对于探索性研究，Western blotting仍是优先平台，是用于评估新抗体和其它蛋白检测分析 法（如ELISA、基于微珠的分析法、流式细胞术和免疫组织化学）的标准。新技术的开发**减少Western blotting过程需要的时间（例如默克密理博的 SNAP i.d.® 2.0系统，目录编 号SNAP2MM），提高了WB实验的效率。 Western blotting的基本程序涉及下述关键步骤 样本制备 凝胶电泳 转膜 封闭非特异性结合 加入抗体 检测 Western Blot 实验流程图 Troubleshooting 问题 可能的原因 处理方法 Abcam抗体的报价具体是多少呢?闵行区鉴定抗体抗体订购
流式细胞术前沿
过去10年已见证了微毛细管流式细胞术的***应用;相较于基于鞘液的传统流式经脆分析仪，它使用更小的样品体积和更少的试剂，产生更少的废弃物，具有更任的操作成本。流式细胞术还被进一步微型化为超紧凑的个人型流式细胞分析仪。综上所述，在基于细胞的大多数分析中，这些个人型*器使流式细胞术转化为几乎常规的步骤。成像流式细胞术将流式细脆术的统计功效和高适量与免疫细胞化学和操检的可视化能力结合了起来。与到目前为止引入的任何单项技术进行比较，这种结合可以从单独一份细胞样品获得更***的蛋白定位和分布数据集。 黄浦区Upstate抗体抗体商家益启生物是Merck抗体的代理商。
问题 可能的原因 处理方法 印迹上出现条纹 在凝胶的蛋白负荷过量。 准确测量蛋白浓度，载入较少的蛋白。 印迹有污染或模糊 凝胶平衡不当，或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。 采用丽春红S染色时， 转膜无效 转膜时，小心除去气泡。 印迹染色较差 确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形 采用丽春红S染色时， 在转膜过程中蛋白没有转移 检查设备（转膜盒、盒盖、电源）。 印迹没有染色 检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是 确保膜位于凝胶的右侧。 否正确
免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP)) 免疫沉淀是很有价值的研究工具，目的是研究某一特定蛋白的关键信息，包括：小规模蛋白纯化用于功能研究，N-端序列分析，蛋白-蛋白相互作用的研究，细胞或组织中蛋白相对丰度和分布的测定。免疫沉淀分析法的成功取决于两个主要因素：原始样品中抗原的丰度和抗体对该抗原的亲和力(一般需要108 M-1或以上的亲和力)。在开始免疫沉淀之前，确保特定的步骤有适当的实验对照。对照抗体在性质上尽可能与该特异性抗体类似。益启生物公司带您了解抗体详情。
关于抗体质量 抗体的质量决定了整个免疫检测的成败， 是在选择抗体时优先的考虑因素。 通常认为，特异性决定抗体功能，所以抗体必须拥有高质量，尤其是商业化的抗体。然而出人意料的是，通常情况并非如此。尽管理论上确实可以模拟和预测抗体结合的特异性，但是数十年的使用经验证明，一些因素如免疫原的抗原性和***性、抗体浓度、缓冲液、免疫作用和样品制备等因素都会对交叉反应和非特异性结合起到***的促进作用。 自70年代以来，当研究人员开始将抗体用作蛋白探针时，抗体性能不一致的问题一直困扰着他们。上海益启生物抗体订购方便。黄浦区Upstate抗体抗体商家
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无信号 在检测之前，转印膜在贮藏过程中发 生蛋白降解 二抗选择错误 曝光时间太短 抗原上样量不足 抗原可能被破坏 检测系统 一抗的亲和力较低 化学发光底物已丧失活性。 已从膜上剥离抗体并再次杂交。 处理方法 使用新转的膜进行实验。 检查是否使用适当的二抗。 增加曝光时间。 在凝胶上载入更多的抗原，或在载入之前使用超滤管浓缩样品， 或使用免疫沉淀，以增加凝胶中的目标蛋白量。 检查确保电泳处理未破坏抗原性。 增加（和优化）一抗的浓度和培养时间、温度。闵行区鉴定抗体抗体订购
