肉汤培养基(测磷细菌菌数)是一种把“富营养”与“溶磷筛选”合二为一的液体计数培养基。它在传统牛肉膏蛋白胨肉汤基础上进行精简:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g提供碳氮和生长因子;磷源改为0.2 g难溶性磷酸三钙,经球磨过300目,悬于蒸馏水中呈乳白混悬液;pH调至7.0±0.2,分装试管后121℃灭菌15 min,冷却振荡重悬即可接种。由于无琼脂,培养基既保持肉汤的高营养促生优势,又以悬浮颗粒Ca₃(PO₄)₂为“磷开关”,可同步完成溶磷功能验证和菌数测定,适用于土壤、根际或堆肥浸出液中溶磷菌群的快速评估。操作方法沿用比较大可能数(MPN)法:将样品按10⁻¹–10⁻⁶梯度稀释,各取1 mL加入含5 mL肉汤培养基的螺口管,每稀释度3重复,28℃静置培养48 h。溶磷菌生长使Ca₃(PO₄)₂颗粒被酸溶解,培养液由乳白→局部透明→全管澄清,并伴随菌膜形成;非溶磷菌虽可增殖,但培养基保持混浊无透亮。以“出现澄清+菌膜”为阳性管,查MPN表即可算出每克样品的溶磷菌数,全程只需3天,比平板溶磷圈法缩短一半时间。质量控制要点:灭菌后磷酸三钙易沉降,使用前需涡旋混匀;若肉汤本身含磷(牛肉膏批次差异),可先用磷钼蓝法测可溶磷,超过5 mg L⁻¹即弃用。强壮类芽孢杆菌的应用前景广阔,随着研究的深入,其在更多领域的潜力将被进一步挖掘。粟酒裂殖酵母
烟酸芽孢杆菌(Bacillus niacini)是芽孢杆菌属里的“维生素工匠”。20 世纪 90 年代由日本科学家在腐殖土中分离,因其能利用烟酸(维生素 B₃)为碳氮源生长而得名。菌体杆状、周生鞭毛,可形成椭圆芽孢,耐碱、耐干燥,更适 pH 8–9、温度 30–37 ℃,在贫瘠土壤里依然繁殖迅速。首要本领是“分解顽固”。基因组编码烟酸脱氢酶、6-羟基烟酸加氧酶等关键基因,可把腐殖质中的吡啶环打开,生成甲酸、酸和 NH₃,既为自身供能,也为周围微生物提供“开胃小菜”。在堆肥试验中,接种 10⁵ CFU/g 使稻草腐殖化度提高 25 %,堆体温度 48 h 升至 65 ℃,纤维素降解率增加 30 %,堆肥周期缩短 7 天。第二技能是“促生抗逆”。菌株 IAEA 能分泌 IAA 12 mg/L,并溶出有机磷 2.8 mg/L,玉米根系增 28 %,叶绿素提高 1.8 SPAD;同时产生环脂肽,对番茄青枯、黄瓜枯萎抑菌带宽达 24 mm,温室防病效果 58 %,与多菌灵相当。工业端,烟酸芽孢杆菌是“绿色催化剂”。其烟酸酶可将烟酸一步转化为 6-羟基烟酸,用于合成降压药尼群地平,底物转化率 98 %,比化学路线减少三废 70 %;耐热淀粉酶在 60 ℃仍保持 85 % 活性,已用于洗涤剂,节能 20 %。蜂蜜接合酵母浸麻类芽孢杆菌为天然纤维加工提供了一种绿色、高效且经济的方法。

甲基营养型芽孢杆菌是土壤里的“碳链炼金师”。它以甲醇、甲胺等一碳化合物为主食,却能把这些常被忽视的小分子变成高值产物。菌体在含甲醇的培养基中迅速萌发,分泌甲醇脱氢酶,将有毒的甲醇先氧化为甲醛,再经RuMP循环固定为果糖-6-磷酸,既获得能量,又合成自身所需碳骨架。整套反应在pH 7、30℃下效率比较高,甲醇转化率可达理论值的92%,远高于化学催化。更难得的是,它同时是一株“生物兵工厂”。在利用甲醇的同时,甲基营养型芽孢杆菌能合成表面活性素、泛革素等脂肽,对黄瓜枯萎、辣椒疫霉、番茄青枯的抑菌带宽达25-30毫米;其挥发性的3-甲基-1-丁醇、2-甲基吡嗪可诱导植物系统抗性,使棉花黄萎病指下降40%。田间试验表明,每亩用200克菌粉滴灌,玉米根际甲醇天然浓度降低60%,植株叶绿素提高1.5个SPAD单位,产量增加8%,且农药使用量减少三成。工业端,科研团队把聚-γ-谷氨酸合成酶基因导入甲基营养型芽孢杆菌,使其在消耗甲醇的同时产出高黏度γ-PGA,可作为保水剂、絮凝剂或医用敷料;5吨罐分批发酵,γ-PGA产量达25 g/L,成本比传统谷氨酸发酵低20%。此外,其芽孢可耐沸水煮15分钟、紫外照射两小时,喷雾干燥存活率超过90%,为大规模制剂化提供了便利。
BM液体培养基,全名Basal Mineral Liquid Medium,是微生物学界公认的“极简配方”。它只提供生命必需的矿物元素:K₂HPO₄ 1.0 g、KH₂PO₄ 1.0 g、MgSO₄·7H₂O 0.2 g、CaCl₂·2H₂O 0.02 g、Fe-EDTA 0.01 g,加蒸馏水至1 L,pH 6.5±0.1,无碳、无氮、无有机微量元素,因此也被称为“空白画布”。研究者可根据目标菌的代谢特点,精确添加单一碳源(如葡萄糖、苯甲酸、甲烷)、氮源(如NH₄Cl、NO₃⁻或尿素)及特定金属,实现代谢通路、降解基因或耐受机制的单变量研究。BM的高纯度与低背景使其成为环境微生物分离的优先。取河水或土壤浸提液,经0.22 μm过滤除菌后,取1 mL加入含BM的50 mL血清瓶,再投加目标污染物(如50 mg L⁻¹多环芳烃),28℃、150 r/min培养7天,即可富集到以该污染物为碳能源的降解菌群。继代3次后,稀释涂布于含BM的固体平板,菌落纯化率可达90%以上,极大减少杂菌干扰。此外,BM培养基在合成生物学中亦扮演重要角色。研究者可在BM中添加特定浓度的¹³C-葡萄糖或¹⁵N-NH₄Cl,实现全菌体同位素标记,为蛋白质组、代谢流分析提供干净背景;也可通过缺铁、缺锌的BM,研究金属调控蛋白的功能。随着对解蛋白奇异球菌研究的不断深入,其在生物技术、环境修复和医学领域的应用潜力将被进一步挖掘。

耐热芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)是微生物世界的“高温铁人”。其更适生长温度55–65 ℃,芽孢可耐100 ℃沸水2小时、紫外线辐照8小时仍存活,被广用于检验高压灭菌效果。该菌的耐热密码在于:细胞膜富含支链脂肪酸和钙-吡啶二羧酸复合物,降低膜流动性;组蛋白样蛋白紧紧包裹DNA,防止高温断裂;同时拥有一套高效热休克蛋白(Hsp)系统,可快速修复变性蛋白。在工业酶领域,耐热芽孢杆菌是“催化剂工厂”。其分泌的耐高温α-淀粉酶在90 ℃、pH 6.0条件下活性比较高,可将淀粉液化时间缩短一半,广用于酒精、制糖、纺织退浆,年市场需求超万吨;耐热蛋白酶则在60 ℃仍保持80 %活性,可用于洗涤剂,提高低温洗衣的去污力。此外,该菌还能合成耐高温木聚糖酶和脂肪酶,在造纸漂白和生物柴油合成中展现潜力。农业与环境方面,科学家将其与堆肥菌系复配,使堆温迅速升至65 ℃,加速有机质分解,杀灭病原菌和杂草种子,缩短堆肥周期30 %;在油田,耐热芽孢杆菌可耐受55 ℃、高盐环境,利用原油为碳源,产生生物表面活性剂,提高采收率5–8 %。变异棒杆菌是G+杆菌,染色不均匀,具有异染颗粒,排列不规则,常呈L、V、Y、歪斜的栅栏状 。噬尼古丁节杆菌
这种细菌不仅在科学研究中备受关注,还在工业、农业和医药等领域展现出巨大的应用前景。粟酒裂殖酵母
潘诺尼亚锁霉(Itersonilia pannonica)是一株担子菌门、锁霉属的低温丝状菌,原产中国,常见于草地、腐叶及冷藏蔬菜表面。菌丝白色至淡黄,扩展呈绒毯状,更适生长17℃,pH6,需氧,对盐浓度变化敏感,4℃保存即可。一、科研价值耐冷特性使其成为冷链食品研究的模式菌;与毡状金孢霉近缘,基因组含多种细胞壁降解酶基因,可用于低温酶筛选及担子菌系统发育分析。二、生物防治潜力培养滤液对灰霉、菌核等植物病原菌抑制圈达15–20 mm,并能分泌几丁质酶,分解线虫卵壳,盆栽试验使番茄根结线虫侵染率下降40 %,为开发低温生剂提供候选。三、低温酶应用菌株在10℃仍产较高活性纤维素酶和β-葡萄糖苷酶,可用于低温洗涤、纸浆漂白或冷链废弃物降解,节能20 %,降低高温处理成本。四、教学与质控生物危害四类,培养简易,国内多所高校将其列入“冷链微生物”教学实验,学生可通过梯度平板直观观察低温生长曲线,并用于冷藏食品监测的阳性对照。未来,借助合成生物学,把潘诺尼亚锁霉的冷活性酶基因导入工业酵母,有望构建“冷链-降解”一体化细胞工厂,为冷链物流、低温环保和绿色防控提供新工具。小小锁霉,用一把“冷钥匙”开启低温生物技术的广阔天地。粟酒裂殖酵母