Recombinant Cynomolgus MSLN/Mesothelin Protein

T5核酸外切酶（T5Exonuclease）具有以下特点和技术应用：1.**降解方向**：T5核酸外切酶按照5'→3'方向降解双链或单链DNA。2.**起始消化位置**：T5核酸外切酶既能从单链或双链DNA的5'末端起始消化，也可以从线性或环状双链DNA的缺口(gap)或缺刻(nick)处起始消化。3.**对超螺旋双链DNA的作用**：T5核酸外切酶无法降解超螺旋双链DNA。4.**单链DNA核酸内切酶活性**：T5核酸外切酶还具有单链DNA核酸内切酶活性。5.**应用领域**：-用于Gibson组装，这是一种在恒温条件下有效连接带有多个重叠序列片段的技术。-从完全连接的环状双链DNA中去除不完全连接产物。-降解碱裂解质粒提取方法中产生的变性DNA，增加超螺旋DNA比例，提高DNA克隆和转染效率。-降解质粒样品中污染的线性化和切刻DNA。6.**操作条件**：推荐在37℃温育30分钟，之后加入EDTA至终浓度为20mM终止反应。7.**储存条件**：-25～-15℃保存，有效期3年。8.**注意事项**：避免起泡或剧烈搅拌、涡旋等操作，以防止本品失活。这些特点和技术应用使得T5核酸外切酶在分子生物学实验中，尤其是在DNA克隆和基因片段组装中，具有重要的应用价值。在50 μL的反应体系中，建议使用1.5 μL的5× PCR Enhancer（如果需要）和0.5 μL的Phusion DNA Polymerase。Recombinant Cynomolgus MSLN/Mesothelin Protein,hFc Tag

Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一种从嗜热脂肪芽孢杆菌（Thermophilic Geobacillus sp）DNA聚合酶I衍生的酶，缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是关于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些关键信息：来源和特性：Bst Plus DNA Polymerase 具有更强的5'-3' DNA聚合酶活性、链置换活性和dUTP耐受性，适合用于抗污染的等温扩增反应，如LAMP和CPA等。应用：主要应用于等温DNA扩增，包括环介导等温扩增（LAMP）和其他等温扩增技术。规格：活性定义：1 U指的是在65°C下30分钟内将10 nmol的dNTP整合到酸不溶物质中的酶的量。溶液成分：包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油，pH 7.5 @ 25℃。产品形式：提供的产品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)，货号14402ES，以及冻干粉形式的产品，货号14405ES，不含甘油。灵敏度和稳定性：Bst Plus DNA Polymerase 具有高灵敏度，低至5copies目的基因可测，且在飞克（fg）级别的模板量下也能快速达到阈值。在37°C下，该酶可以保持相对稳定的效应长达5天，并且在-20℃下可以稳定保存2年。储存条件：建议在-25℃至-15℃下储存，以保持产品活性，并避免反复冻融。Recombinant Mouse NKG2D/CD314 Protein,hFc Tag牛痘DNA拓扑异构酶I是一种来源于牛痘病毒的酶，有多种作用于DNA分子的能力。

蛋白A-微球菌核酸酶（pA-MNase）是一种特殊的融合蛋白，它结合了蛋白A和微球菌核酸酶（MNase，MicrococcalNuclease）的特性。以下是pA-MNase的一些关键特点和应用：1.**融合表达产物**：pA-MNase是蛋白A与微球菌核酸酶MNase的融合表达产物，因此它同时具有ProteinA的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性。2.**双重功能**：由于其双重功能，pA-MNase常用于蛋白质-DNA相互作用研究，特别是在ChIC（ChromatinImmunocleavage）和CUT&RUN（CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease）技术中。3.**ProteinA的特性**：ProteinA是一种发现于金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）的细胞壁表面蛋白，分子量为42kDa，能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）结合，通常结合部位为免疫球蛋白的Fc区。4.**微球菌核酸酶（MNase）的特性**：MNase是一种核酸内切酶，能够降解核酸，常用于降解蛋白质制备中存在的核酸，减少细胞裂解液的粘度，以及用于染色质结构分析和快速RNA测序。5.**反应条件**：MNase的反应条件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer，需要补充100µg/ml重组白蛋白，分子生物学级，并在37°C下孵化。

在PCR实验中，防止非特异性扩增的关键在于优化实验条件和采取一些特定的策略。以下是一些有效的方法：1.**优化引物设计**：引物设计是PCR成功的关键。应确保引物序列具有高度特异性，避免与非目标序列互补。使用在线工具进行引物设计，并进行BLAST搜索以确认特异性。2.**使用热启动PCR**：热启动PCR技术可以抑制室温下的DNA聚合酶活性，减少非特异性扩增。这种方法通过在高温下激起酶的活性，从而在PCR体系配制阶段降低引物与模板或引物与引物之间的非特异性结合。3.**调整Mg2+浓度**：Mg2+浓度对PCR扩增的特异性和产量有重要影响。过高的Mg2+浓度可能导致非特异性扩增，因此需要优化Mg2+浓度以获得比较好的结果。4.**退火温度优化**：退火温度对PCR特异性至关重要。较高的退火温度有助于减少非特异性结合，但过高的退火温度可能会降低引物与模板的结合效率。通常，退火温度设置比引物的Tm值低5°C左右。5.**使用降落PCR**：降落PCR（TouchdownPCR）通过在初始循环中使用较高的退火温度，然后逐渐降低退火温度，从而在PCR开始时减少非特异性扩增，同时在后续循环中保持特异性扩增。Cas12a不仅具有顺式切割活性，还具备独特的反式切割活性，这使得它能够无差别地裂解附近的单链DNA。

嗜热脂肪芽孢杆菌DNA聚合酶I（BstDNAPolymeraseI）和它的大片段（LargeFragment）是两种在分子生物学实验中常用的酶。它们的主要区别在于结构和活性：1.**结构**：-完整的BstDNAPolymeraseI包含一个5'→3'的核酸外切酶活性区域，而大片段是通过基因工程改造或蛋白酶处理去掉了这个外切酶活性区域的酶。因此，大片段没有5'→3'的核酸外切酶活性，但保留了5'→3'的DNA聚合酶活性。2.**活性**：-BstDNAPolymeraseI具有5'→3'的核酸外切酶活性，这意味着它在合成DNA的同时可以“校对”错误，切除不匹配的核苷酸。而大片段由于缺少外切酶活性区域，不具有这种校对能力。-大片段具有更强的链置换能力，这使得它非常适合于等温扩增反应，如环介导的等温扩增（LAMP）和滚环扩增（RCA）。3.**应用**：-BstDNAPolymeraseI由于具有校对功能，可能更适合于需要高保真度的DNA合成反应。-BstDNAPolymerase,LargeFragment由于其链置换能力，更适合于等温扩增技术，这些技术不需要热循环仪，可以在恒定温度下进行DNA扩增。4.**热稳定性**：-BstDNAPolymerase,LargeFragment通常在65°C左右的温度下进行反应，而BstDNAPolymeraseI可能具有更宽的反应温度范围。Multiplex Probe qPCR Mix 已预混了低浓度ROX参比染料，适用于需要低浓度ROX校正的荧光定量PCR仪 。Recombinant Protein L (Freeze-Dried) 重组蛋白L（冻干）

UDG在结构上属于单功能DNA糖基化酶，它通过沿着DNA链滑动，识别尿嘧啶分子，进行碱基切除。Recombinant Cynomolgus MSLN/Mesothelin Protein,hFc Tag

Lambda核酸外切酶（λExonuclease）在PCR产物的克隆中主要应用在以下几个方面：1.**单链DNA的生成**：-Lambda核酸外切酶可以用于从双链DNA中生成单链DNA。由于该酶沿5'→3'方向逐步切去5'单核苷酸，底物是5'磷酸化的双链DNA，因此可以用来消化PCR产物中的一条链，从而生成单链DNA，这对于某些克隆技术来说是必要的步骤。2.**PCR产物的克隆**：-在克隆过程中，有时需要将PCR产物的5'端磷酸化，以便与载体连接。Lambda核酸外切酶可以消化非磷酸化的DNA，从而在一定程度上帮助准备适合克隆的PCR产物。3.**减少自身环化和非特异性连接**：-在连接反应中，为了减少质粒载体的自身环化，可以使用碱性磷酸酶处理质粒DNA以去除5'磷酸基团。而Lambda核酸外切酶可以消化5'端磷酸化的DNA，因此在某些情况下，它可以辅助减少PCR产物的自身环化，尤其是在PCR产物和质粒载体的连接反应中。4.**提高克隆效率**：-通过消化PCR产物中的一条链，Lambda核酸外切酶可以帮助减少PCR产物的非特异性连接，从而提高克隆的效率和准确性。综上所述，Lambda核酸外切酶在PCR产物的克隆中主要通过生成单链DNA、准备适合克隆的PCR产物、减少自身环化和非特异性连接以及提高克隆效率等方面发挥作用。Recombinant Cynomolgus MSLN/Mesothelin Protein,hFc Tag