尿素培养基是一种用于检测细菌是否具有尿素酶活性的微生物培养基。其特点主要包括:1.**成分**:尿素培养基的主要成分包括蛋白胨、氯化钠、磷酸二氢钾、尿素、葡萄糖、酚红指示剂和琼脂等。蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾作为缓冲剂;尿素作为底物检测细菌是否具有尿素酶活性;酚红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保证微生物的生长环境和酶活性的发挥。3.**尿素酶检测**:某些细菌能产生尿素酶,将尿素分解产生氨,使培养基变为碱性,酚红指示剂在pH升高时变色(通常为粉红色),通过观察颜色变化来判断细菌是否具有尿素酶活性。4.**配制方法**:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装。高压灭菌后,冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液,pH应为7.2±0.1。分装于灭菌试管内,放成斜面备用。5.**应用**:尿素培养基主要用于鉴定革兰氏阴性菌中的尿素酶活性,如用于肠杆菌科细菌的鉴定,例如大肠埃希菌和奇异变形杆菌等细菌具有尿素酶活性,而鲍曼不动杆菌则不具备尿素酶活性。VP半固体琼脂(Voges-Proskauer Semisolid Agar)是一种生化培养基,主要用于细菌的V-P试验。综合马铃薯液体培养基
DRBC培养基(Dichloran-RoseBengalChloramphenicolAgar)是一种用于酵母和霉菌分离培养的培养基。它特别适用于食品中霉菌和酵母菌的计数和分离。**DRBC培养基的基本成分**包括:-酶水解动植物组织:5.0g/L-葡萄糖:10.0g/L-磷酸二氢钾:1.0g/L-硫酸镁:0.5g/L-氯硝铵:0.002g/L-虎红钠盐:0.025g/L-氯霉素:0.1g/L-琼脂:15.0g/L**pH值**通常控制在5.6±0.2(25℃)。**配制方法**一般是:1.称取31.6克DRBC培养基干粉。2.加入1升蒸馏水或纯化水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.121℃高压灭菌15分钟后备用。**使用方法**:-将灭菌后的培养基冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中。-接种样品后,在25±1℃下进行培养。**培养结果**:-酵母菌和霉菌在DRBC培养基上会形成粉红色的菌落。-大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等细菌在该培养基上会被抑制。**储存条件**:-应在避光、干燥处储存。-保质期通常为三年。**质量控制**:-酿酒酵母ATCC9763在DRBC培养基上生长良好,形成粉红色菌落。-大肠埃希氏菌ATCC25922和枯草芽孢杆菌ATCC6633在该培养基上应被抑制。DRBC培养基是按照ISO21527-1标准生产的,适用于食品和动物饲料中酵母和霉菌的计数。碱性蛋白胨水(APW)在VRBA培养基上,大肠杆菌菌落为带有沉淀环的紫红色或红色,而其他非目标菌则可能呈现不同的颜色和形态 。
LG培养基(LindenGrainMedium)是一种用于微生物检测的培养基,其特点和用途如下:1.**用途**:LG培养基主要用于霉菌、酵母菌、耐热霉菌及细菌总数的检测,也可用于PET瓶及无菌罐装生产线的无菌验证。2.**成分**:LG培养基的主要成分包括胰蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、硫酸铵、磷酸二氢钾和硫酸镁。3.**实验原理**:在LG培养基中,胨提供碳源和氮源;酵母浸出粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;磷酸氢二钾作为缓冲剂;硫酸镁提供必需的微量元素;硫酸铵可维持均衡的渗透压及利于目标菌的生长。4.**pH值**:培养基的pH值通常控制在6.5-6.8之间。5.**制备方法**:称取29.5g的LG培养基,加入1L的蒸馏水或去离子水中,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管或三角瓶,121℃灭菌15分钟。注意,培养基中含少量硫酸镁,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**:接种质控菌株后,放置36±1℃需氧培养18-24小时,菌于28~32℃培养3-5天。例如,金黄色葡萄球菌ATCC6538、铜绿假单胞菌ATCC9027、枯草芽孢杆菌ATCC6633、白色念珠菌CMCC98001、酵母菌CMCC98007和黑曲霉菌CMCC98003在该培养基上应有良好的生长情况。
Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。LB琼脂平板在细菌的分离、鉴定、计数以及遗传工程实验中都有广泛的应用。
肠球菌肉汤(EnterococcusBroth)是一种专门用于增菌培养肠球菌的微生物培养基。它的特点和应用如下:1.**成分**:肠球菌肉汤的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛胆粉、氯化钠、柠檬酸钠、七叶苷、柠檬酸铁铵和叠氮化钠等。这些成分为肠球菌提供氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压和提供选择性抑制其他非目标菌种的环境。2.**选择性**:牛胆粉和叠氮化钠作为选择性抑菌剂,有助于抑制非链球菌的细菌生长,特别是对革兰氏阴性细菌有抑制作用。3.**应用**:该培养基主要用于食品和水中肠球菌的鉴别培养,如GB/T5750.12-2023生活饮用水标准中提到的应用。4.**制备方法**:通常将肠球菌肉汤的粉末配方溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在36±0.5℃培养24小时后,可以观察到特定菌株的生长情况。例如,粪链球菌(CMCC(B)32223)在肠球菌肉汤中生长良好,呈现棕黑色,并具有棕色晕轮,而金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)则被抑制,不生长或生长很差。在细菌生化反应试验中,TSI 培养基为研究细菌的代谢途径和生理特性提供支持。胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础
去氧胆酸钠的存在使得DC培养基对革兰氏阳性菌具有抑制作用,而对大肠菌群等革兰氏阴性菌则相对促进其生长。综合马铃薯液体培养基
霉菌分离培养基的pH值对霉菌的生长有影响。不同的霉菌种类对pH值的适应性各有差异,大多数霉菌可以在pH值4.5—5.5范围内生长良好。例如,黑曲霉在pH值为8.0时生长状况比较好,形成的菌丝球直径较大且均匀。而当pH值偏离这个范围时,霉菌的生长可能会受到抑制。pH值会影响细胞质膜的稳定性和透性以及营养物质的溶解性,进而影响霉菌对营养物质的吸收,同时pH值还会影响霉菌体内酶促反应的速率。因此,培养基的pH值对霉菌的生长速率、菌落形态和孢子形成等都有重要作用。在实际应用中,通过调整培养基的pH值可以优化霉菌的生长条件,也可以用于选择性地分离特定的霉菌种类。在实验室中,可以通过配制不同pH值的培养基来培养不同的霉菌或选择性地分离某种霉菌。例如,通过调整pH值可以抑制某些竞争性微生物的生长,从而促进目标霉菌的生长。此外,了解霉菌对pH值的适应性也有助于控制霉菌的生长,防止其在食品和其他行业中造成问题。综合马铃薯液体培养基