MB培养基基础(Marine Broth Base)是一种专为海洋细菌设计的富营养液体培养基,由蛋白胨、酵母粉及多种无机盐组成,pH 7.2–7.6,渗透压与海水相当。配方中氯化钠浓度约2–3%,并补充镁、钾、钙等海水中主要离子,可瞬时启动依赖高盐环境的嗜盐菌与耐盐菌,缩短延滞期。实验室常规做法是将培养基干粉溶解于蒸馏水后,补加陈海水或人工海盐,即可恢复接近自然海水的离子谱,使挑剔的海洋放线菌、弧菌、假单胞菌等迅速进入对数生长,用于后续分离、保藏或活性物质筛选。由于海洋微生物常产色素、抗生物质及胞外多糖,MB培养基的高营养特性可充分展现这些次级代谢潜能:弧菌在28℃、180 r/min振荡培养12小时,菌浓即可达10⁹ CFU/mL,菌液呈乳白或淡粉;某些Planococcus则分泌墨蓝色素,使整瓶培养液变为靛蓝,成为天然色素研究的理想起点。若需固体培养,只需补加1.5%琼脂,即成MBA平板,可在表面涂布沉积物悬液,28℃培养2–3天,挑取形态各异的单菌落进行16S rDNA鉴定,流程简洁高效。在质量控制方面,MB培养基需用人工海水或陈海水配制,切忌直接使用自来水,以免钙镁离子不足或氯残留抑制菌体;灭菌后若出现沉淀,多为镁盐析出,可50℃水浴复溶,不影响使用。
威氏芽孢杆菌是土壤里低调的“多面手”。它先以杆状活菌在根际游弋,一遇干旱、高温便迅速缩成厚壁芽孢,可耐沸水煮十分钟、紫外曝晒两小时,仍能在十年后遇水萌发。植保学家把它当“杀菌剂”:芽孢复苏后分泌表面活性素、伊枯草菌素,像微型剪刀刺破病原菌膜,对白绢、根腐、灰霉的抑制率超七成;同时诱导植物开启系统抗性,番茄未染病就先“武装”叶片。温室试验显示,每亩用两百克菌粉拌基质,黄瓜枯萎率降四成,农药少打一半,果实仍青亮。更妙的是,它能分解有机磷长链,释放正磷酸供作物吸收,相当于给土壤配了“微肥”。东北大豆连作田因它缓解“磷饥饿”,亩产增8%。如今,生物公司以玉米浆发酵罐培养,把芽孢制成可湿性粉剂,拌种、滴灌皆宜,保质期两年,运输不必冷链。科学家还在其基因组里插入耐盐基因,让它在西北盐碱地也能萌发,为弃荒滩涂夺回粮田。小小威氏芽孢杆菌,用微米之躯守护绿色丰收,让农药瓶少一个,饭碗多一粒。大黄欧文氏菌该菌还能合成耐高温木聚糖酶和脂肪酶,在造纸漂白和生物柴油合成中展现潜力。

嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)是芽孢杆菌属的“高碱”。菌体杆状、周生鞭毛,能在 pH 9–11 的极端碱性环境中旺盛生长,芽孢可耐 100 ℃ 沸水 30 min,是研究碱适应与工业酶的模式菌株。一、耐碱机制基因组编码多拷贝 Na⁺/H⁺ 逆向转运蛋白(nhaA、nhaC)和碳酸酐酶,将胞内多余 Na⁺ 泵出并维持 pH 稳态;细胞壁肽聚糖富含 meso-二氨基庚二酸,膜脂分支化程度高,为高温高碱酶表达提供稳定平台。二、工业酶宝库其耐碱淀粉酶更适 pH 10、90 ℃,用于纺织退浆可省略中和步骤,节能 15 %;耐碱蛋白酶在 pH 11、40 ℃仍保持 90 % 活性,已列入无磷洗涤剂,血渍、奶渍去污力提升 30 %;耐碱木聚糖酶用于纸浆漂白,氯用量减少 30 %,降低可吸附有机卤化物(AOX)排放。三、农业应用菌株 AB-10 产 IAA 15 mg·L⁻¹,并溶磷 2.6 mg·L⁻¹,使玉米根系增 28 %,吸磷量提 18 %;与秸秆复配堆肥,24 h 堆温升至 65 ℃,纤维素降解率提高 30 %,堆肥周期缩短 7 d,杀灭病原菌和杂草种子效果明显。四、环境修复胞外多糖能吸附 Cd²⁺、Pb²⁺,吸附量分别达 50 mg·g⁻¹ 与 35 mg·g⁻¹;在 pH 9 的苏打盐碱土中定殖后,水稻产量增加 10 %,土壤交换性钠下降 15 %。
假坚强芽孢杆菌(Bacillus pseudofirmus)是芽孢杆菌属中“外柔内刚”的。菌落洁白、边缘整齐,杆状细胞可形成椭圆芽孢,且具周身鞭毛,能运动;它耐碱、耐盐、耐干燥,可在pH 9–11、8 % NaCl的极端环境中旺盛生长,故得名“假坚强”。首要本领是“生物降碱”。菌株OF4从肯尼亚盐碱湖分离,基因组携带多拷贝Na⁺/H⁺逆向转运蛋白基因,可在高盐高碱条件下维持胞内pH 7.5,同时分泌苹果酸、乳酸等有机酸,2 d内将周围pH由10降至8,为后定植作物营造“微酸绿洲”。盆栽试验中,用10⁷ CFU/g菌液拌土,碱蓬根际交换性钠下降35 %,燕麦出苗率提高50 %,产量增加18 %。第二板斧是“防病促生”。菌株BRCB16可产生环脂肽与几丁质酶,抑制番茄立枯、棉花黄萎等病原菌,抑菌带宽达25 mm;同时分泌IAA 15 mg/L,诱导玉米侧根增加30 %,吸磷量提升20 %。新疆盐碱棉田每亩滴灌200 g菌粉,黄萎病指降低42 %,皮棉增产8.6 %。工业端,假坚强芽孢杆菌是“碱性酶工厂”。其耐碱木聚糖酶更适pH 10,90 ℃半衰期2 h,用于纸浆漂白可减少氯用量30 %;耐碱蛋白酶已列入洗涤剂助剂,低温下仍能有效分解血渍、奶渍,节能20 %。如今生物公司把菌液封装成铝箔袋,春耕拌种即可,比化肥便宜三成,比粪肥干净百倍。

包姜氏液体培养基基础(BGA Broth Base)是为培养姜苗根茎共生促生菌而设计的富氮液体培养基,由包头师范学院与姜科作物团队共同优化,故得“包姜”之名。其配方以酪蛋白胨与大豆木瓜酶消化物提供与缓释氨基酸,酵母粉补充B族维生素和微量元素,可溶性淀粉作碳源,既避免葡萄糖过量产酸,又模拟根茎分泌物成分;特别添加0.3% K₂HPO₄与0.2% MgSO₄,缓冲能力强,可中和菌体代谢酸,维持pH 6.8–7.0,满足假单胞菌、芽孢杆菌及稀有放线菌的同步增殖。实际应用中,1 L培养基接种5 mL姜块研磨液,28℃、160 r/min振荡培养24 h,菌浓即可达2×10⁹ CFU/mL,菌液呈淡棕、微粘,带新鲜生姜清香;继续补糖发酵可产胞外多糖1.2 g/L,对番茄、辣椒具明显促根活性。若需固体分离,补加1.2%琼脂即得BGA平板,可直观观察菌落形态:有效菌株多呈乳白、边缘波状,48 h后在365 nm紫外下可见蓝绿色荧光,与16S rDNA序列联用,可在72 h内完成“功能—种属”双重鉴定。质量控制上,BGA培养基需用去离子水配制,高压灭菌后若出现轻微沉淀,为镁—磷复合物,50℃水浴摇匀即可;储存过程若液体变黄,提示淀粉水解过度,应废弃。菌株2-2a对大豆炭疽、黑斑、灰斑等叶部病害及根腐、立枯等土传病害兼具防效,且定殖速度快。小孢拟棘壳孢
③分泌蛋白酶与脂肽,抑制番茄青枯、辣椒疫霉,病指下降四成。全食副球菌
死谷芽孢杆菌,名字听来荒凉,却是沙漠表层更耐命的“绿洲工匠”。它更初在美国死谷盐壳下被分离,能在55℃、盐浓度15%的“卤水”里悠然萌发,芽孢外壁含特殊酸性肽聚糖,像给细胞穿陶瓷甲,紫外线、干燥、氧化齐攻亦难破。农业学家把它请进西北盐碱地,菌体复苏后分泌环脂肽,既松解板结土粒,又抢占根际生态位,抑制镰刀菌、丝核菌,使向日葵烂根率降四成;同时释放胞外多糖,裹住钠离子,降低植物盐分胁迫,亩产油脂提高一成。更妙的是,它能将难溶磷酸钙转化为有效磷,相当于自带“微肥”。科研团队用玉米浆发酵,把芽孢制成黑色粉剂,滴灌进新疆棉田,三年下来,土壤氯盐下降15%,棉花出苗率升两成,农药减施三成。如今,科学家正给它插入耐旱基因,希望让戈壁也长出稻浪。小小死谷芽孢杆菌,用微观之躯唤醒沉睡的盐碱,为人类夺回被盐分侵占的耕地,让荒凉名不副实,让沃野重获新生。全食副球菌