下特点:1.**用途**:-主要用于梭菌的分离培养,特别是用于药品中梭菌的检测。2.**成分组成**:-培养基的主要成分包括酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、玉米淀粉、氯化钠和琼脂。这些成分提供碳氮源、维生素和生长因子,维持均衡的渗透压,并作为凝固剂。3.**添加剂**:-每瓶需配套添加硫酸庆大霉素,以抑制肠杆菌科和铜绿假单胞菌的生长。4.**pH值**:-培养基的pH值控制在7.3±0.2(25℃)。5.**配制方法**:-称取44g培养基粉末,加热溶解于1000ml纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃,加入硫酸庆大霉素20mg,混匀,倾入无菌平皿,备用。6.**培养条件**:-将培养基放置于30℃-35℃恒温培养箱中,进行厌氧培养48-72小时。7.**质控结果**:-接种质控菌株如生孢梭菌、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌,观察其生长情况和特征。生孢梭菌在该培养基上生长良好,形成无色菌落,而大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌则被抑制。8.**注意事项**:-培养基中含少量淀粉,若灭菌前未加热煮沸溶解,灭菌后冷却可能出现少量白色沉淀。
亚硫酸铋琼脂平板培养皿(BismuthSulfiteAgar,简称BSA)是一种用于选择性分离培养沙门氏菌的培养基,具有以下特点:1.**试验原理**:-亚硫酸铋琼脂培养基通过其成分抑制大肠杆菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌的生长,但对沙门氏菌的生长没有影响。沙门氏菌能利用葡萄糖,将亚硫酸盐还原成硫化物并与硫酸亚铁反应,使得菌落呈黑色,此外还可以将铋离子还原成金属铋,使菌落呈现金属光泽,从而使沙门氏菌得到分离。2.**培养基配方**:-培养基的主要成分包括蛋白胨、牛肉粉、葡萄糖、硫酸亚铁、亚硫酸铋、磷酸氢二钠、亮绿和琼脂。具体配方为每升含有蛋白胨10.0g、牛肉浸粉5.0g、葡萄糖5.0g、硫酸亚铁0.3g、磷酸氢二钠4.0g、琼脂15.0g、亚硫酸钠6.0g、柠檬酸铋铵2.0g、煌绿0.025g、纯化水1000mL,pH值为7.5±0.2。3.**使用方法**:-亚硫酸铋琼脂平板培养皿为即用型成品平板,拆包即可使用,注意无菌操作。培养基中的柠檬酸铋铵和亚硫酸钠反应生成不溶物,培养基呈浑浊状,有黑色沉淀,摇匀后倒平板使用即可。4.**储存条件与保质期**:-亚硫酸铋琼脂平板培养皿应储存在2~8℃,避光保存,有效期见包装。TBA培养基中添加的胆汁盐是其选择性培养特性的关键因素。胆汁盐对革兰氏阳性细菌具有抑制作用。
甘露醇氯化钠琼脂(MannitolSaltAgar,简称MSA)是一种用于分离和鉴定革兰氏阳性细菌特别是金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的选择性培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-甘露醇氯化钠琼脂的主要成分包括甘露醇、氯化钠、琼脂、酚红指示剂等。具体配方为每升培养基含有甘露醇10克、氯化钠75克、琼脂15克、酚红0.03克,pH值通常调至7.2-7.4。2.**高盐浓度**:-该培养基含有较高浓度的氯化钠(7.5-10%),这种高盐环境有助于抑制革兰氏阴性细菌和一些其他非耐盐细菌的生长,同时促进耐盐的革兰氏阳性细菌如金黄色葡萄球菌的生长。3.**pH值**:-甘露醇氯化钠琼脂的pH值通常在7.2-7.4之间,适合多数细菌的生长。4.**指示剂**:-培养基中添加的酚红指示剂可以显示细菌的代谢活动,帮助鉴别细菌。例如,某些细菌在发酵甘露醇时会产生酸性代谢产物,导致培养基颜色变化。5.**选择性**:-甘露醇氯化钠琼脂具有选择性,特别适合于金黄色葡萄球菌的分离和鉴定。金黄色葡萄球菌能够在高盐环境中生长,并利用甘露醇作为碳源,发酵产生酸,使培养基颜色变化。营养葡萄糖琼脂培养皿可以用于大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌等质控菌株的培养和观察 。SH培养基
亚硫酸铋琼脂平板培养皿因其高效性,在食品微生物检验中对沙门氏菌的检测具有重要应用价值。淋病奈瑟菌增菌培养基基础
在配制改良高氏二号培养基时,如果遇到成分沉淀问题,可以采取以下措施进行处理:1.**充分溶解**:确保所有成分在加入之前已经充分溶解。对于不易溶解的成分,如琼脂,需要在加热条件下不断搅拌直至完全溶解。2.**调整溶解顺序**:根据各成分的溶解特性,调整添加顺序。通常先溶解无机盐和维生素,再加入有机物质。3.**使用辅助溶剂**:对于某些难溶成分,可以考虑使用适当的溶剂或助溶剂来帮助溶解。4.**避免混合沉淀**:在混合不同成分时,要注意避免因成分相互作用而产生沉淀。例如,避免将钙盐和磷酸盐直接混合。5.**控制pH值**:pH值的变化可能会影响某些成分的溶解度,因此在调节pH值时要小心,确保在成分完全溶解后再进行。6.**分步灭菌**:如果培养基中某些成分不耐热,可以考虑分步灭菌。即先灭菌大部分成分,冷却后再添加不耐热的成分。7.**过滤**:如果沉淀物已经形成,可以通过过滤来去除。使用适当孔径的滤纸或滤网过滤培养基。8.**搅拌**:在溶解和加热过程中,持续搅拌可以减少沉淀的形成。9.**使用螯合剂**:对于易氧化的成分,如硫酸亚铁,可以使用螯合剂(如EDTA)来防止沉淀和氧化。淋病奈瑟菌增菌培养基基础