15分钟。图4.扩展孵化（过夜）：SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5％NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒，标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，对于HRP偶联的二抗山羊抗兔（AP132P），将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后，将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化（1小时）：，SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免上海益启生物超滤杯订购方便。普陀区Merck细胞跨膜电阻仪Merck仪器咨询问价
白的免疫检测：SNAP i.d.“ 2.0系统与SNAP 1.d.系统（首先代）与标准免疫检测一种。 SNAPi.d。 2.0蛋白质检测b。快照蛋白质检测。标准系统Midi印迹系统首先代，单孔免疫检测对照，茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液（10-0.63 ug）被转移到Immobilon9-P膜上。印迹被阻止含0.5％的非脂肪干mik（NFDM），并在加筋的盐水中制备含0. 1％Tweene 20表面活性剂（TBST），并用主要抗B-Tubulin探测（MAB3408）和次级HRP偶联的山羊蚂蚁（AP1 24P）在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。图2. erbB2的免疫检测：SNAP i.d.9 2.0系统与SNAP i.d.系统（首先代）与标准免疫检测s。 S普陀区Merck细胞跨膜电阻仪Merck仪器咨询问价益启生物提供专业的细胞计数器。
关闭真空。同样，溶液将被吸收到印迹架中，并且表面可能看起来干燥。重要提示：孵育10分钟后，再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟，直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液（对于MultiBlot为15 mL）。重复洗涤步骤3次（共3次）4次洗涤）。12.关闭真空，然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点，并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白，则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育：一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL（对于MultiBlot），5 mL（对于Mini blot）或10 mL（对于Midi blot）1X一抗（浓缩液）通常在标准免疫检测过程中使用）。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话，将其从底座
用SNAP i.d.o 2.0系统 系统设置 1.将SNAP i.d.9 2.0底座放在水平工作台上。2.通过推动管道末端的联接插件，将真空管道连接至系统背面。插入系统基座背面的快速断开接头，直至其滑动。注意：要断开管路连接，请用食指将管路连接器下方的卡舌向上推，然后将其拉出。管出来。3.将管道的另一端连接到真空源。使用一升的真空烧瓶作为疏水阀和一个Millex-FA。过滤器（目录号SLFA05010）可保护真空源不受污染，如下所示。注意：任何可以产生410毫巴（12 inHg）和34 L / min的真空源就足够了。如果是真空如果源的工作温度高于410毫巴，则SNAP i.d.2.0系统将自动调节真空度压力。如果真空源不足，则流经系统的流量可能会不一致，从而导致更长的时间。处理时间和/或抗上海益启生物的细胞计数器询价公司电话。
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