改良McBride琼脂基础(MMA)是一种用于微生物学研究和诊断的培养基,它具有一些特定的特点和用途:1.**选择性分离培养基**:改良McBride琼脂基础(MMA)主要用于李斯特氏菌的选择性分离。它通过添加特定的抗生物质或化学物质,抑制其他非目标微生物的生长,从而促进目标微生物——在这种情况下是李斯特氏菌的生长。2.**配方成分**:该培养基的配方包括酪胨、多价胨、牛肉浸粉、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、甘氨酸、氯化锂和琼脂等。这些成分为微生物提供了生长所需的营养物质和环境。3.**pH值**:改良McBride琼脂基础(MMA)的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃),这为李斯特氏菌的生长提供了适宜的酸碱环境。4.**添加物**:在使用时,每升培养基中需添加2.5g苯乙醇以及200mg环乙酰亚胺或30mg复达欣,这些添加物有助于抑制其他微生物的生长,提高李斯特氏菌分离的选择性。5.**高压灭菌**:在制备过程中,需要将培养基加热至完全溶解,然后进行121℃高压灭菌15分钟,以确保培养基的无菌性。6.**冷却和添加抗生物质**:灭菌后,培养基需要冷却至50℃,然后在无菌环境下加入抗生物质,备用。
TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
改良R2A琼脂(ModifiedR2Amedium)是一种应用的低营养培养基,用于微生物的分离、计数和鉴定,特别是在水质检测中用于测定细菌总数。以下是改良R2A琼脂的一些关键特点和配制方法:1.**成分**:-酵母浸出粉-蛋白胨-酪蛋白水解物-葡萄糖-可溶性淀粉-磷酸氢二钾-无水硫酸镁-酸钠-琼脂2.**pH值**:通常调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:-主要用于纯化水中菌落总数的测定。-适用于EP(欧洲药典)、USP(美国药典)、ChP(中国药典)标准。4.**配制方法**:-称取适量的培养基粉末,加入到蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-调节pH值至适宜范围。-进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟。5.**保存条件**:通常在2-8°C下保存。6.**注意事项**:-在称量和操作过程中应注意无菌操作,避免微生物污染。-使用后应立即旋紧瓶盖,防止吸潮。7.**应用**:-在微生物学研究、医学诊断、食品检测和环境保护等领域有广的应用。8.**质控结果**:质控菌株接种后于30-35℃需氧培养48-120小时,用于评估培养基的性能。改良R2A琼脂因其营养丰富、操作简便和应用广,成为实验室中常用的培养基之一。
克罗诺杆菌筛选肉汤(CronobacterScreeningBroth,简称CSB培养基)是一种用于检测环境和食品中克罗诺杆菌的选择性培养基。克罗诺杆菌是一种重要的食源性的病原体,能够引起新生儿和婴儿的严重疾病,如坏死性小肠结肠炎、败血症和脑膜炎。以下是克罗诺杆菌筛选肉汤的一些特点和配制方法:1.**配方**:-蛋白胨:10.0g-牛肉浸粉:3.0g-氯化钠:5.0g-溴甲酚紫:0.004g-蔗糖:10.0g-万古霉素:0.01g-pH:7.4+/-0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取28gCSB培养基粉末,用1000ml去离子水重悬。-在121°C下灭菌15分钟。-冷却至大约50°C时,加入万古霉素(每100ml培养基中加入1mg万古霉素)。-混匀后分装到无菌容器中。3.**工作原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源。-氯化钠维持渗透压平衡。-蔗糖作为克罗诺杆菌可发酵的糖类。-溴甲酚紫作为pH指示剂,其变色范围为pH5.2(黄色)至pH6.8(紫色)。-发酵蔗糖产酸,使得培养基的pH下降,溴甲酚紫由紫色变为黄色。4.**用途**:-CSB培养基用于检测环境和食品中的克罗诺杆菌。木醋杆菌的生长和纤维素的合成对pH值有一定的要求,通常在pH 5.0至6.8之间。
PALCAM琼脂基础(PalcamAgarBase)是一种用于分离单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的特点如下:1.**成分**:PALCAM琼脂基础包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化钠、葡萄糖、甘露醇、柠檬酸铁铵、七叶苷、氯化锂、酚红和琼脂等成分。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为李斯特氏菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:氯化锂和抗生物质添加剂(如盐酸吖啶黄素、硫酸多粘菌素B和头孢他啶)能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌,从而提高对李斯特氏菌的选择性。4.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养。5.**配制方法**:通常称取71.9g培养基粉末,加入1升蒸馏水,加热至完全溶解,分装后进行高压灭菌。使用时,冷却至50℃,加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌培养皿。6.**结果观察**:李斯特氏菌在PALCAM琼脂上生长时,会水解七叶苷生成黑色的6,7-二羟基香豆素,形成灰绿色菌落,中心凹陷,周围有黑色环。
低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。DNA酶试验琼脂预装培养皿
尿素培养基是一种用于检测和分离细菌的生化培养基,特别是那些能够产生脲酶的细菌,如某些变形杆菌和幽门螺旋杆菌。以下是尿素培养基的一些特点和配制方法:1.**配方组成**:-蛋白胨:1.0g-氯化钠:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氢钾:2.0g-酚红:0.012g-琼脂:20.0g-蒸馏水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-将上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸馏水中,加热煮沸,调节pH至7.2,过滤。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至50-55℃,加入无菌的40%尿素水5ml,混匀。-分装试管,制成斜面备用。3.**用途**:-主要用于细菌的脲酶检测。-用于鉴定变形杆菌属和其他能够分解尿素的细菌。4.**培养条件**:-通常在36℃±1℃的条件下培养24-48小时。5.**观察指标**:-培养基中的酚红作为pH指示剂,当细菌产生的脲酶分解尿素产生氨时,培养基颜色由黄色变为红色,表示细菌具有脲酶活性。6.**保存条件**:-通常在2-8°C下保存,保质期三年。7.**注意事项**:-避免摄入、吸入、皮肤接触。-配制过程中应在无菌条件下操作。尿素培养基在微生物学研究和医学诊断中有着广泛的应用,尤其是在检测和研究能够分解尿素的细菌方面。DNA酶试验琼脂预装培养皿