Cre重组酶在基因编辑中的操作主要涉及以下几个步骤:1.**识别与结合**:-Cre重组酶首先识别并分别结合两个LoxP序列的两个反向重复序列,形成一个二聚体。2.**四聚体形成**:-两个二聚体互相靠近,形成由四个Cre分子与两个LoxP位点结合形成的四聚体复合物。3.**DNA切割与交换**:-Cre重组酶在每个LoxP位点的间隔序列中引导单链切割,产生带有3’端羟基的断裂。每个LoxP位点的两个单链分别被切割。切割产生的自由3’端与对侧的3’端进行交换和重连,形成Holliday交叉结构。4.**分子重组与解旋**:-Holliday交叉结构通过Cre酶的作用被解旋并重组,形成新的重组产物。这个过程导致两个LoxP位点之间的DNA序列被删除、反转或易位,具体效果取决于LoxP序列的排列方式(方向和位置)。5.**条件性基因编辑**:-通过建立特异性Cre小鼠,该小鼠中的Cre重组酶由特定启动子驱动,可在特定细胞或组织或全身表达Cre重组酶。与带有Lox位点的Flox小鼠杂交,子代中可以获得既带有Cre又带有Flox基因的小鼠,实现条件性基因打靶(表达或敲除靶基因)。Phusion Master Mix (2×) 对各种类型DNA模板都有兼容性,无论是基因组DNA质粒DNA还是cDNA都能高效地进行扩增。Recombinant Human OPG-Fc

Uracil-DNAGlycosylase(Heat-labile,Bacterium)是一种来源于嗜冷海洋细菌的热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。该酶能够特异性地催化水解含有尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶碱基,释放游离尿嘧啶,并在DNA中产生无碱基位点(AP位点),从而防止PCR产物的气溶胶污染。产品特点与传统UDG酶相比,热敏UDG酶在室温下即可高效发挥作用,且对温度极为敏感,可在50℃下10分钟内完全失活。这种特性使其在PCR和RT-PCR反应中表现出色,尤其适用于需要快速灭活的场景。此外,该酶对单链和双链DNA均具有活性,但对RNA或不含尿嘧啶的DNA无作用。其高纯度和低残留特性使其在高投入量下也不会对检测体系产生抑制。应用场景去除PCR产物污染:通过降解含尿嘧啶的PCR产物,防止气溶胶污染导致的假阳性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反应中,热敏UDG酶可在逆转录前去除残留的PCR产物。单链或双链DNA处理:用于去除DNA中的尿嘧啶碱基。在使用过程中,建议将酶液存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后立即放回-20℃保存。此外,热敏UDG酶在RT-qPCR反应中表现出良好的兼容性,即使在高投入量下也不会对反应产生抑制。Recombinant Human OPG-FcMultiplex Probe qPCR Mix 已预混了低浓度ROX参比染料,适用于需要低浓度ROX校正的荧光定量PCR仪 。

在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的重要工具,而PfuMasterMix(2×)(WithDye)则是结合了高保真性和便捷性的理想选择。这种预混液不仅继承了PfuDNA聚合酶的重要的保真性,还通过添加荧光染料,为实验提供了更直观的监测手段。PfuMasterMix(2×)(WithDye)是一种即用型的2倍浓度预混液,含有PfuDNA聚合酶、dNTPs、优化的反应缓冲液以及用于实时监测的荧光染料。PfuDNA聚合酶以其高保真性著称,其3-5外切酶活性能够在DNA合成过程中纠正错误掺入的碱基,提高扩增产物的准确性。与普通Taq酶相比,Pfu酶的错误率更低,使其成为基因克隆、突变分析和测序准备等高精度实验的优先工具。荧光染料的加入是该预混液的一大亮点。这种染料能够在PCR过程中实时监测DNA的扩增情况,通过荧光信号的强度变化反映目标基因的扩增程度。实验人员无需额外添加染料或进行复杂的后处理,即可直接在PCR仪上观察扩增曲线,从而实现快速、准确的定量分析。这种设计不仅节省了实验时间,还减少了人为操作带来的误差。此外,PfuMasterMix(2×)(WithDye)的2倍浓度设计进一步简化了实验操作。实验人员只需加入模板DNA和引物,即可直接进行反应,减少了手动配制反应体系的步骤和可能出现的误差。
在分子生物学研究中,核酸染料是检测DNA和RNA的重要工具。然而,传统的溴化乙锭(EB)染料因其剧毒性和致病,逐渐被更安全的替代品所取代。GoldenView吖啶橙核酸染料作为一种新型的核酸染料,凭借其性能和安全性,成为科研工作者的理想选择。GoldenView吖啶橙核酸染料的成分是吖啶橙,这是一种细胞渗透性荧光染料,能够与核酸结合并发出荧光信号。其独特的荧光特性使其在检测双链DNA(dsDNA)时呈现绿色荧光(530nm),而在与单链DNA(ssDNA)或RNA结合时则发出红色荧光(640nm)。这种双重荧光特性不仅提高了检测的灵敏度,还为研究人员提供了更丰富的信息。在琼脂糖凝胶电泳中,GoldenView吖啶橙核酸染料表现出与EB相当的灵敏度,能够清晰地检测到大片段(>1kb)的DNA。此外,该染料的使用方法与EB完全相同,无需改变现有的实验流程,即可轻松替换传统染料。安全性是GoldenView吖啶橙核酸染料的另一大优势。与EB不同,GoldenView经过多项致突变性试验验证,结果均为阴性,表明其对细胞和环境更为安全。这种低毒性特性使其在实验室中使用更为便捷,同时降低了对研究人员健康的潜在风险。为复杂基因组研究提供了高效、可靠的解决方案,是分子生物学实验室的理想选择。

重组人TIM-1蛋白是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了hFc标签,便于纯化和检测。TIM-1(T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域蛋白1)是一种共刺激分子,主要表达于T细胞、B细胞、树突状细胞和某些非免疫细胞表面,广参与免疫细胞的启动、增殖和细胞因子分泌,在免疫调节和过敏反应中发挥重要作用。TIM-1的功能与机制TIM-1通过其胞外区的Ig样结构域与配体(如TIM-4)结合,传递启动信号,促进T细胞的增殖和细胞因子分泌。TIM-1的信号转导依赖于其胞内段的免疫受体酪氨酸启动基序(ITAM),启动后可招募多种信号分子,如Syk和PI3K,进而调节免疫反应。此外,TIM-1在过敏反应中也发挥关键作用,其高表达与过敏病、特应性皮炎等疾病密切相关。TIM-1还参与调节免疫细胞的黏附和迁移,影响免疫细胞在炎症部位的浸润。重组人TIM-1蛋白(hFc Tag)的特点重组人TIM-1蛋白(hFc Tag)具有以下明显特点:高纯度:纯度≥95%(经SDS-PAGE和SEC-HPLC验证),确保实验结果的可靠性。低内素:内素水平<0.1 EU/μg,适合用于细胞实验和体内研究。功能完整:保留了天然TIM-1的配体结合位点和信号转导功能。hFc标签:便于通过抗人IgG抗体进行检测和免疫沉淀实验。
对于20 kb以上的长片段扩增,建议适当延长退火/延伸时间,并根据需要调整Mg²⁺和dNTP浓度。Recombinant Human OPG-Fc
重组人Kremen-2蛋白(RecombinantHumanKremen-2Protein,HisTag)是一种重要的细胞表面受体,属于Kremen家族,主要参与调控Wnt/β-catenin信号通路。Kremen-2蛋白通过与Dickkopf(DKK)蛋白协同作用,抑制Wnt信号通路的启动,从而在胚胎发育、细胞增殖、组织稳态及病发生等过程中发挥关键作用。该重组蛋白采用真核表达系统(如HEK293细胞)制备,确保了其天然构象和生物活性。其N端融合了His标签,便于通过Ni-NTA亲和层析进行高效纯化,获得高纯度、高稳定性的蛋白产物。这种设计不仅提高了蛋白的溶解性和稳定性,也方便了后续的实验操作,如ELISA、Westernblot、免疫沉淀及蛋白相互作用研究等。研究表明,Kremen-2在多种病中表达异常,与肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移密切相关。此外,Kremen-2还参与调控骨代谢和神经发育等生理过程。因此,重组人Kremen-2蛋白不仅是研究Wnt信号通路的重要工具,也为开发相关疾病的治药物提供了有力支持,具有重要的科研和临床应用价值。Recombinant Human OPG-Fc
TaqDNA聚合酶:分子生物学的“明星酶”TaqDNA聚合酶是一种从嗜热菌Thermusaquaticus中分离得到的耐热性DNA聚合酶,因其独特的耐高温特性和高效的DNA合成能力,成为分子生物学领域不可或缺的工具。该酶在PCR(聚合酶链式反应)技术中发挥着重要作用,极大地推动了基因扩增、测序和诊断技术的发展。TaqDNA聚合酶具有5→3聚合酶活性和5→3外切酶活性,但缺乏3→5外切酶活性,这使得它在DNA合成过程中能够快速延伸引物,同时在PCR产物的3端添加一个突出的A碱基,便于后续的克隆操作。此外,Taq酶的耐热性使其能够在PCR的高温变性步骤中保持稳定,从而实现高效的循环扩增。近年来,科...