庆大霉素琼脂基础是一种用于微生物培养的培养基,其特点和应用如下:1.**用途**:主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养,符合GB标准。2.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉浸粉:3.0g/L-亚硫酸钠:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-蔗糖:10.0g/L-庆大霉素:250IU/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.3-8.7(25℃)3.**检验原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;-氯化钠维持均衡的渗透压;-蔗糖提供碳源;-亚硫酸钠可刺激弧菌生长;-枸橼酸钠、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH值可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;-琼脂是培养基的凝固剂。4.**配制方法**:-称取本品56.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,冷至50℃左右时,加入无菌1%亚碲酸钾溶液0.5ml,混匀,倾入无菌平皿,备用。-无需高压灭菌。5.**微生物质控结果**:-霍乱弧菌VBO:生长率PR≥0.7,淡灰色菌落。-大肠埃希氏菌ATCC25922:选择性G≤3,无生长。庆大霉素琼脂基础因其特定的成分和用途,在食品卫生检验、医药、水质检测等领域有着广泛的应用。TGC液体培养基需要进行高压灭菌,以确保无菌。常用的灭菌方法包括加热灭菌、过滤除菌、及化学试剂灭菌等。氯化钠营养琼脂预装培养皿
PALCAM琼脂基础是一种专门设计用于分离和培养单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。除了李斯特氏菌,它也可以用来分离其他类型的细菌,尽管其选择性成分主要针对李斯特氏菌。**特点**:1.**成分**:PALCAM琼脂基础包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七叶苷、柠檬酸铁铵、葡萄糖、氯化锂、琼脂和酚红等成分。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:氯化锂和抗生物质添加剂(如盐酸吖啶黄素、硫酸多粘菌素B和头孢他啶)能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌,特别是非李斯特氏菌的生长。4.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养。5.**结果观察**:李斯特氏菌在PALCAM琼脂上生长时,会水解七叶苷生成黑色的6,7-二羟基香豆素,形成灰绿色菌落,中心凹陷,周围有黑色环。尽管PALCAM琼脂基础主要用于李斯特氏菌的分离,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和肠球菌等,偶尔也能在该培养基上生长,利用甘露醇产酸使菌落和其周围的培养基呈黄色。
NGKG琼脂基础是一种用于食品中蜡样芽孢杆菌分离培养的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:NGKG琼脂基础的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化钠、甘氨酸、苯酚红和琼脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持渗透压;甘氨酸提供氮源;苯酚红作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。2.**pH调节**:NGKG琼脂基础的pH值通常调节在6.8±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加物**:在冷却至50℃左右时,需要加入20%卵黄液100mL(卵黄液制备:取无菌卵黄液20mL,生理盐水80mL,混匀)。卵黄液提供卵磷脂,产卵磷脂酶的细菌可水解卵磷脂,使其菌落周围形成一个白色的沉淀环。5.**抗生物质**:每200mL培养基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革兰氏阴性细菌生长。6.**用途**:NGKG琼脂基础主要用于食品中蜡样芽孢杆菌的分离培养。7.**培养特征**:在30℃±1℃需氧培养18-24小时后,典型的蜡样芽孢杆菌在NGKG琼脂基础上表现为浅红色菌落,边缘不规则,有卵磷脂沉淀环。8.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。
CIN-1培养基基础是一种用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌的选择性培养基。其配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、氯化钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、琼脂、Irgasan、中性红、结晶紫和氯化锶等成分,pH值约为7.5±0.1(25℃)。这种培养基通过其成分的选择性作用,可以有效地促进目标菌的生长,同时抑制其他非目标菌。**CIN-1培养基基础的用途**:主要用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌(GB标准)。**添加剂**:每瓶需配套添加CIN-1添加剂,每200mlCIN-1培养基基础添加1支HB0269-2。**配制方法**:称取58.0gCIN-1培养基基础,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,加入一支过滤除菌的CIN-1添加剂(含头孢菌素3mg,新生霉素0.5mg),混匀,倾入无菌平皿。**检验原理**:胰蛋白胨和酵母浸粉提供菌体生长所需要的氮源、碳源和微量元素;甘露醇作为可发酵碳源;氯化钠维持培养基体系渗透压;硫酸镁提供菌体生长的微量元素;去氧胆酸钠和结晶紫能够抑制革兰氏阳性菌;中性红作为酸碱指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。哥伦比亚肉汤能够支持包括细菌、酵母和霉菌在内的多种微生物的生长,尤其适合培养营养要求高的微生物。
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
通常将卵磷脂吐温80营养琼脂培养基的粉成分溶解于蒸馏水中,加热煮沸以完全溶解,然后高压蒸汽灭菌15分钟。氯化钠营养琼脂预装培养皿
肉浸液肉汤是一种基础的微生物培养基,其主要特点和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉汤主要由绞碎牛肉、氯化钠、蛋白胨和磷酸氢二钾组成,再加上一定量的蒸馏水。具体配比为:绞碎牛肉500g、氯化钠5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、蒸馏水1000mL。2.**制作方法**:首先将绞碎的去筋膜无油脂牛肉与蒸馏水混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量。然后加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30分钟。3.**用途**:肉浸液肉汤通常用于培养那些营养要求不是特别高的细菌,如溶血性链球菌及其他营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了细菌生长所需的氮源、维生素和生长因子。4.**培养特征**:在肉浸液肉汤中,细菌可以很好地生长,通常表现为肉汤混浊,这是由于细菌的代谢活动导致的。5.**储存**:肉浸液肉汤的脱水培养基应避光储存于25℃下阴凉干燥处,开过封的脱水培养基应盖紧瓶盖注意密封储存。氯化钠营养琼脂预装培养皿