utiBlot框架用于在MultiBlot框架中进行单点印迹时,放置正确处理一次印迹,然后空白卡在空井。未放入空白卡空井清洁不足确保框架**的所有系统垫片和阀门均处于院长,无碎屑或盐分。清空真空瓶,然后更换串联的Milx9-FA过滤器。可能由于以下原因堵塞了吸盘座:浓度在补充有缓冲剂的缓冲液中使用0.2-0.5%的干奶脱脂/低脂干0.1%Tweens 20表面活性剂,带有新的污点固定器。牛奶太高不兼容的封闭液使用新的吸盘固定器更换为强力封闭液。吸墨纸架的重复使用吸笔座只供一次性使用。请勿重复使用。低信号或低信号初级和/或次级将抗体浓度增加5到8倍。比标准抗体浓度过低免疫检测上下颠倒标记印迹的蛋白质一侧,并确保该污点检测试剂不敏感更换灵敏度更高的检测试剂,例如足够的Luminata用Forte上海益启生物的细胞跨膜电阻仪询价公司电话。杨浦区MerckWB实验加速器Merck仪器规格
x @ -FAgo过滤器(或等效过滤器)建议在保温瓶和真空源之间使用,例如o保护真空源免受污染。●将真空瓶连接到真空源的真空管●前肢●封闭剂,例如脱脂/低脂干奶(0.5%以下),酪蛋白,牛血清白蛋白(BSA)或其他市售的封闭剂,例如blok * -CH缓冲液(请参阅表5)抗体(单克隆和/或多克隆),检测试剂●洗涤缓冲液:Tris或磷酸盐缓冲盐溶液,pH 7.4,补充了Tween @ 20表面活性剂(TBST)或PBST)●转移蛋白的印迹吸笔座尺寸比较大印迹尺寸(厘米)多印迹4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5。 一般准则●如果蛋白质已经转移到已经干燥的PVDF膜上,请用100%重新润湿印迹甲醇,然后在组装前用蒸馏水冲洗。如果蛋白质已转移至硝酸纤维素膜干燥后,用蒸馏水重新嘉定区Merck细胞分析仪Merck仪器订购买细胞计数器就找益启生物。
体回收率差。 印迹大会和总议定书 1.用支撑层(蓝色边缘)握住吸墨纸托并弄湿膜层(白色)在润湿过程中溢出水提供的托盘。不要弄湿支撑层。放置湿的滚动板上的污点固定器。2.如果需要,将印迹预先在甲醇和水中浸湿,然后将其放置在印迹支架中心,蛋白质面朝下。注意:印迹不得超过材料中指定的尺寸必填部分。3.轻轻滚动印迹以去除气泡,然后稀释印迹保持并滚动一次。4.打开吸墨纸固定框架,用力将吸墨纸固定在蛋白质面朝上,然后将其放入框架中。一个缺口吸墨架可确保正确放置在框架中。注意:如果只在框架中运行一个MultiBlot,请放置孔空白卡在第二口井中。5.关闭并锁定框架。加入30 mL封闭溶液(MultiBlot为15毫升)。向下按框架并转动系统旋钮施加真空。当框架完全为空时,关闭真空。注意:如果使用抗体回收托
用SNAP i.d.o 2.0系统 系统设置 1.将SNAP i.d.9 2.0底座放在水平工作台上。2.通过推动管道末端的联接插件,将真空管道连接至系统背面。插入系统基座背面的快速断开接头,直至其滑动。注意:要断开管路连接,请用食指将管路连接器下方的卡舌向上推,然后将其拉出。管出来。3.将管道的另一端连接到真空源。使用一升的真空烧瓶作为疏水阀和一个Millex-FA。过滤器(目录号SLFA05010)可保护真空源不受污染,如下所示。注意:任何可以产生410毫巴(12 inHg)和34 L / min的真空源就足够了。如果是真空如果源的工作温度高于410毫巴,则SNAP i.d.2.0系统将自动调节真空度压力。如果真空源不足,则流经系统的流量可能会不一致,从而导致更长的时间。处理时间和/或抗上海益启生物的联系电话。
向。松开框架,并同时使用双手,像书一样打开它,同时轻轻地将左半部分向下推,右半部分向上推。当框架是几乎完全打开,两半将滑开。注意不要丢掉位于其中一个的小O形圈中心销的位置。 。要重新组装框架,请按照与上述相反的步骤进行操作。可能需要更多的力才能使两者接合由于O形圈已被压缩,因此可将其减半。注意:此0环的目的是在将印迹放入框架中时保持框架盖处于打开状态。这框架没有0环就可以正常工作。组件重用吸盘支架和抗体夹盘只一次性使用。重复使用会增加污点固定器堵塞的风险印迹中信号不均匀,以及样品交叉污染。请参阅适用的国际,联邦,州和地方法规,以进行适当处置。 故障排除症状原因纠正措施真空控制旋钮棒_清洁不足用洒水冲洗系统。吸盘座不能倒空真空度不足确保系统和真空之间的管道连接或何时缓慢排空来源是安全的。真空M上海益启生物超滤杯订购方便。金山区MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck仪器咨询报价
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润湿印迹。,对于大多数应用和大多数抗体而言,0.5%的脱脂/低脂干奶溶液可以提供足够的膜的阻塞。注意:请勿使用浓度高于0. 5%的干奶,因为它可能会导致吸墨纸架堵塞膜。如果使用其他封闭溶液,请参阅表5了解兼容性和推荐浓度。●在洗涤,封闭和抗体缓冲液中始终使用0.1%Tween8 20表面活性剂。这将减少溶液的表面张力,并确保孵育过程中抗体在印迹支架中的均匀分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系统中的免疫检测时间很短,因此建议在开始操作之前应准备一抗和二抗稀释液。●MultiBlot固定器所需的稀释抗体的总体积为2.5 mL,Mini blot固定器为5 mL,10 mL用于Midi印迹固定器。,每次需要洗30次(MultiBlot为15毫升),以确保每次洗完后都能完全清洗印迹孵化步骤。杨浦区MerckWB实验加速器Merck仪器规格