TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
肉浸液肉汤是一种基础的微生物培养基,其主要特点和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉汤主要由绞碎牛肉、氯化钠、蛋白胨和磷酸氢二钾组成,再加上一定量的蒸馏水。具体配比为:绞碎牛肉500g、氯化钠5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、蒸馏水1000mL。2.**制作方法**:首先将绞碎的去筋膜无油脂牛肉与蒸馏水混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量。然后加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30分钟。3.**用途**:肉浸液肉汤通常用于培养那些营养要求不是特别高的细菌,如溶血性链球菌及其他营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了细菌生长所需的氮源、维生素和生长因子。4.**培养特征**:在肉浸液肉汤中,细菌可以很好地生长,通常表现为肉汤混浊,这是由于细菌的代谢活动导致的。5.**储存**:肉浸液肉汤的脱水培养基应避光储存于25℃下阴凉干燥处,开过封的脱水培养基应盖紧瓶盖注意密封储存。酵母粉琼脂预装培养皿血液增菌培养基含有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化钠、葡萄糖、枸橼酸钠、对氨基苯甲酸、硫酸镁、酚红等成分。
SlantzandBartley培养基是一种专门设计用于分离和计数肠球菌的选择性培养基,广泛应用于水和食品样本中的肠球菌检测。以下是它的一些特点:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、磷酸二氢钾、叠氮钠和琼脂等成分。其中,胰蛋白胨和酵母提取物提供细菌生长所需的营养物质,葡萄糖作为碳源,磷酸二氢钾作为缓冲剂,叠氮钠作为抑菌剂抑制革兰氏阴性菌的生长,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25°C),为肠球菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:叠氮钠对革兰氏阴性菌具有抑制作用,确保培养基的选择性。4.**应用**:开始设计用于通过膜过滤技术检测和计数肠球菌,但也证明作为直接涂布培养基同样有效。5.**配制方法**:通常称取41.5g培养基粉末,加入1升蒸馏水,加热至沸腾以溶解琼脂,高压灭菌20分钟。灭菌后冷却至45-50°C,并分装进培养皿。6.**质量控制**:通过特定的质控菌株进行测试,确保培养基支持目标菌株的生长。例如,肠球菌ATCC29212在该培养基上应表现出良好的生长,而大肠杆菌ATCC25922则应被抑制。7.**储存条件**:未配制的培养基粉末应密封保存在15-30°C的阴凉干燥处。配制好的培养基应保存在2-8°C。
叠氮钠血琼脂基础(AzideBloodAgarBase)是一种选择性培养基,主要用于从粪便、污水和其他样本中分离和检测链球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特点和配制方法:**特点**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化钠、叠氮钠和琼脂等成分,其中叠氮钠作为选择性抑制剂,对大多数革兰氏阴性菌具有抑制作用,但允许某些革兰氏阳性菌如链球菌和葡萄球菌的生长。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**应用**:除了用于分离培养链球菌和葡萄球菌,叠氮钠血琼脂基础还可用于测定溶血反应。4.**溶血反应**:在该培养基上,可以观察到α溶血(培养基变绿)、β溶血(菌落周围培养基变透明)和γ溶血(培养基无变化)。**配制方法**:1.称取33.2g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水中。2.加热煮沸至完全溶解。3.121℃高压灭菌15分钟。4.冷却至50℃左右,加入50mL无菌羊血,混匀后倒入无菌培养皿中。**注意事项**:-避免摄入、吸入、皮肤接触叠氮钠,配制时应在通风橱中进行,并佩戴适当的个人防护装备。-培养基中含有的叠氮钠具有剧毒,应妥善处理和保存。巴氏芽孢杆菌的芽孢形成需要特定的培养条件,包括营养和环境因素。例如,使用改良的Schaeffer培养基。
半固体储存培养基是一种在微生物学研究和细胞培养领域中扮演重要角色的培养基。它主要用于观察微生物的动力、菌种的保藏与运输、厌氧菌的培养、菌种鉴定、细胞培养、噬菌体效价测定以及微生物趋化性研究等。半固体培养基通常由液体培养基加入少量凝固剂制成,例如琼脂的用量在0.2~0.7%之间。在具体应用上,半固体培养基可以用于以下方面:1.**微生物动力观察**:通过推测细菌是否有鞭毛来进行鉴定。2.**菌种保藏与运输**:便于菌种的短时间保存和长途运输。3.**厌氧菌培养**:适用于厌氧菌的培养,对于研究厌氧微生物的生长和代谢至关重要。4.**菌种鉴定**:通过观察菌落的形态和生长特性来区分不同的微生物种类。5.**细胞培养**:在细胞生物学领域,半固体培养基广泛应用于干细胞、细胞克隆、细胞表达和细胞毒性等实验。6.**噬菌体效价测定**:用于双层平板法测定噬菌体的效价,是研究病毒与宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趋化性研究**:帮助研究微生物的趋化性,即微生物对化学物质的定向移动反应。通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、普通变形杆菌和鼠伤寒沙门氏菌等,培养后观察菌落生长。DNA酶试验琼脂培养皿
木糖明胶培养基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸粉、明胶、木糖、磷酸氢二钠和酚红等。酵母粉琼脂预装培养皿
氧化三甲胺(TMAO)培养基是一种专门用于培养和研究某些特定微生物的培养基,尤其是在厌氧菌和一些具有特定代谢途径的细菌的研究中。以下是TMAO培养基的一些特点:1.**促进特定微生物生长**:TMAO培养基含有氧化三甲胺作为关键成分,能够刺激某些厌氧菌的生长速率和产量,如在胰蛋白胨/酵母提取物培养基中加入TMAO,可以促进葡萄糖的摩尔生长产量翻倍。2.**作为末端电子受体**:TMAO在厌氧菌的代谢过程中充当末端电子受体,促进非氧化菌在无氧条件下的生长。3.**微生物代谢研究**:TMAO培养基用于研究微生物如何将TMAO分解为三甲胺(TMA),这一过程对理解微生物的代谢途径至关重要。4.**影响培养基理化性质**:微生物在TMAO培养基中的生长可以影响培养基的电导率和pH值,这些变化可以用于监测微生物的代谢活动。5.**与心血管疾病相关**:TMAO和其前体物质TMA在心血管疾病中的作用引起了关注,TMAO培养基有助于研究这些代谢物在疾病发展中的作用。6.**微生物群落影响**:TMAO的代谢与肠道微生物群落的组成和功能密切相关,TMAO培养基可以用于研究肠道微生物如何影响宿主的代谢和健康。酵母粉琼脂预装培养皿