牛痘DNA拓扑异构酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)在实验室中的使用主要涉及以下几个步骤:1.**DNA载体连接**:-牛痘DNA拓扑异构酶I可以用于DNA载体连接,特别是在TOPO克隆载体制备中。它能够识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT],并与DNA形成共价连接形成稳定复合物,遇到DNA的5’-OH基团后,重新连接形成完整DNA链。2.**接头连接**:-在NGS建库中,牛痘DNA拓扑异构酶I可用于接头连接。这包括将含有特定序列的接头A和接头B与酶一起孵育,以实现DNA片段的连接。3.**操作步骤**:-**质粒解旋**:将超螺旋质粒DNA与牛痘DNA拓扑异构酶I混合,在37°C下孵育5-15分钟,以实现质粒的解旋。-**接头连接**:将接头A(含CCCTT序列)和接头B(含5’OH)与牛痘DNA拓扑异构酶I混合,在37°C下孵育5-15分钟,以实现接头的连接。4.**注意事项**:-双链接头A通常5’端做NH2封闭修饰,以防止自连接;接头A的CCCTT后通常包含5-12bp尾巴,再长的尾巴会导致连接效率大幅下降。-双链接头B的5’端必须包含-OH。-由于该酶应用广,在不同的实验中使用策略不同,需要灵活运用,并根据具体文献进行调整。
Pfu DNA Polymerase在基因克隆中的应用:Pfu DNA Polymerase常用于基因克隆,确保DNA片段的高精度复制。Recombinant Human CD42b/GP1BA Protein,His Tag

在现代分子生物学研究中,实时荧光定量PCR(qPCR)技术已成为基因表达分析、病原体检测、基因拷贝数变异研究等领域的工具。而One Step RT-qPCR Probe Kit凭借其产品特点和性能,为科研工作者提供了一种高效、可靠的解决方案,极大地推动了相关研究的进展。一、产品特点(一)一步法操作One Step RT-qPCR Probe Kit采用独特的一步法反应体系,将逆转录(RT)和qPCR反应集成在一个反应体系中。这种设计极大地简化了实验操作流程,减少了人为操作误差和样本污染的风险。相比传统的两步法,一步法节省了时间和人力成本,还提高了实验的重复性和稳定性,尤其适合高通量样本的检测。(二)高灵敏度与特异性该试剂盒采用了先进的探针技术,结合优化的酶体系和反应缓冲液,能够实现对低丰度靶标基因的高灵敏度检测。其特异性探针设计确保了与目标序列结合,避免了非特异性扩增的干扰,从而为定量分析提供了准确可靠的数据支持。无论是对微量样本中的基因表达进行定量,还是对低浓度病原体进行检测,One Step RT-qPCR Probe Kit都能表现出性能。Recombinant Mouse LOXL2 Protein,His Tag由于其高活性,pA-Tn5转座酶允许从极少量的细胞中进行实验,如单细胞水平的研究。

在分子生物学研究中,核酸染色是检测DNA和RNA的关键步骤,而溴化乙锭(EthidiumBromide,EB)作为一种经典的荧光染料,因其高效性和灵敏性被广泛应用于核酸电泳、荧光分析等领域。产品特点高灵敏度与特异性EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够特异性地嵌入双链DNA和RNA中。结合后,其荧光强度增强,双链RNA和双链DNA的荧光强度分别可增强21倍和25倍。这种特性使得EB能够检测到低至10ng的DNA条带,非常适合用于微量核酸的检测。多种应用EB不仅用于琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的核酸染色,还可以作为DNA聚合酶抑制剂,用于核酸的荧光分析实验。此外,EB还可与吖啶橙联合使用,用于区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞。便捷的使用方法10mg/ml的EB溶液是一种预制的储存液,使用时只需稀释至工作浓度(通常为0.5µg/ml),即可用于电泳前或电泳后的染色。例如,在琼脂糖凝胶制备时,每100mL胶液中加入2-5µL的10mg/mlEB溶液即可。稳定的储存条件10mg/ml的EB溶液在室温下避光保存即可,有效期可达1-2年。这种储存条件使得EB溶液在实验室中易于保存和管理。
Taq DNA Polymerase:科研中的关键工具Taq DNA Polymerase 是一种应用于分子生物学研究中的热稳定DNA聚合酶,其独特的性能和特点使其成为PCR技术的重要工具。产品特点Taq DNA Polymerase 的特点是其出色的耐热性。该酶来源于嗜热菌Thermus aquaticus,能够在高温条件下保持活性,适催化温度为75-80℃,即使在95℃下保温半小时,仍能保留50%以上的活性。此外,Taq酶具有5'→3'聚合酶活性,能够在PCR反应中高效地合成DNA链。然而,它缺乏3'→5'校正活性,这意味着在扩增过程中可能会引入少量错误,但对于大多数常规PCR应用而言,这种特性并不影响其好的使用。Taq酶的另一个重要特性是其5'→3'外切酶活性,这一特性使其在探针法qPCR中具有独特的优势。此外,Taq酶在PCR产物的3'末端会添加一个A碱基,这使得PCR产物可以直接用于TA克隆。该Master Mix不仅在长片段扩增表现出色,还具备保真性其保真性远高于普通Taq酶能够减少扩增过程中的错误率。

BstDNA聚合酶对dUTP的耐受性对实验结果有以下影响:1.**防止交叉污染**:BstDNA聚合酶具有较高的dUTP耐受性,这意味着它可以在反应体系中添加dUTP/UDG酶防污染系统的情况下工作,有效防止LAMP产物的交叉污染,确保数据的准确性。2.**保持灵敏度和扩增效率**:即使在引入dUTP/UDG酶防污染系统,使用dUTP替换dTTP的情况下,BstDNA聚合酶的灵敏度及扩增效率不受影响。实验数据显示,在反应体系中添加dUTP对BstDNA聚合酶的扩增灵敏度和效率没有负面影响。3.**提高实验的可靠性**:由于BstDNA聚合酶能够在高浓度的dUTP存在下保持活性,这使得它在进行等温扩增时更加可靠,尤其是在需要防止DNA污染的实验中。4.**兼容dUTP/UDG系统**:BstDNA聚合酶对dUTP的耐受性好,高度兼容dUTP/UDG系统,这对于避免交叉污染和提高实验结果的准确性至关重要。综上所述,BstDNA聚合酶的高dUTP耐受性为等温扩增实验提供了一个重要的优势,即在保持高灵敏度和扩增效率的同时,能够有效防止交叉污染,从而提高实验结果的可靠性和准确性。牛痘DNA拓扑异构酶I是一种来源于牛痘病毒的酶,有多种作用于DNA分子的能力。Cys-TAT(47-57)
来源于 Thermococcus kodakaraensis,具有高热稳定性和校正能力,适用于长片段PCR和热启动PCR。Recombinant Human CD42b/GP1BA Protein,His Tag
在分子生物学研究中,核酸染料是检测DNA和RNA的重要工具。然而,传统的溴化乙锭(EB)染料因其剧毒性和致病,逐渐被更安全的替代品所取代。GoldenView 吖啶橙核酸染料作为一种新型的核酸染料,凭借其性能和安全性,成为科研工作者的理想选择。GoldenView 吖啶橙核酸染料的成分是吖啶橙,这是一种细胞渗透性荧光染料,能够与核酸结合并发出荧光信号。其独特的荧光特性使其在检测双链DNA(dsDNA)时呈现绿色荧光(530 nm),而在与单链DNA(ssDNA)或RNA结合时则发出红色荧光(640 nm)。这种双重荧光特性不仅提高了检测的灵敏度,还为研究人员提供了更丰富的信息。在琼脂糖凝胶电泳中,GoldenView 吖啶橙核酸染料表现出与EB相当的灵敏度,能够清晰地检测到大片段(>1 kb)的DNA。此外,该染料的使用方法与EB完全相同,无需改变现有的实验流程,即可轻松替换传统染料。安全性是GoldenView 吖啶橙核酸染料的另一大优势。与EB不同,GoldenView 经过多项致突变性试验验证,结果均为阴性,表明其对细胞和环境更为安全。这种低毒性特性使其在实验室中使用更为便捷,同时降低了对研究人员健康的潜在风险。Recombinant Human CD42b/GP1BA Protein,His Tag
重组人LAMP5蛋白(Recombinant Human LAMP5 Protein, hFc Tag)是一种重要的溶酶体相关膜蛋白,属于LAMP家族成员,主要表达于免疫细胞,尤其是树突状细胞和巨噬细胞中。LAMP5(Lysosome-Associated Membrane Protein 5)在抗原呈递、免疫调节及细胞自噬等过程中发挥关键作用,是近年来免疫学及细胞生物学研究的热点分子之一。该重组蛋白采用真核表达系统(如HEK293细胞)制备,确保了其天然构象和生物活性。其C端融合了人IgG Fc(hFc)标签,不仅提高了蛋白的稳定性和溶解性,还便于通过Protein A亲和层析进行高效纯化。...